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- 2025年07月15日
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- 品牌：
上海泉脉
- 货号：
002
- 供应商：
上海泉脉生物科技有限公司
以总RNA为模板，用SMART方法在体外反转录成cDNA，与适当质粒载体连接后转化受体菌，则每个细菌含有一段cDNA，并能繁殖扩增，这样包含着细胞全部mRNA信息的cDNA克隆集合称为该组织或细胞的cDNA文库cDNA文库中获得的是已经经过剪接、去除了内含子的cDNA。
文库特点：
1、材料用量少，只需1mg总RNA；
2、采用Clonetech SMART专利技术，技术成熟，全长比例高。
材料要求：组织（100～200mg）、细胞（>106）或总RNA (>1mg )，采用新鲜样本，RNA 无任何降解。
服务周期：得到合格的总RNA后25个工作日内。
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文献和实验RNA 构建cDNA文库要求的RNA量比做RACE和Northern blot的要多，在材料允许的情况下一般的试剂盒均推荐采用纯化总mRNA后进行反转录，这比直接采用总RNA进行反转录而构建的cDNA文库好，虽然后者也并不是不能做。老版本CLONTECH的SMART 4的中级柱子要求纯化后的总mRNA量最好在0.05-0.5微克左右，这就要求起始总RNA量较多。虽然有的试剂盒声称少至几十个纳克的总RNA也可以构建cDNA文库，但这是针对材料极为稀缺者而言，但起始RNA太少还是会或多或少影响文库构建
有SMART cDNA 合成和文库构建到? TriplEx2 或者Creator 供体载体 pDNR-LIB所需的试剂。因为该试剂盒是特别针对文库构建来设计的，所以它与Clontech™ PCR-Select™cDNA 差减杂交试剂盒不能配合使用。 SMART PCR cDNA Synthesis Kit 可以用来与Clontech™ PCR-Select™ cDNA 差减技术一起使用。总RNA 不能直接用来做差减实验，但可以通过SMART PCR cDNA Synthesis Kit 来扩增出
，以SMART 寡苷酸作为模板继续延伸。这样合成得到的单链cDNA 在3"端有一段与SMART 寡苷酸互补的序列，在5"端有一段与oligo(dT)引物互补的序列。这些序列作为下一步进行长距离PCR 的引物合成位点。结果可以得到富集全长序列的双链cDNA。 问：SMART 试剂 盒系列产品之间有什么差别？ 答： SMART cDNA Library Construction Kit 是用来从少量RNA 样本中构建高质量的cDNA 文库。 试剂 盒中包括有SMART cDNA 合成和文库构建
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