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- 武汉
- 2026年04月03日
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武汉
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武汉傲星生物科技有限公司
实验概念
当单个细胞在体外增殖6代以上，其后代所组成的细胞群体，称为集落或克隆。每个克隆含有50以上的细胞，大小在0.3-1.0mm之间。集落形成率表示细胞的独立生存能力，各种理化因素可能导致细胞的克隆形成能力发生改变，通过计数克隆形成率可对单个细胞的增殖潜力做定量分析，了解细胞的增殖能力和独立生存能力。软琼脂培养或平板克隆是最长用的方法。
注意事项
当单个细胞在体外增殖6代以上，其后代所组成的细胞群体，称为集落或克隆。每个克隆含有50以上的细胞，大小在0.3-1.0mm之间。集落形成率表示细胞的独立生存能力，各种理化因素可能导致细胞的克隆形成能力发生改变，通过计数克隆形成率可对单个细胞的增殖潜力做定量分析，了解细胞的增殖能力和独立生存能力。软琼脂培养或平板克隆是最长用的方法。
实验流程
调整细胞状态→制备单细胞悬液→按照不同的细胞浓度剃度把细胞均匀接种于培养平板→培养2-3周→观察克隆情况、Giemsa染色、计算克隆形成率注意事项
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文献和实验相关实验
数/接种细胞数）×100% 平板克隆形成试验方法简单，适用于贴壁生长的细胞。适宜底物为玻璃的、塑料瓶皿。试验成功的关键是细胞悬液的制备和接种密度。细胞一定要分散得好，不能有细胞团，接种密度不能过大。
工作台、水浴锅。 3.试剂：Giemsa染液、0.25%胰蛋白酶消化液、血清细胞培养液、安尔碘、琼脂。 （三）方法 1.平板克隆形成试验 本法适用于贴壁生长的细胞，包括培养的正常细胞和肿瘤细胞。 (1)对指数生长期细胞，采用常规消化传代方法，制成细胞悬液。 (2)细胞悬液反复吹打，使细胞充分分散，单个细胞百分率应在95%以上。细胞记数，并用培养基调节细胞浓度，待用。 (3)根据细胞增殖能力，将细胞悬液倍比稀释。一般按照每皿含50、100、200个细胞的浓度分别接种5ml
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平板克隆
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