MMa小鼠巨噬细胞1 x 10^6 cells/vial
MLF小鼠淋巴成纤维细胞5 x 10^5 cells/vial
MREpiC小鼠肾小管上皮细胞5 x 10^5 cells/vial
MCM小鼠心肌细胞1 x 10^6 cells/vial
MMSC-bm小鼠间充质干细胞-骨髓5 x 10^5 cells/vial
MEF小鼠胚胎成纤维细胞5 x 10^5 cells/vial
MEF-mt小鼠胚胎成纤维细胞-丝裂霉素处理5 x 10^5 cells/vial
MN-c小鼠皮质神经元1 x 10^6 cells/vial
MGC小鼠颗粒细胞1 x 10^6 cells/vial
MN-h小鼠海马趾神经元1 x 10^6 cells/vial
MSC小鼠雪旺细胞5 x 10^5 cells/vial
MA小鼠星形胶质细胞5 x 10^5 cells/vial
MA-c小鼠小脑星形胶质细胞5 x 10^5 cells/vial
MA-h小鼠海马星形胶质细胞5 x 10^5 cells/vial
MM小鼠小胶质细胞5 x 10^5 cells/vial
MLF小鼠淋巴成纤维细胞5 x 10^5 cells/vial
MREpiC小鼠肾小管上皮细胞5 x 10^5 cells/vial
MCM小鼠心肌细胞1 x 10^6 cells/vial
MMSC-bm小鼠间充质干细胞-骨髓5 x 10^5 cells/vial
MEF小鼠胚胎成纤维细胞5 x 10^5 cells/vial
HMSC-ad马间充质干细胞-脂肪5 x 10^5 cells/vial
DMSC-ad狗间充质干细胞-脂肪5 x 10^5 cells/vial
PCEpiC猪角膜上皮细胞5 x 10^5 cells/vial
PlEpiC猪晶状体上皮细胞5 x 10^5 cells/vial
ECM内皮细胞培养基500 ml
SMCM平滑肌细胞培养基500 ml
PM周边细胞培养基500 ml
MenCM脑膜细胞培养基500 ml
NsM神经前体细胞培养基500 ml
NPCM神经前体细胞分化培养基500 ml
OM少突胶质细胞培养基500 ml
OPCDM少突胶质前体细胞分化培养基500 ml
SCM雪旺细胞培养基500 ml
AM星形胶质细胞培养基500 ml
ACM星形胶质细胞培养基500 ml
布氏杆菌(BS)核酸检测试剂盒(荧光-PCR法)AM-a动物星形胶质细胞培养基500 ml
MM小胶质细胞培养基500 ml
MaM巨噬细胞培养基500 ml
MelM黑色素细胞培养基500 ml
使用方法:
注:所有试剂使用前需完全解冻,混合均匀,6,000rpm离心数秒后使用。
1.样本处理(样本处理区)
待检样本的核酸提取可采用病毒RNA提取试剂盒或自动化核酸提取仪等,具体提取方法请参照相关说明书;阳性质控品及阴性质控品无需提取,可直接使用。
2. 扩增试剂准备(PCR前准备区)
取N个(N=阴性质控品+待检样本+阳性质控品)PCR反应管,每管分别加入FMD RT-PCR反应液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根据每头份用量计算N+1份FMD RT-PCR反应液、RT-PCR酶所需总量,两者混匀离心后分装20 μl至单个PCR反应管)。
组分每头份用量FMD RT-PCR反应液19 μlRT-PCR酶。
1 .将所有PCR反应管于6,000rpm离心30s,转移至样本处理区。 2.加样(样本处理区)
3.在上述的PCR反应管中分别加入待检样本RNA提取物、阴性质控品和阳性质控品各5 μl,盖紧管盖,于6,000rpm离心10s,转移至扩增区。
荧光定量PCR原理:
荧光定量PCR最早称TaqMan PCR,后来也叫Real-Time PCR,是美国PE(Perkin Elmer)公司1995年研制出来的一种新的核酸定量技术。该技术是在常规PCR基础上加入荧光标记探针或相应的荧光染料来实现其定量功能的。其原理:随着PCR反应的进行,PCR反应产物不断累计,荧光信号强度也等比例增加。每经过一个循环,收集一个荧光强度信号,这样我们就可以通过荧光强度变化监测产物量的变化,从而得到一条荧光扩增曲线图。 一般而言,荧光扩增曲线可以分成三个阶段:荧光背景信号阶段,荧光信号指数扩增阶段和平台期。在荧光背景信号阶段,扩增的荧光信号被荧光背景信号所掩盖,无法判断产物量的变化。而在平台期,扩增产物已不再呈指数级的增加,PCR 的终产物量与起始模板量之间没有线性关系,根据最终的 PCR 产物量也不能计算出起始 DNA 拷贝数。只有在荧光信号指数扩增阶段, PCR产物量的对数值与起始模板量之间存在线性关系,我们可以选择在这个阶段进行定量分析。为了定量和比较的方便,在实时荧光定量 PCR 技术中引入了两个非常重要的概念:荧光阈值和 CT值。