通用探针法荧光定量PCR试剂盒

需要自备的器材：
1．仪器：分析天平、离心机、荧光 PCR 扩增仪、组织研磨器、-20 ℃冰箱、可调移液器（2 µL、20
µL、200 µL、1000 µL）。
2．耗材：荧光 PCR 专用反应管、眼科剪、眼科镊、生理盐水、1.5 mL 经焦碳酸二乙酯（DEPC）水
处理的灭菌离心管、吸头（10 µL、200 µL、1000 µL）、灭菌双蒸水。
产品名称：通用探针法荧光定量PCR试剂盒
规格：Trichostrongylus spp.
分类：探针法荧光定量PCR
储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。
运输：低温、避光，快递免费送货上门。

特点：产品仅供科研使用
1.即开即用，用户只需要提供样品 DNA 模板，操作简单，定量准确快速。
2. 引物经过优化，特异性强。预期的 PCR 产物长度为 560 bp。
3. PCR mix 中含上样染料，PCR 后可以直接上样电泳。
4. 提供阳性对照，便于分析试验结果。
注意事项：
1．基础程序；
2．扩增温度和延伸温度；
3．反应时间；
4．循环次数；
5．PCR 反应液的配制；
6．PCR技术的基本原理；
7．PCR的反应动力学；
8．PCR扩增产物；
9．PCR反应体系与反应条件。
PCR实验外包服务：
PCR起源：荧光定量PCR（也称TaqMan PCR,以下简称FQ-PCR）是美国PE（Perkin Elmer）公司1995年研制出来的一种新的核酸定量技术，该技术是在常规PCR基础上加入荧光标记探针来实现其定量功能的，与变通PCR相比，FQ-PCR具有许多优点。与普通PCR相比，FQ-PCR具有许多优点：1、封闭反应，无需PCR后处理。2、特异性强，灵敏度高。3、采用对数期分析，摒弃终点数据，定量准确。4、定量范围宽，可达到10个数量级。5、仪器在线式实时检测，结果直观，避免人为判断。6、可实现一管双检或多检。7、操作安全，缩短时间，提高效率。荧光定量 PCR是 通过对 PCR 扩增反应中每一个循环产物荧光信号的实时检测从而实现对起始模板定量及定性的分析。
【结果分析条件设定】
u 基线（Baseline）设定：应选择该次实验指数扩增前所有样本荧光信号比较稳定的一段区域（所有样本荧光信号无较大波动），起始点（Start）应避开荧光采集起始阶段的信号波动，终止点（End）应比最早出现指数扩增的样本Ct值减少1~3个循环，建议基线设为6~15。
u 阈值(Threshold)设定：将阈值线设定在刚好超过正常阴性质控品扩增曲线的最高点。
【质控标准】
1.   阴性质控品的检测结果应为阴性，无指数扩增期，Ct=40或无Ct；
2.   阳性质控品的检测结果应为阳性，有明显的指数扩增期，Ct值应小于等于35；
3.   以上要求需在一次实验中同时满足，否则该次实验视为无效。
【结果判断】
1.   阳性：有明显的指数扩增期，且Ct＜38；
2.可疑：有明显的指数扩增期，且38≤Ct<40，此时样本为可疑样本；对于可疑样本建议复核一次，若复核结果Ct<40且有指数扩增期，则判定为阳性，否则判定为阴性；
3.   阴性：无指数扩增期，Ct=40或无Ct值均判定为阴性样本。
【对检验结果的解释】
1.   实验室环境污染、试剂污染、样品交叉污染会出现假阳性结果；
2.   试剂运输、保存不当或试剂配制不准确引起的试剂检测效能下降，可能会导致出现假阴性结果。

