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WB蛋白免疫印迹技术

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      上海达为科生物科技有限公司

    • 服务名称

      WB蛋白免疫印迹技术

    品牌 其他品牌 产地类别 国产
    应用领域 医疗卫生,生物产业,综合

    WB蛋白免疫印迹技术是将蛋白质转移到膜上,然后利用抗体来进行检测的一种方法。该种技术可以同时比较多个样品同种蛋白的表达量差异。
    WB免疫印迹( Western Blot)是将蛋白质转移到膜上,然后利用抗体进行检测的方法。对已知表达蛋白可用相应抗体作为一抗进行检测,对新基因的表达产物,可通过融合部分的抗体检测。
    与Southern或Northern杂交方法类似,但Western Blot采用的是聚丙xi酰胺凝胶电泳,被检测物是蛋白质,“探针”是抗体,“显色”用标记的二抗。
    经过PAGE分离的蛋白质样品,转移到固相载体(例如硝酸纤维素薄膜)上,固相载体以非共价键形式吸附蛋白质,且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变。以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原,与对应的抗体起免疫反应。再与酶或同位素标记的第抗体起反应,经过底物显色或放射自显影以检测电泳分离的特异性目的基因表达的蛋白成分。该技术也广泛应用于检测蛋白水平的表达。


    上海达为科生物科技有限公司,公司位于上海长江软件园,实验室面积600多平方米。我们拥有专业的实验室、先进的实验设备和经验丰富的科研技术人员。技术团队包括研究员(博士后)2人,助理研究员(博士)4人,核心研究员(硕士)15人,主要致力于基因组学、转录组学、蛋白质组学、代谢组学、生物化学、病理检测、基因检测等技术在科研中的应用与推广。公司目前具备较好的生物学、医学技术服务平台,能够为广大客户提供医学科研样本检测、合作研究、开发及生产服务。


     
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    • 蛋白免疫印迹(Western Blot)技术手册

      。经过PAGE分离的蛋白质样品,转移到固相载体(例如硝酸纤维素膜NC膜 )上,固相载体以非共价键形式吸附蛋白质,且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变。以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原,与对应的抗体起免疫反应,再与酶或同位素标记的第二抗体起反应,经过底物显色或放射自显影以检测电泳分离的特异性目的基因表达的蛋白成分。该技术也广泛应用于检测蛋白水平的表达。其图解为: Western Blot显色的方法主要有以下几种: i. 放射自显影 ii. 底物化学发光ECL iii. 底物荧光ECF iv

    • 蛋白免疫印迹技术

      免疫印迹(immunoblotting)又称蛋白质印迹(western blot),它是根据抗原抗体的特异性结合检测复杂样品中的某种蛋白的方法。western blot是在凝胶电泳和固相免疫测定技术基础上发展起来的一种新的免疫生化技术。由于免疫印迹(western blot)具有SDS-PAGE的高分辨力和固相免疫测定的高特异性和敏感性,现已成为蛋白分析的一种常规技术免疫印迹(western blot)常用于鉴定某种蛋白,并能对蛋白进行定性和半定量分析。主要实验步骤如下:1. 蛋白质抽提实验

    • 免疫印迹技术的灵敏度

      ,需要对抗原进行部分纯化。可采用细胞分步分离,层析或免疫沉淀的方法进行;如果待测抗原的分子量与细胞中含量丰富的蛋白(例如肌动蛋白)相近似,转膜将不会受到限制。有若干种方法常用于提高免疫印迹的灵敏度。一种是在电泳之前应用免疫沉淀法将抗原进行纯化和浓缩。该法可浓缩浓度极低浓度的抗原,并可在电泳和免疫印迹之前将其与无关的蛋白质分离,使对极低浓度抗原的研究成为可能。其它提高检测灵敏度的方法都是针对增强信号本身强度设计的。其中包括使用信号更好和更强的荧光试剂或使条带局部酶的活性增强。一些公司不断地推出新的性能

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