- ￥748
- 雅酶
- YJ012
- 2026年01月04日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 规格：
1mL
伴刀豆球蛋白A(ConA)磁珠
Concanavalin A Magnetic Beads
本产品4℃运输；保存于4℃，禁止产品冻结，长期存放请保证试剂管竖立向上，保质期24个月。
货号规格
goodYJ012 1 mL
产品简介
good本产品采用新一代纳米表面生物技术，将伴刀豆球蛋白A高密度共价偶联在超顺磁性纳米微球表面，可用于从血清和细胞提取物中分离糖蛋白。与当前国际市场上同类产品相比，其具有更大的特异性表面区域及更多的表面蛋白结合位点，非特异性结合低，使用起来简便高效。
产品参数
| 项目 | 参数 |
| 粒径 | 1 μm |
| 浓度 | 10 mg/mL |
自备试剂
| 缓冲液 | 推荐配方 |
| 结合缓冲液 | 1×PBS, 1 mM MgCl2, 1 mM MnCl2, 1 mM CaCl2 (pH7.4) |
| 漂洗缓冲液 | 1×PBS, 1 mM MgCl2, 1 mM MnCl2, 1 mM CaCl2 (pH7.4), 0.1% Tween 20 |
| 洗脱缓冲液 | 5 mM Tris(pH 8.0), 0.15 M NaCl, 0.05% SDS, 1 M Glucose |
操作步骤
good◆ 样本处理
good◆gg1. 准备哺乳动物细胞(1.0×104~1.0×105个)，离心收集(4℃，600×g，3~5 min)，小心吸弃上清；
good◆gg2. 加入90 μL 结合缓冲液 ，充分混匀重悬细胞，离心收集(4℃，600×g，3~5 min)，小心吸弃上清；
good◆gg3. 加入90 μL 洗脱缓冲液 ，同时加入蛋白酶抑制剂(货号：GRF101)，充分混匀重悬细胞；
good◆ 磁珠预处理
good◆gg4. 用移液器轻柔吹打 伴刀豆球蛋白A磁珠 ，使其充分混悬，取10 µL磁珠悬液置于新的1.5 mL 离心管中，接着在磁力架上静置1 min，待磁珠吸附到离心管侧壁上后，吸弃上清；
good◆gg5. 加入200 μL 结合缓冲液 ，用移液器轻柔吹打重悬磁珠，接着在磁力架上静置1 min，待磁珠吸附到离心管侧壁上后，吸弃上清；
good◆gg6. 重复步骤5一次；
good◆gg6. 注意：面对多个样品时，可先将总共所需的磁珠预处理后再分装到各个反应管中。
good◆ 样品的结合
good◆gg7. 在预处理后的磁珠中加入步骤3处理后的细胞样本，置于翻转混合仪上孵育(常温30 min)，接着在磁力架上静置1 min，待磁珠吸附到离心管侧壁上后，小心吸弃上清，离心管中剩余的即为 蛋白-磁珠复合物 ；
good◆ 洗涤
good◆gg8. 在步骤7得到的 蛋白-磁珠复合物 中加入 500 μL 漂洗缓冲液 ，用移液器轻柔吹打磁珠，使其充分混悬，接着在磁力架上静置1 min，待磁珠吸附到离心管侧壁上后，吸弃上清。再重复此步骤两次；
good◆ 蛋白洗脱
good◆gg9. 在步骤8得到的 蛋白-磁珠复合物 中加入50~250 μL 洗脱缓冲液 ，置于翻转混合仪上孵育(常温10~30 min)，接着在磁力架上静置1 min，待磁珠吸附到离心管侧壁上后，收集上清，即为目的蛋白。
注意事项
good1. 避免使用含有EDTA或其它金属螯合剂的试剂，否则会降低磁珠与蛋白的结合效率；
good2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作；
good3. 本产品仅限科研使用。
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文献和实验凝集素，四聚体球蛋白，含有糖基结合位点，因此 ConA 是一种糖类结合蛋白。ConA 磁珠能与细胞膜上的糖蛋白结合，从而吸附细胞，使对细胞的实验操作可视化，减少在后续实验过程中的细胞的损失。 不建议使用离心法代替 ConA beads，因为离心法不适合于低细胞数，在洗涤的过程中，损失很大，而且大肠杆菌残留的 DNA 无法进行可靠的校准。 5.做 ChIP-seq 的时候不需要二抗，CUT&Tag 二抗的作用是什么？二抗是必须的吗？可以用带修饰（比如 HRP 修饰）的二抗
隆抗体和MACS间标微珠。未结合抗体、生物素化抗体或者荧光素标记抗体均可作为一抗标记细胞，再使用抗免疫球蛋白微珠、抗生物素或链霉亲和素微珠、抗荧光素微珠作为二抗磁性标记细胞。 几乎针对任何种系任何细胞的任何一种单抗或多抗，均可用于间接标记。间接标记主要在如下情况时选用：当没有直标磁珠时；需要用几种抗体的混合物同时分选或去除多种类型的细胞；间接标记有放大作用，因此可在磁性分选抗原表达弱的目的细胞时使用；使用自备抗体或者配体的磁珠分选中。
微珠可以最大限度地避免细胞活化；无需解离磁珠，可以直接进行后续实验：如流式细胞仪分析或分选、细胞培养、分子生物学研究、回输给人或者动物。 MACS微珠主要有三种：直标微珠、间标微珠、多选微珠。其中间标微珠有抗免疫球蛋白微珠、抗生物素微珠或链霉亲和素微珠、抗荧光素微珠。多选微珠是专门为分选细胞亚群而研制的一种微珠。这种微珠通过特殊的方式与抗体偶联，在第一次阳性分选完成后，与细胞结合的多选微珠可以被解离试剂剪切下来，阳性分选的细胞可以进行再次阳性分选或者去除分选。 MACS技术分选的CD
