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- 2026年01月13日
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上海达为科生物科技有限公司
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胸腺HE染色实验
一、实验步骤（以胸腺石蜡切片为例）
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样本固定与处理
- 新鲜胸腺组织需立即固定于10%中性福尔马林（pH 7.0-7.4）中12-24小时，避免组织自溶。
- 固定后沿矢状面切开，选取包含皮质和髓质的区域规范取材，确保结构完整性。
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石蜡包埋与切片
- 梯度脱水：依次用70%、85%、95%、100%乙醇脱水，每级2小时，二甲苯透明后浸蜡。
- 包埋时注意调整组织方向，使切面垂直于胸腺小叶结构。
- 切片厚度推荐3-4 μm，过厚易导致细胞重叠，影响髓质区Hassall小体观察。
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脱蜡与水化
- 脱蜡：二甲苯Ⅰ、Ⅱ各浸泡10分钟（若使用自动染色机可缩短至3-5秒）。
- 梯度水化：100%乙醇（两次）→95%→85%→75%乙醇，每级5分钟，蒸馏水终止。
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苏mu精染色与分化
- 浸入苏mu精染液5-15分钟（时间依染色液浓度调整），流水冲洗15-30分钟。
- 分色：1%盐酸酒精分化2秒，显微镜下控制至淋巴细胞核呈深蓝色而胞质无色。
- 蓝化：0.75%氯化铵溶液或饱和碳酸锂处理10秒，增强核对比度。
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伊红复染与脱水
- 伊红染色1-5分钟，胸腺髓质中上皮细胞胞质需染成粉红色，可滴加1-2滴冰cu酸增强着色。
- 梯度脱水：70%→85%→95%→100%乙醇，每级2分钟，避免伊红褪色。
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透明与封片
- 二甲苯透明10分钟，中性树胶封片，盖玻片需覆盖整个组织区域，避免气泡。
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