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上海达为科生物科技有限公司
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细胞增殖-Brdu流式实验
| 品牌 | 其他品牌 | 应用领域 | 医疗卫生,生物产业 |
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细胞增殖-Brdu流式实验是达为科生物的基础服务项目之一,由专业的实验人员操作完成。
溴脱氧尿苷(5-溴代-2'-脱氧尿苷, BrdU) 是一种合成的核苷酸即胸苷的类似物。BrdU通常被用于检测活组织中再生的细胞。BrdU可以掺合到复制细胞中新的合成DNA中(在细胞周期S期),在DNA复制可代替胸苷。利用抗BrdU的特异性抗体便可以用于检测这个插入的化学品,从而检测出细胞是否在复制其DNA。
上海达为科生物科技有限公司,公司位于上海长江软件园,实验室面积600多平方米。我们拥有专业的实验室、先进的实验设备和经验丰富的科研技术人员。技术团队包括研究员(博士后)2人,助理研究员(博士)4人,核心研究员(硕士)15人,主要致力于基因组学、转录组学、蛋白质组学、代谢组学、生物化学、病理检测、基因检测等技术在科研中的应用与推广。公司目前具备较好的生物学、医学技术服务平台,能够为广大客户提供医学科研样本检测、合作研究、开发及生产服务。
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文献和实验willion1985 直接测定DNA合成是细胞增殖检测的最准确方法之一,是测定物质毒性、评估药物安全评价、细胞健康的基本方法,其中以前常用的方式是利用胸腺嘧啶核苷酸类似物----BrdU进行检测。因为在细胞周期的S期,和细胞一起孵育的BrdU能渗入DNA分子中,再结合BrdU抗体与渗入DNA的BrdU特异性结合,就能够检测到DNA复制活跃的细胞。 但BrdU有一大缺点,就是需要变性DNA后才能与抗体结合,但这就破坏了DNA双链结构,影响了其他染料的结合
5-brdu 的分子量为307.1,将100mg分为三份30.7mg(0.1mmol),溶于1ml三蒸水,分装-20度保存。用的时候再稀释100倍,如在1ml溶液里加入10ul即可。尽量分装为小剂量,如100ul,避免反复冻融使其活性降低。1、BudR贮存液的配制BudR 5mg(先用0.5ml 1N NaOH溶解)然后加蒸馏水至5ml,即成1000ug/ml的贮存液,因BudR遇光会发生分解,贮存液需置棕色瓶并黑纸封瓶避光冰冻保存。 一般用的是用10μg/ml终浓度。2、终止细胞培养前,加入
1. 细胞以 1.5 × 105 /ml 细胞数接种于直径 35ml 培养皿中(内放置一盖玻片),培养 1 天,用含 0.4 % FCS 培养液同步化 3 天,使绝大多数细胞处于 G0 期。 2. 终止细胞培养前,加入 BrdU (终浓度为 30 μ g/L ), 37 ℃,孵育 40min 。 3. 弃培养液,玻片用 PBS 洗涤 3 次。 4. 甲醇 / 醋酸固定 10min 。 5. 经固定的玻片空气干燥, 0.3 %










