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- 2026年05月05日
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上海吉玛
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H00001
microRNA靶基因荧光素酶报告载体
吉玛采用Promega的psicheck2.0的载体系统完成靶基因3’ UTR质粒载体构建服务。可提供基于人、小鼠、大鼠基因的UTR构建。
psicheck2.0报告基因检测系统用来检测siRNA/miRNA与靶基因是否可能存在调控作用，该报告系统报告荧光(hRluc)，其下游构建了靶基因3’UTR区域，通过对该荧光的监测，即可验证siRNA/miRNA对该靶标是否有调控作用；另有一校正荧光(hluc) 作为稳定内参，用于监测质粒表达效率。
严格的实验体系，要求miRNA与mRNA 3’ UTR验证实验中需要构建靶mRNA的点突变载体，以验证靶点作用有效性。突变载体构建主要依据预测的miRNA与靶基因3’UTR的稳定结合区域(即种子区)。通过种子区全部碱基或部分碱基突变导致miRNA与靶基因3’UTR区域的结合能力大大降低，从而判断是否存在miRNA的调控作用。
完成miRNA靶基因报告基因载体构建，需要客户提供：miRNA具体信息，预测靶基因信息，miRNA与靶mRNA结合位点信息。
| 套餐搭配 | 促销价格 | 周期 |
| A-1结合靶点预测和UTR序列载体构建 | 2200元 | 10-15个工作日 |
| A-2结合靶点预测和UTR序列载体构建+突变体构建 | 4000元 | 15-20个工作日 |
| B-1干扰序列/mimics(2OD)+UTR序列载体构建 | 2500元 | 10-15个工作日 |
| B-2干扰序列/mimics(2OD)+UTR序列载体构建+突变体构建 | 4300元 | 10-15个工作日 |
| C-1干扰序列/mimics(2OD)+UTR序列载体构建+验证服务 | 8000元 | 10-25个工作日 |
| C-2干扰序列/mimics(2OD)+UTR序列载体构建+突变体构建+验证服务 | 10000元 | 10-25个工作日 |
注：
a. 靶基因3’ UTR长度须小于500bp，否则价格及合成周期另计；
b. 单位点(即1个miRNA-mRNA作用位点) 突变价格如上，多位点突变价格及合成周期另计。
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文献和实验的发生有关。 拿到这样的结果，已经是一个很好的开始了。 图片来源：文献截图 2、从 mRNA 到 miRNA 寻找靶向关系 从 mRNA 到 miRNA 也是这个研究引入外泌体的重要步骤。作者预测了可能与 FOXO1 靶向的 miRNA，根据软件预测结合文献研究，最终选择了 miR-135b。 发现 miR-135b 在胃癌组织中显著上调，表达与 FOXO1 的 mRNA 水平呈现负相关，说明他们之前可能存在靶向调控关系。 当然，作者在文章中没有一开始去验证这个关系，在后续通过双荧光素酶实验证
信号和超高的信噪比，本系统被广泛用于miRNA靶基因 验证。 转录因子是一种具有特殊结构、行使调控基因表达 功能的蛋白质分子，也称为反式作用因子。某些转录因子仅与其靶启动子中的特异序列结合，这些特异性的序列被称为顺式因子，转录因子的DNA结合域和顺式因子实现共价结合，从而对基因的表达起抑制或增强的作用。萤光素酶报告基因实验(luciferase Assay)是检测这类转录因子和其靶启动子中的特异顺序结合的重要手段，其原理简述如下： (1)用靶启动子的特定片段替换
：同上述的lncRNA方法步骤。 circRNA敲除：同上述的lncRNA方法步骤。 circRNA靶基因寻找：同上述的miRNA和lncRNA双荧光素酶检测方法。 和元生物的优势： 项目经验丰富，成功率高； 价格优惠，享受折扣； 实验周期短； 完善的售后服务。 和元生物提供的服务： 服务内容 服务形式一 服务形式二 整体课题外包服务 miRNA过表达 质粒构建 慢病毒/腺相关病毒/腺病毒
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