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- 2025年07月16日
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- 服务名称：
免疫共沉淀（Co-Immunoprecipitation）
- 提供商：
鸿立生物
- 规格：
IP
免疫共沉淀是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法。是确定两种蛋白质在完整细胞内生理性相互作用的有效方法。其原理是：当细胞在非变性条件下被裂解时，完整细胞内存在的许多蛋白质－蛋白质间的相互作用被保留了下来。如果用蛋白质X的抗体免疫沉淀X，那么与X在体内结合的蛋白质Y也能沉淀下来。这种方法常用于测定两种目标蛋白质是否在体内结合；也可用于确定一种特定蛋白质的新的作用搭档。
具体操作：
- 收获细胞，加入适量细胞裂解缓冲液（含蛋白酶抑制剂），冰上裂解30min, 细胞裂解液于4°c， 最大转速离心30 min后取上清；
- 取少量裂解液以备western blot分析，剩余裂解液加1μg相应的抗体加入到细胞裂解液，4°c缓慢摇晃孵育过夜；
- 取10μl protein a 琼脂糖珠，用适量裂解缓冲液洗3 次，每次3,000 rpm离心3 min；
- 将预处理过的10μl protein a 琼脂糖珠加入到和抗体孵育过夜的细胞裂解液中4°c缓慢摇晃孵育2-4h，使抗体与protein a琼脂糖珠偶连；
- 免疫沉淀反应后，在4°c 以3,000 rpm 速度离心3 min，将琼脂糖珠离心至管底；将上清小心吸去，琼脂糖珠用1ml裂解缓冲液洗3－4次；最后加入15μl的2×sds 上样缓冲液，沸水煮5分钟；
- sds-page, western blotting或质谱仪分析。
上海鸿立生物技术有限公司拥有稳固的技术平台，高效的服务团队。以技术服务为核心为广大客户提供真实可靠的实验数据，细致入微的服务。可为客户提供Western Blot,免疫共沉淀Real time PCR, Elisa 免疫荧光，激光共聚焦，病毒包装，MTT, Transwell 等单项实验服务，并有能力承接肿瘤，神经等方面的实验课题，帮助客户完成实验构思，操作及英文文章润笔等专项服务
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文献和实验最近 WB 的结果趋势不是很理想，因为给了蛋白 B 的抑制剂蛋白 B 却没有明显变化。于是大伙儿一合计，可能需要再看看蛋白质之间的相互作用，会不会是抑制剂影响了蛋白 B 和蛋白 C 之间的结合，而不是直接导致蛋白 B 的降解。大家都知道研究蛋白质相互作用的三大经典方法是：酵母双杂交（Y2 H），免疫共沉淀（CoIP）和 GST pulldown。结合我们课题组的这个实验，因为只需看看蛋白 B 和 C 之间的结合，而且已知蛋白 B 和 C 是会结合的，所以可能用 CoIP 最简便。那么问题
别再把 IP 和 CoIP 搞混！一文理清 5 种经典互作验证实验
就是承载这次提取的"服务器"，帮你把这个用户从平台里单独调出来。 3 研究目的 ① 从细胞裂解物中富集获取目标蛋白； ② 富集蛋白复合物，为后续实验（如质谱鉴定互作蛋白）做准备。 4 关键特点 只针对目标蛋白开展富集，本身不直接验证蛋白‑蛋白互作；但如果对沉淀得到的蛋白复合物开展质谱，能够筛选潜在互作蛋白，需要配套对照排除非特异结合。 CoIP（免疫共沉淀）捞蛋白，顺带验证它的"搭档" 1 核心
tyw5668 请问是不是免疫组化、免疫荧光、Elisa？谢谢 lianhongli 应该是酵母双杂、免疫共沉淀和共定位吧。 gingivalis 不管答案是什么，千万不要以为这就是权威。 方法是无限的。不怕做不到，就怕想不到。 summityoung 1.酵母双杂交是初筛 2.筛到得蛋白要用Co-IP、GST
