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上海达为科生物科技有限公司
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Co-IP技术服务
Co-IP技术服务
免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation, Co-IP)是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究两种蛋白质在完整细胞内生理性相互作用的有效方法。这种方法常用于测定两种目标蛋白质是否在体内结合;也可用于确定一种特定蛋白质的新的作用搭档,已成为研究蛋白质相互作用的经典方法。
染色体免疫共沉淀(Chromatin Immunoprecipitation,ChIP)是基于体内分析发展起来的方法,也称结合位点分析法,在过去十年已经成为表观遗传信息研究的主要方法。这项技术帮助研究者判断在细胞核中基因组的某一特定位置会出现何种组蛋白修饰。ChIP不仅可以检测体内反式因子与DNA的动态作用,还可以用来研究组蛋白的各种共价修饰 与基因表达的关系。近年来,这种技术得到不断的发展和完善。采用结合微阵列技术在染色体基因表达调控区域检查染色体活性,是深入分析癌症、心血管疾病以及中央神经系统紊乱等疾病的主要通路的一种非常有效的工具。
原理:是在活细胞状态下以甲醛固定蛋白质-DNA复合物,超声将其随机切断为长度范围内的染色质小片段,然后加入目的蛋白抗体,通过抗体沉淀靶蛋白-DNA复合物,通过洗脱的方法得到富集的靶蛋白-DNA复合物,特异性地富集目的蛋白结合的DNA片段,通过对目的片断的纯化与检测(PCR分析),从而获得蛋白质与DNA相互作用的信息。
服务流程:
1、构建表达质粒
2、共转细胞
3、收集并裂解细胞
4、加入蛋白A/G和抗体共同孵育
5、Western blot检测
客户提供:
1、新鲜的样本材料(组织、细胞或蛋白溶液)
2、免疫沉淀的抗体(或由公司代购)及待测蛋白的相关信息
3、用于western blot的一抗
交付内容:
实验报告:详细实验步骤、图片等。
服务列表
| 项目 | 备注 | 周期 |
| Co-IP | 含一个阳性蛋白和一个阴性蛋白检测 | 20个工作日 |
| Western blot | 包括蛋白提取,每张膜按8个样计算(其他三个为marker,阳性对照,阴性对照) | 5个工作日 |
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三篇顶刊论文,同一个技术选择——BiFC如何破解植物蛋白互作难题?
共沉淀(Co-IP)、GST Pull-down、表面等离子体共振(SPR)、等温滴定量热法(ITC)、染色质免疫沉淀(ChIP)、电泳迁移率变动分析(EMSA)等十余种主流分子互作检测平台。从方案设计、载体构建到实验执行、数据分析,金开瑞提供全流程一站式技术服务,同时配套供应相关实验试剂盒,满足您从前期筛选到最终验证的全部需求。 参考文献: [1] Ivanov S, Müller LM, Lefèvre FM, Harrison MJ. (2025). Yeast two-hybrid
—— co-IP 检测 Hsp90 与 Cdc37 结合情况1、实验材料SKBR3 细胞,PMSF(Amresco,cat:329-98-6),cocktail(上海晶莱生物),脱脂奶粉(cat:66196131T),β-actin(上海晶莱生物)。Anti-Hsp90(santa,cat:sc-69703)、Anti-Cdc37(santa,cat:sc-13129)、Protein A+G agrose(Beyotime),细胞刮,4 度离心机(eppendorf,centrifuge
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