EpiQuik Acetyl-Histone H3 ChIP

做好 ChIP 的四个注意事项

或不稳定时，这些变量就更为关键。 第 1 步 – 采用对照（实验严谨更可靠） 虽然使用酶消化制备染色质，可以改善 ChIP 操作规程，但合理的对照和高度特异性的抗体也同样重要。在实验操作步骤中添加阳性和阴性对照抗体可确保分析正常进行且结果可靠。阳性对照许多市售的试剂盒附带 Rpb1（RNA 聚合酶 II 的最大亚基）的抗体，做为阳性对照抗体。但是，Rpb1 仅在活性转录位点结合，因此，如果要研究的位点是非活性位点，那么 Rpb1 实际上将作为阴性对照使用。CST 推荐使用 Histone H3 (D

浅析染色质免疫沉淀（ChIP）技术在 DNA 与蛋白质相互作用研究中的重要性

因子的结合位置。 ChIP 是染色质结构改变，特别是组蛋白修饰后，研究全基因组活化或抑制作用的少数工具之一。ChIP 可以针对乙酰化或者甲基化的组蛋白，富集该区域的 DNA ，因此可以进行基因组的多样性分析。2008 年，Xiang 等人 [7] 发现硒（Se）处理与前列腺癌细胞的 DNA 甲基化水平降低、组蛋白乙酰化水平升高、GSTP1（前列腺癌相关蛋白）活化有关。试验中，他们用 ChIP 技术富集了乙酰化 H3-k9 和甲基化 H3-K9，对分离获得的 DNA 进行多个基因的 PCR 扩增

做好 ChIP 的四个注意事项

实际上将作为阴性对照使用。CST 推荐使用 Histone H3 (D2B12) XP® Rabbit mAb (ChIP Formulated) #4620。该抗体可检测与基因组中所有 DNA 序列结合的所有组蛋白 H3 类型（H3、H3.3、CENP-A）。因此，不管检测的位点活性状态如何，该抗体都能为 ChIP 实验提供通用的阳性对照。 阴性对照 阴性对照抗体（如正常兔 IgG）不能识别特异抗原表位，因此可用于检测非特异性结合。例如，如果阴性对照样品中的产物量等于特异