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- 为了更直观的在细胞或组织内观察蛋白-蛋白相互作用及细胞定位， 对兴趣蛋白分别用不同颜色的荧光标记抗体进行结合，之后利用共聚焦显微技术（Confocal microscopy）获取细胞或组织内某个薄层面上的荧光信息, 并结合计算机自动控制和信息收集功能，对荧光信号的分布、强度和动态变化进行全方位的分析和整合, 从而得到丰富的细胞信息。
- 天津
- 2026年01月05日
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- 提供商：
天津科斯莫生物技术有限公司
- 服务名称：
免疫荧光共定位
原理：
为了更直观的在细胞或组织内观察蛋白-蛋白相互作用及细胞定位， 对兴趣蛋白分别用不同颜色的荧光标记抗体进行结合，之后利用共聚焦显微技术（Confocal microscopy）获取细胞或组织内某个薄层面上的荧光信息, 并结合计算机自动控制和信息收集功能，对荧光信号的分布、强度和动态变化进行全方位的分析和整合, 从而得到丰富的细胞信息。
实验流程：
1. 构建质粒；
2. 共转细胞；
3. 免疫荧光；
4. 激光扫描共聚焦显微镜扫描。
相关要求(客户提供)：
1. 提供已构建好的目的基因表达质粒(提供测序图谱)或基因的名称、序列；
2. 提供细胞系和细胞培养的详细步骤；
3. 提供抗体或细胞器的特异性Marker。
最终结果：
1. 提供构建好的载体质粒，并附上测序结果；
2. 提供共定位图片；
3. 完整的实验报告及具体试验流程(包括：实验步骤；主要仪器及试剂说明(含仪器厂家、型号；试剂厂家、批号))；
4. 原始实验图片及数据。
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电话：19902078713
邮箱：zxm@cosmobiolab.com
科斯莫生物主页：
地址：天津市滨海新区天津国际生物医药联合研究院
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文献和实验dhy481 如图，红色是TRITC标记的细胞膜上的一个蛋白，绿色是FITC连接的一段小肽，是在细胞固定前加入到培养基里的，大家帮忙看看，这是不是共定位，谢谢大家～ woxingwosu 看起来好像不是共定位。如果要说共定位，或者说小肽能结合到膜上的蛋白，我认为至少在膜上的绿色至少要比其他的地方要亮的多，这样才能说明是共定位，你这个有可能是非特异性的分布而已。需要加个对照来看看吧。个人意见，呵呵～～
实验试剂 高保真聚合酶(pfu ultra)，限制性内切酶(XhoI、SpeI、BamHI、SpeI、SacI)，金粉，无水乙醇，2.5MCaCl2 ，20ul 0.1M亚精胺 实验设备 PCR扩增仪，PDS-1000/He型基因枪，激光共聚焦显微镜(Carl Zeiss LSM 510 ) 实验材料 洋葱 实验
固定和透化 在培养板中将已爬好细胞的盖玻片用 1 × PBS 浸洗 3 次，每次 3 min。 用 4% 的多聚甲醛固定爬片 15 min，1 × PBS 浸洗玻片 3次，每次 3 min。 0.5%Triton X-100(1× PBS 配制 )室温通透细胞 15 min（细胞膜上表达的抗原省略此步骤）, 1 × PBS 浸洗玻片 3 次，每次 3 min。 封闭 吸水纸吸干 1 ×PBS，在玻片上滴加 5% 的正常血清（与二抗种属来源一致或相似），室温封闭 1 h
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