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- 2025年12月11日
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事先裁剪和装配好的三明治能节省western 杂交的时间。一张预裁剪好的膜（硝酸纤维或PVDF）和2张厚滤纸 预装配成一个大小适合Criterion 和Criterion XT 凝胶（8.5 x 13.5 cm）或Ready Gel/Mini-PROTEAN 凝胶（7 x 8.5 cm）的印迹膜/滤纸三明治。膜三明治有多种形式：0.2 和0.45 µm 硝酸纤维膜，这是一种经验证的western 杂 交介质；Immun-Blot PVDF 膜，用于高载量免疫印迹； Sequi�Blot PVDF 膜，用于蛋白测序。
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文献和实验使用者最大凝胶尺寸(W x L) 24 x 16 cm缓冲液要求200 ml凝胶容量≤3 块PROTEAN® II 凝胶三明治*3 块Criterion™ 凝胶4 块Mini-PROTEAN® 3 凝胶4 块Ready Gel® 预制胶 电源PowerPac™ HC 电源简介： 体积(W x L x H) 37 x 24 x 11 cm Sequi-Gen GT 测序电泳槽简介: 拥有专利* Sequi-Gen GT 测序电泳槽使测序胶的铺制和电泳变得更简单。系统设计避免
80 V)要低于分离胶电泳电压(建议 110-150 V)，以达到更好的浓缩效果，使样品进入分离胶时被压缩在同一水平线上。电泳直至溴酚蓝染料前沿下至凝胶末端处停止电泳，电泳时间约 2-3 小时。 电转（湿转法） 1） 电泳结束后取出凝胶，在电泳缓冲液中（冷藏的）漂洗数秒。按“三明治”模式，打开电转印夹，每侧垫上一块专用的转膜液浸泡透的海绵垫，再各放一块转膜液浸透的蛋白转移垫(定性滤纸），将凝胶平放在阴极侧滤纸上，最后将转膜液浸透并事先用甲醇浸泡的 PVDF 膜平放在凝胶上，去除气泡，夹好电
,500- 1000μl/瓶) ，刮落细胞，转移到Ep管。注意：冰上操作。 4.超声 10~15秒剪切DNA以减低样品粘性。 5.煮沸样品5 minutes。 6.离心12000g，5 min，取上清。 7.电泳分离：上样15μl~20μl 至 SDS-PAGE 胶 (10 cm x 10 cm)电泳。 如要定量检测某蛋白的表达水平， 应用RIPA裂解液(1 ml per 107 cells/100 mm dish/150cm2 flask)裂解
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