人急性肾损伤(NGAL)ELISA试剂盒

人急性肾损伤（NGAL）ELISA 试剂盒｜产品详情（科研用）

一、基本信息

• 产品名称：人中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（NGAL/LCN2）ELISA 试剂盒
• 别名：急性肾损伤 NGAL 试剂盒、Lipocalin-2 ELISA 试剂盒
• 规格：48T / 96T（可拆条）
• 检测样本：血清、血浆（EDTA / 肝素）、尿液、组织匀浆、细胞培养上清、支气管肺泡灌洗液
• 检测原理：预包被抗人 NGAL 抗体 → 结合样本 NGAL → 生物素标记抗体 → HRP - 链霉亲和素 → TMB 显色 → 450nm 读数；OD 值与 NGAL 浓度正相关
• 灵敏度：≤4 pg/mL（最低检测限）
• 检测范围：4.1–1000 pg/mL（主流）；15.6–1000 pg/mL（部分品牌）
• 特异性：特异性识别人 NGAL，与 α1 - 抗胰蛋白酶、MMP-9、其他脂质运载蛋白无交叉反应
• 精密度：批内 CV＜10%，批间 CV＜12%
• 保存条件：2–8℃（6 个月）；-20℃（12 个月，避免反复冻融）
• 实验时长：标准流程约 3.5–4.5h；快速版 90min
• 用途：急性肾损伤（AKI）早期预警、重症监护（ICU）肾损伤监测、肾移植术后评估、慢性肾病（CKD）进展研究

二、试剂盒组分（96T）

三、样本处理要点

1. 血清：采血室温静置 30min，3000×g 离心 15min，取上清，-20℃保存，避免反复冻融。
2. 血浆：EDTA / 肝素抗凝，3000×g 离心 15min，取上清，-20℃保存。
3. 尿液：无菌收集，3000×g 离心 5min 去杂质，取上清；建议 1:20 稀释。
4. 细胞上清：收集培养液，3000×g 离心 5min，取上清，-20℃保存。

四、核心操作步骤（室温 20–25℃）

1. 试剂平衡：试剂盒室温放置 30min，20× 洗涤液稀释至 1×。
2. 加样（50μL / 孔）：设空白孔（稀释液）、标准品孔、样本孔（复孔）；加标准品 / 稀释后样本 → 加 50μL 生物素抗体 → 37℃孵育 60min。
3. 洗板：弃液，加满 1× 洗涤液，振荡 30s，拍干；重复 3 次。
4. 加酶：80μL HRP - 链霉亲和素 / 孔 → 37℃孵育 30min。
5. 洗板：重复步骤 3，洗 3 次。
6. 显色：各加 50μL TMB A/B 液 → 37℃避光 10–15min。
7. 终止读数：50μL 终止液 / 孔 → 立即450nm测 OD 值（15min 内完成）。

五、结果计算

1. 标准曲线：以 ** 标准品浓度（pg/mL）** 为 X 轴，OD 均值为 Y 轴，四参数拟合绘制曲线。
    

    
2. 样本浓度：根据样本 OD 值查曲线，乘以稀释倍数，得实际浓度。
3. 有效性：空白孔 OD＜0.1，复孔 CV＜10%，否则实验无效。

六、关键注意事项

• 仅限科研：不可用于临床诊断，操作需专业人员。
• 稀释比例：尿液 1:20、血浆 1:10、血清 1:5–1:10，避免浓度超上限。
• 温育严格：温度 / 时间偏差直接影响结果；显色必须避光。
• 避免污染：耗材无酶无菌，防止交叉污染；样本严禁反复冻融。