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- 提供商：
上海达为科生物科技有限公司
- 服务名称：
大鼠肾纤维化模型构建
| 品牌 | 其他品牌 | 产地类别 | 国产 |
|---|---|---|---|
| 应用领域 | 医疗卫生,生物产业,综合 |
肾纤维化为慢性肾病发展至终末期肾衰所必经的共同病理路径，病理改变包括肾间质纤维化和肾 小球硬化。 肾纤维化模型对慢性肾病发病机制的研究及其治疗药物的研发等存在现实意义。
动物：大鼠
造模试剂：阳离子牛血清白蛋白cationic bovine serum albumin，C-BSA
造模方法：试剂准备：（1）将60mg的C-BSA用30ml的PBS充分溶解，制成2mg/ml的C-BSA溶液，再与等体积的弗氏不完全佐剂充分混匀为乳白色悬液，使乳化完全。（2）称取C-BSA 1625mg，与650mlPBS充分混匀，制成2.5mg/mlC-BSA溶液。（3）将C-BSA冷冻干燥后测等电点，使PI=10（4）造模前将大鼠放入代谢笼中，每笼一只，收取大鼠24h尿液，进行24h尿蛋白定量测定。先取1ml（1）中乳白色悬液，分别1次性注射于每只大鼠的双侧腋下、腹股沟处作多点皮下注射，观察1周，之后每只大鼠隔日尾静脉注射1ml（2）中2.5mg/mlC-BSA4mg，共3周。当造模大鼠出现大量蛋白尿，肾小球系膜细胞、系膜基质增加，肾小管上皮细胞明显水肿、部分小管腔内可见蛋白管型，并可见间质炎细胞浸润，判断造模成功。
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文献和实验大鼠麻醉后，背部脱毛，于 T9-T11 胸椎区域消毒，划约 2-3cm 纵行切口，咬除椎板，暴露硬脊膜，将大鼠固定于多功能鼠固定台，应用脊髓打击器撞击骨髓（打击高度 12mm，重量 10g）大鼠出现尾部痉挛性摆动，表明造模成功。造模后，对各组大鼠进行脊髓损伤的行为学评分，利用斜板实验评测动物脊髓损伤后神经功能恢复情况，分析在脊髓损伤不同时期的变化规律。
麻醉好的大鼠绑定在多功能脑立体定位仪上，沿正中线切开头部皮肤，暴露出骨膜，轻轻切开骨膜。纯双氧水擦拭骨面，以前囟为准，采用两点注射：右侧黑质致密部(SNc)、中脑腹侧被盖区(VTA)。 SNc：前囟后(5.0)毫米, 矢状缝右侧(1.5)毫米, 硬脑膜下(7.8)毫米； VTA：前囟后(4.6)毫米, 中线右侧(0.9)毫米, 硬脑膜下(7.3)毫米。 用牙科钻钻开颅骨，用5μL微量进样器将药物注入右侧纹状体(速度为1.0 mm/min)，每孔4μL，注射速度为1μL/min，注射完毕后留针
大鼠俯卧位固定到手术台上，持续低剂量麻醉。消毒，沿右后肢大腿后外侧股骨干作一切口，暴露坐骨神经干及其远端分支，钝性分离肌肉，用玻璃分针分离出胫神经、腓总神经，分别用6-0丝线双重结扎胫神经、腓总神经，切断结扎远端，同时将神经断端远端剪掉2mm，注意保留腓肠神经，手术过程中应避免牵拉腓肠神经及其伴行的血管。操作结束后逐层缝合组织，再次碘伏消毒。
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