
单细胞ATAC测序服务(single cell ATAC s
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- 单细胞ATAC测序在表观基因组学水平上,揭示单细胞染色质的可及性问题,区分细胞异质性,获得开放染色质的位置、转录因子的结合位点、核小体的调控区域和染色质状态等信息,是单细胞表观遗传学的重要突破。
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- 2025年07月16日
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- 提供商:
上海烈冰生物医药科技有限公司
- 服务名称:
单细胞ATAC测序
ATAC-seq(Assay for Transposase-Accessible Chromatin with highthroughput sequencing)是利用转座酶研究染色质可及性的高通量测序技术。单细胞ATAC测序在表观基因组学水平上,揭示单细胞染色质的可及性问题,区分细胞异质性,获得开放染色质的位置、转录因子的结合位点、核小体的调控区域和染色质状态等信息,是单细胞表观遗传学的重要突破。
—— 单细胞ATAC测序能干什么?——
—— 技术原理 ——
基于10×Geomics ChromiumTM动态微流控技术,通过带有特定barcode标签的凝胶磁珠(beads)来标记细胞核,形成独立的油包水结构,进一步对Tn5转座酶酶切后的短片段进行PCR扩增,最后去除油滴,将所有的序列混合在一起,进行上机测序。
—— 技术优势 ——
—— 烈冰服务方案 ——
样本要求
样本类型:制备好的单细胞悬液,血液,培养的细胞系,冻存组织(限于脑和心脏组织)等。
质量要求:细胞活性大于80%,浓度为500-2000细胞/μl,体积不小于200μl,细胞培养基及缓冲液不能含Ca2+和Mg2+,细胞直径小于40μm。
单细胞ATAC测序数据分析流程
针对每个样本的单细胞scATAC-seq测序数据,对所有检测到的细胞进行分群并鉴定细胞类型,TF-motif鉴定和富集程度分析,Peak相关基因分析及差异可及性位点分析。其中包括:1)预处理(质量控制(QC)和比对);2)基本分析(peak calling、聚类、TF-motif、细胞亚群、marker基因、信号通路富集分析)。
部分结果示例
原始数据预处理
peak calling
聚类分析:通过t-SNE/Umap进行降维展示样本的细胞分群情况,图为t-SNE展示结果。
差异peak分析:针对特定亚群,进行亚群间差异Peak筛选,获得亚群间差异表达基因。
单细胞ATAC与单细胞转录组测序联合分析:实现对每种细胞类型的基因调控网络、潜在的染色质结构和关键转录因子的探测。
烈冰生物具备全套单细胞ATAC分选平台,为您提供完整的单细胞核测序全服务流程,涉及各种类型样本核制备、完善的实验质控流程、个性化的数据分析。
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文献和实验[1] Hu J, Wang S G, Hou Y, et al. Multi-omic profiling of clear cell renal cell carcinoma identifies metabolic reprogramming associated with disease progression[J]. Nature Genetics, 2024, 56(3): 442-457.
亦称游离细胞培养( free cell culfure)。是指酵母菌、细菌等单细胞生物的培养,或取多细胞生物体上的一个细胞的无菌培养。从多细胞生物中得到单细胞的办法是,开始对切离的组织的初始培养物( Primary culture)进行振荡培养,然后在连续培养中用适当的筛孔将游离的细胞分筛出来,再将收集起来的游离的单细胞悬浮在液体培养基中,最后用微量吸管吸取一个细胞。动物细胞的单细胞培养时,要适当稀释接种,为使得到的单细胞进行增殖,可以采用微量培养法和保护培养法,对浮游
to the library, emulsion PCR is conducted using the common primers to generate “bead clones” which each contain a single nucleic acid species.Figure 2. Clonal bead library generation via emulsion PCR.Each bead is then attached to the surface of a flow cell
单细胞凝胶电泳分析法(Single Cell Gel Assay)
物质对人体遗传基因影响的科学。人体每天暴露在大量的化学物质当中,为了诊测这些物质对人体DNA的影响,科学家们发明了多种测定方法,然而,多年来人们所使用的这些测试方法却不能准确与快速的辨识出会使人体致癌的物质。 为了解决这些问题,单细胞凝胶电泳法(Single Cell Gel Assay)应运而生,通常亦称之彗星分析法(Comet Assay)。它之所以称为彗星分析法是因为被破坏的DNA形似彗星,此方法已被证实是最具敏感性又最具快速性的方法。研究人员使用这种方法可在24小时内获得初步结果,在十天
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