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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 货号:
S809507
- 产地:
美国
- 供应商:
swichtgear
- 库存:
大量
- 质粒大小:
3910+1586
| Product ID | S809507 |
| Vector name | pLightSwitch_3UTR |
| Gene symbol | BID |
| Insert length | 1586 |
| Restriction pair | NHE1XHO1 |
| NOTE | The sequence below is sequence from the reference human genome. The actual cloned fragment may contain SNPs or other naturally occurring sequence variants. |
| Sequence | AGCTGATTCTGGCTTTTTCTCCTTTCTTGCTCTAGGGGATGGACTGAACGGACAGTTCCA GAAGTGTGACTGGCTAAAGCTCGATGTGGTCACAGCTGTATAGCTGCTTCCAGTGTAGAC GGAGCCCTGGCATGTCAACAGCGTTCCTAGAGAAGACAGGCTGGAAGATAGCTGTGACTT CTATTTTAAAGACAATGTTAAACTTATAACCCACTTTAAAATATCTACATTAATATACTT GAATGAAAATGTCCATTTACACGTATTTGAATGGCCTTCATATCATCCACACATGAATCT GCACATCTGTAAATCTACACACGGTGCCTTTATTTCCACTGTGCAGGTTCCCACTTAAAA ATTAAATTGGAAAGCAGGTTTCAAGGAAGTAGAAACAAAATACAATTTTTTTGGTAAAAA AAAATTACTGTTTATTAAAGTACAACCATAGAGGATGGTCTTACAGCAGGCAGTATCCTG TTTGAGGAAAGCAAGAATCAGAGAAGGAACATACCCCTTACAAATGAAAAATTCCACTCA AAATAGGGACTATCTATCTTAATACTAAGGAACCAACAATCTTCCTGTTTAAAAAACCAC ATGGCACAGAGATTCTGAACTAAAGTGCTGCACTCAAATGATGGGAAGTCCGGCCCCAGT ACACAGGGGCTTGACTTTTTCAACTTCGTTTCCTTTGTTGGAGTCAAAAAGAACCACTTG TGGTTCTAAAAGGTGTGAAGGTGATTTAAGGGCCCAGGTCAGCCACTGTTTGTTTACAAA ATCAGGTAACTAACTGCATACACTTTTTCTCTTTCCATGACATCAAGACTTTGCTAAAGA CATGAAGCCACGGGTGCCAGAAGCTACTGCGATGCCCCGGGAGTTAGCCCCCTGGTAATA GCTGTAAACTTCCAATTTCTAGCCATACGCTCAGCTCATCCATGCCTCAGAAGTGCATCT GGAGAGAACAGGTTTCTAAGCATAAAAGATGAAAGAGCAGTTGGACTTTTTAAAAATTCA GCAAAGTGGTTCCCTCTCTTAGGGACAGTCAAAACCAAGTCACTTAGGTAGTACCAAAAT AAATAAGGAAAAGCTTAGCTTTAGAAACAGTGCAACACTGGTCTGCTGTTCCAGTGGTAA GCTATGTCCCAGGAATCAGTTTAAAAGCACGACAGTGGATGCTGGGTCCATATCACACAC ATTGCTGTGAACAGGAAACTCCTGTGACCACAACATGAGGCCACTGGAGACGCATATGAG TAAGGGCACTGACGGACTCATGATTTCTTCTTACCAGATGCTTTCCTGTTCTTTAAGAGT TTAAAATCATCAGAAAGGAAAAACAAACTCTATATTGTTCAGCATGCAATACATACCACG CTAGGGCTGGCTCAATTGAAAGTGGGCAAAAGCTTACAAATACTAAAAAGAAGTGCTGCC GCGCAGTGTGGAGGCCACTGTTTGGAAATAAATCTTCCTAACACTACGACTTTTCATGTT TTGGAGTGGACTTTTAAAAAAGTTTTCCAACCACAATGGAAACAGGTTGAACCACACTGC GCCTACACATCCATCCATACGTCAGC |
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文献和实验1 在 3'UTR 中插入一个 sgRNA 或一个 sgRNA 阵列后,细胞系中 mCherry 报告荧光信号的表达情况。 Part3 通过显微镜观察到的荧光信号反映目标基因转录水平 为进一步探讨荧光报告系统的特性,我们建立了一个可控的 Tet-on 系统,该系统可以通过调节 Dox 的浓度,实现 EGFP 基因不同程度的表达量,进而用来研究报告系统的荧光信号强度是否可以很好地反映目标基因的表达水平。 研究发现,报告系统的 mCherry 表达量和 EGFP 基因的表达量有很强的相关
-Seq 对抓取的 DNA 进行测序,获得 DNA 结合序列的信息(不过这个可以被生信分析工具所预测一下)。3. 荧光素酶报告系统在荧光素酶报告基因载体的报告基因编码区的下游插入 ncRNA 结合序列或者 mRNA 的 3』UTR 区,然后将构建好的载体转染细胞并改变细胞中相应 miRNA 的表达水平,通过检测荧光素酶的表达情况以分析 ncRNA 或者 mRNA 的 3』UTR 区中是否含有 miRNA 的靶位点。同理任意两种 RNA-RNA 互作都可以利用这个原理。三、蛋白质维度作用的 ncRNA
。 miRNA靶基因预测:miRNA通过碱基互补配对的方式识别靶基因的3’UTR区,并根据互补程度的不同指导沉默复合体降解靶mRNA或者阻遏靶mRNA的翻译。因此,可以将目的基因的3’UTR区域构建到含luciferase的报告基因上,通过比较miRNA过表达或inhibitor 与报告基因作用检测荧光值的变化,判断miRNA对靶基因的作用。再通过对3’UTR区进行定点突变的方法进一步确定miRNA与靶基因3’UTR的作用位点。 miRNA常用数据库: · miRbase(http://www
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