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- 上海徐汇
- 完善的服务，包括预实验，正式实验后续数据分析
- 2025年07月16日
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- 技术资料
- 服务名称：
免疫共沉淀（Co-Immunoprecipitation）
- 提供商：
鸿立生物
- 规格：
IP
上海鸿立生物技术有限公司拥有稳固的技术平台，高效的服务团队。以技术服务为核心为广大客户提供真实可靠的实验数据，细致入微的服务。可为客户提供Western Blot,免疫共沉淀Real time PCR, Elisa 免疫荧光，激光共聚焦，病毒包装，MTT, Transwell 等单项实验服务，并有能力承接肿瘤，神经等方面的实验课题，帮助客户完成实验构思，操作及英文文章润笔等专项服务
免疫共沉淀是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法。是确定两种蛋白质在完整细胞内生理性相互作用的有效方法。其原理是：当细胞在非变性条件下被裂解时，完整细胞内存在的许多蛋白质－蛋白质间的相互作用被保留了下来。如果用蛋白质X的抗体免疫沉淀X，那么与X在体内结合的蛋白质Y也能沉淀下来。这种方法常用于测定两种目标蛋白质是否在体内结合；也可用于确定一种特定蛋白质的新的作用搭档。
免疫共沉淀是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法。是确定两种蛋白质在完整细胞内生理性相互作用的有效方法。其原理是：当细胞在非变性条件下被裂解时，完整细胞内存在的许多蛋白质－蛋白质间的相互作用被保留了下来。如果用蛋白质X的抗体免疫沉淀X，那么与X在体内结合的蛋白质Y也能沉淀下来。这种方法常用于测定两种目标蛋白质是否在体内结合；也可用于确定一种特定蛋白质的新的作用搭档。
具体操作：
- 收获细胞，加入适量细胞裂解缓冲液（含蛋白酶抑制剂），冰上裂解30min, 细胞裂解液于4°c， 最大转速离心30 min后取上清；
- 取少量裂解液以备western blot分析，剩余裂解液加1μg相应的抗体加入到细胞裂解液，4°c缓慢摇晃孵育过夜；
- 取10μl protein a 琼脂糖珠，用适量裂解缓冲液洗3 次，每次3,000 rpm离心3 min；
- 将预处理过的10μl protein a 琼脂糖珠加入到和抗体孵育过夜的细胞裂解液中4°c缓慢摇晃孵育2-4h，使抗体与protein a琼脂糖珠偶连；
- 免疫沉淀反应后，在4°c 以3,000 rpm 速度离心3 min，将琼脂糖珠离心至管底；将上清小心吸去，琼脂糖珠用1ml裂解缓冲液洗3－4次；最后加入15μl的2×sds 上样缓冲液，沸水煮5分钟；
- sds-page, western blotting或质谱仪分析。
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