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文献和实验不要太懒哦 请教各位高手,如果在细胞的消化传代过程中,我想以EDTA替代胰酶对细胞进行消化的话,EDTA的配方???浓度??多谢!! 佳杰宝贝 EDTA可以代替胰酶吗? 黑糊糊2000 EDTA 不能代替trypsin,EDTA是螯合剂结合钙离子的,钙离子可以抑制胰酶的作用,所以采用胰酶和EDTA一起来作用,当然EDTA 因为对螯合细胞结构之间的钙离子的作用,所以对细胞有一定程度的离散作用
问:请问哪位仁兄能告知一下EDTA-胰蛋白酶的配制。急用!多谢!答:1、胰酶是0.25%,这是质量体积比,就是说0.25g胰酶溶于100ml PBS,注意,尽量不要用水来溶,因为要保持渗透压。2、EDTA的工作液溶度是0.02%-0.1%,根据细胞消化的难易程度自己调整。EDTA并不是必须的,容易消化的细胞可不加。EDTA对细胞贴壁性有影响,因此使用时要甚重。如果影响贴壁,但消化时必须要用,那么在用完全培养基终止消化后,可离心弃上清,再加完全培养基培养,可去除EDTA。如果对贴壁没
适用于,无师兄、师姐、非细心、单独开展细胞培养的实验者 对一般细胞 0.25% 胰酶(胰蛋白酶,Trypsin) 配方:100ml PBS,0.25g胰酶 步骤:1先配100mlPBS(1000mlPBS:8.0gNaCl,3.4785gPO4HNa2・12H2O /2.9gPO4HNa2 ,0.2gKCl,0.2gPO4H2K溶于1000ml蒸馏水) 2 称胰酶0.25g 3 加入PBS中,低速搅拌 〈4h冰浴中,或者4℃过夜 低速搅拌0.5h冰浴中
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