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文献和实验时样本之间干扰。 Q:说明书上写细胞量为 1~5 × 105 ,细胞量多的话对检测结果有没有影响? A:建议细胞量最多不要超过 106个,过量的细胞相当于染料被稀释,影响染色和分离效果。一般 2×105 个细胞足够进行凋亡检测了,通常情况下检测 10,000 个细胞就能得到比较好的结果。 Q:是否可以用 PBS 替代凋亡试剂盒里面的 Binding Buffer? A:不行,Binding Buffer 是必须要加的,Annexin V 与 PS 的结合依赖 Ca2+,Binding
【求助】Annexin V-FITC/PI细胞凋亡试剂盒的使用
mmsong1987 我买了Annexin V-FITC/PI细胞凋亡试剂盒,想研究某种材料的细胞毒性,看其是否会诱导细胞凋亡。之前做过MTT之类的检测,结果显示材料基本无毒性。 由于条件限制(流式细胞仪在我们学校另一个校区)不能及时进行检测,前两天进行了一次实验,是将细胞收集后拿到测试地点再进行的荧光染色处理,检测结果显示阴性对照组没有加材料处理的细胞也多处于凋亡状态,个人猜测可能跟细胞在路上耽误的时间有关(悬浮在Annexin V结合液中
aspirin713 各位好,拜托大家给点建议 我最近在做FCM,主要是测药物对黑色素肿瘤细胞的生长周期的影响,用的方法是FCM PI染色的方法。 但是70%的乙醇固定之后,离心后可以看到有大量的细胞贴壁,把上清吸出去以后,可以看到沉淀留在底部,但是加入了PBS吹打均匀以后再离心。不管怎么样延长时间,或加大转速,就是没有细胞离到壁上,请问大家,这是怎么回事。应该如何避免上面这样的问题出现呢?! 干细胞之星 固定
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