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- 2025年07月08日
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文献和实验riset 看了一些文献，常用的荧光素酶质粒是pGL3，但是这个质粒图谱上，荧光素酶下游只有一个XbaI的酶切位点，不是多克隆位点，请问是如何解决克隆片段顺序问题的。谢谢。 shilei5794749 用你序列的特异上游引物和RVprimer4，正向连进去菌P能扩出条带；反向连进去的扩不出条带。 riset 多谢指教，另外再问下，UTR一般都比较长，不能全部克隆,一般克隆多长合适
pGL3 Luciferase Reporter Vectors
The pGL3 Luciferase Reporter Vectors provide a basis for the quantitative analysis of factors that potentially regulate mammalian gene expression. These factors may be cis-acting, such as promoters and enhancers, or trans-acting, such as various DNA
【求助】启动子片断插入到了pgl3basic载体中，为什么没有检测到荧光？参与者：smile1688我把一个基因的启动子片断插入到了pgl3basic载体中，但是却没有测到荧光。阳性对照，即Pgl3 control检测到荧光。推测：1、启动子片断错误。1000bp，已测序验证，在ATG前40bp，推测离转录起始位点还有200bp以上。2、细胞的转录效率太低。但是Pgl3 control和TK值都在10万以上。3、细胞内的因子没有启动启动子活性。启动子和转染的细胞不是同一个物种，但是大家好
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