通用探针法荧光定量PCR试剂盒具有下列特点：
1. 一站式，足够 50 次酶切-连接反应、50 次预扩反应和 1600 次 AFLP PCR（PCR 按 30 uL 体系计算），但不包括 DNA 纯化和带型分析试剂（如 PAGE 电泳试剂和 银染试剂）。
2. 本系列产品提供 EcoRI-MseI 组合，适用于 GC 含量在 50%以上的基因组。对 GC 含量在 50%以下的基因组，需从本公司采购 AFLP（EcoRI-TaqI）组合。
3. 各种参数都经过优化，一次 PCR 所得 AFLP 片段数一般在 10-100 之间，可重复 性好，误差小于 0.6%。4. 本产品适用于基因组在 500 Mb-6000 Mb 的材料（如动物和植物），对于基因组 在 50-500 Mb 的材料（如细菌和真菌）或 50Mb 以下的材料（如质粒，cosmid， BAC，YAC 和 PAC 等），需要分别另购专门的+1 型预扩引物混合液和+3 型 EcoRI 引物（8 种）AFLP 引物对。
注意事项：
①加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照鸡血红蛋白(HB)ELISA检测试剂盒说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
F3 Others Human 人 Coagulation Factor III / Tissue Factor / CD142 人细胞裂解液 (阳性对照) 荧光素Fluorescein质量规格：AR
A172 人胶质母细胞瘤细胞钙黄绿素Calcein质量规格：IND
MCF-7-EGFP-puro(慢病毒构建稳定株)人癌细胞 MCF-7-EGFP-puro (leiviral consuct stable sain) in human breast cancer cells 1640+10%FBS+1%P/S+2ug/ml puromycin瑞氏色素Wright's stain质量规格：BS
RSPO1 Protein Human 重组人 R-Spondin 1 / RSPO1 蛋白吉氏色素,姬姆氏色素Giemsa stain质量规格：BS
人肺成纤维细胞 (HPF)( 5×105 ) mOPC, 小鼠少突胶质前体细胞 Mouse6-FAM, SE;6-羧基荧光素琥珀酯6-Carboxyfluorescein N-hydroxysuccinimide ester质量规格：0.9
HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/Cambodia/S1211394/2008) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人细胞裂解液 (阳性对照) 醋酸锂，二水(AR)Lithium acetate dihydrate质量规格：>99%,AR
人脑静脉血管内皮细胞完全培养基 100mL聚蔗糖400Ficol 400质量规格：>98%,BR
BSC-1细胞，猴肾细胞系 CHRF(人巨核细胞白血病) 叙利亚仓鼠肾细胞;BHK-21二硝基水杨酸3,5-Dinitrosalicylic acid质量规格：>98%,BR
EFNA5 Protein Mouse 重组小鼠 Ephrin-A5 / EFNA5 蛋白 (His 标签)丙二酸钠Sodium malonate质量规格：>98%
BC-022(人癌细胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠浆细胞瘤;MPC-111酸二氢钠二水Sodium phosphate, monobasic, dihydrate质量规格：>98.5%,分子生物学级
原代表皮角化细胞特制基础培养基Many types of cells包装：500/250/100ml胞嘧啶 质量规格：>99%,BRCytosine
CD59 Others Human 人 CD59 人细胞裂解液 (阳性对照) 胞嘧啶(标准品)质量规格：HPLC>98%,标准品Cytosine
MouseS 小鼠皮肤成纤维样细胞硫酸腺嘌呤 质量规格：>99%,BR,可用于细胞培养Adenine sulfate
猕猴肺细胞;MML2硫酸腺嘌呤(标准品)质量规格：HPLC>98%,标准品Adenine sulfate
WM451, 人色素瘤细胞尿苷-5'-二1酸葡萄糖钠盐(UDPG)质量规格：>98%,SigmaUridine-5-diphosphoglucose disodium salt
通用探针法荧光定量PCR试剂盒大鼠肝细胞;BRL 3A革兰氏染色液试剂盒(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ)shēng huà shì jì容量：1米
HPAC细胞，人胰腺腺泡上皮癌 人舌癌细胞,T6细胞 杂交瘤(B类);C3110D2E11D-赖酸 D-Lysine (HPLC,≥98%) 923-27-3 1G 通用试剂
JEG-3(人绒毛膜癌细胞) 5×106cells/瓶×2布洛芬相关物质C Ibuprofqn Rqlctqd CoMpound C;4-isobutylccqtophqnonq 38861-78-8
Promocell C-25010 Hepatocyte Growth Medium, 肝细胞生长培养基(即用型) 500ml4,4-二羟基二本砜shēng huà shì jì容量：RT100克
人间充质干细胞(骨髓)cDNAHMSC-bm cDNA迪克赛300Dexsi l300