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- 2026年01月20日
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- 提供商：
上海达为科生物科技有限公司
- 服务名称：
鼻炎模型构建服务
1. 常用动物及选择依据
- 小鼠（BALB/c、C57BL/6）：
优势：基因背景清晰、成本低、免疫反应敏感。BALB/c对OVA（卵清蛋白）和花粉易致敏，C57BL/6适用于尘螨模型。
应用：过敏性鼻炎（AR）和嗜酸性粒细胞性鼻窦炎研究。 - 大鼠（SD、Wistar）：
优势：体型较大，便于手术操作；适用于鼻窦炎模型，如通过鼻腔堵塞诱导多窦炎症。 - 豚鼠：
优势：血清补体丰富，易产生高效价IgE，适合研究速发相和迟发相过敏反应。但饲养成本高且易因过敏反应致死。
2. 构建方法
（1）过敏性鼻炎模型
- OVA诱导法（经典方法）：
- 步骤：
- 致敏期：腹腔注射OVA（40 μg/kg）与佐剂（如氢氧化铝），每周1次，持续2-4周。
- 激发期：鼻腔滴注OVA溶液（25 mg/mL，20 μL/次），连续7天，诱导局部炎症。
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表型特征：
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行为学：喷嚏、挠鼻、流涕（评分标准见表1）。
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病理学：鼻黏膜水肿、嗜酸性粒细胞浸润、纤毛脱落。
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免疫学：血清IgE、IL-4、IL-5、IL-13显著升高，Th2型免疫应答占主导。
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尘螨模型：
优化致敏次数（4次腹腔注射）和激发剂量（致敏剂量的2倍），提高模型稳定性和重复性。
（2）慢性鼻窦炎模型
- 鼻源性感染模型：
- 方法：鼻腔植入含肺炎链球菌的消毒棉绒，堵塞窦口，模拟人类鼻源性感染。
- 特点：炎症高峰在10-14天，6周后转为慢性，病理表现包括腺体增生、黏膜水肿，符合临床特征。
- 非鼻源性感染模型：
- 方法：手术开放窦腔后注入细菌，或直接注射细菌至窦腔。
- 特点：炎症局限上颌窦，病理呈坏死性感染，但手术可能破坏黏膜结构。
三、模型评估指标
1. 病理学评估
- HE染色：观察黏膜水肿、炎细胞浸润（嗜酸性粒细胞、淋巴细胞）、腺体增生等。
- 特殊染色：
- 天狼星红染色：检测胶原沉积，评估纤维化程度。
- PAS染色：杯状细胞化生程度。
2. 免疫学指标
- 血清检测：IgE、IgG1水平升高（Th2型反应标志）。
- 细胞因子：IL-4、IL-5、IL-13（Th2相关）；IFN-γ（Th1相关），评估免疫平衡。
3. 行为学与症状评分
- 喷嚏/挠鼻次数：激发后20分钟内计数，总分≥5分视为模型成功。
- 鼻分泌物分析：嗜酸性粒细胞比例、ECP（嗜酸细胞阳离子蛋白）水平。
4. 影像学评估
- CT/MRI分类模型：基于VGG网络对鼻窦影像分类，准确度达83.94%，用于慢性鼻窦炎分型。
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文献和实验重组插入目的片段，启动子，终止子等是构建完整表达框时所需要的元件，标签序列等可以用于表达鉴定等实验。在质粒载体设计及构建工作中，根据实验的需求情况可以增减质粒载体上的具体元件，以及插入实验需要的相关基因。 2、质粒载体构建的常规流程 通常质粒载体构建的操作需要经过下图所示流程。其中目标序列确定需要根据实验需求以及查阅生物信息数据库的相关序列来确定。目标序列 PCR 扩增则根据实验需求以基因组 DNA 或者反转录得到的 cDNA 为模板，经过高保真 PCR 实验扩增得到相关目的片段。质粒载体确定由实验
内容概括： 1）质粒的基础知识； 2）质粒载体的构建流程； 3）片段重组的构建方案； 4）质粒载体构建的常见问题分析
zhangyuxianggx 各位大侠好！现有pcDNA3-mCherry和pGEM-hgene两个东西在滤纸上，老师就说让构建载体，具体是什么意思啊？我理解的是一个真核表达载体和构建好的pGEM质粒，但是不知下一步该怎么做？恳请各位好心的大侠指点一二。 shylook 直接插入cDNA吧 zhangyuxianggx 那个pGEM就是已经插入了DNA的载体。请问这两个东西溶下来以后
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