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- 详细信息
- 技术资料
- 规格:
1mL
伴刀豆球蛋白A(ConA)磁珠
Concanavalin A Magnetic Beads
本产品4℃运输;保存于4℃,禁止产品冻结,长期存放请保证试剂管竖立向上,保质期24个月。
货号规格
goodYJ012 1 mL
产品简介
good本产品采用新一代纳米表面生物技术,将伴刀豆球蛋白A高密度共价偶联在超顺磁性纳米微球表面,可用于从血清和细胞提取物中分离糖蛋白。与当前国际市场上同类产品相比,其具有更大的特异性表面区域及更多的表面蛋白结合位点,非特异性结合低,使用起来简便高效。
产品参数
| 项目 | 参数 |
| 粒径 | 1 μm |
| 浓度 | 10 mg/mL |
自备试剂
| 缓冲液 | 推荐配方 |
| 结合缓冲液 | 1×PBS, 1 mM MgCl2, 1 mM MnCl2, 1 mM CaCl2 (pH7.4) |
| 漂洗缓冲液 | 1×PBS, 1 mM MgCl2, 1 mM MnCl2, 1 mM CaCl2 (pH7.4), 0.1% Tween 20 |
| 洗脱缓冲液 | 5 mM Tris(pH 8.0), 0.15 M NaCl, 0.05% SDS, 1 M Glucose |
操作步骤
good◆ 样本处理
good◆gg1. 准备哺乳动物细胞(1.0×104~1.0×105个),离心收集(4℃,600×g,3~5 min),小心吸弃上清;
good◆gg2. 加入90 μL 结合缓冲液 ,充分混匀重悬细胞,离心收集(4℃,600×g,3~5 min),小心吸弃上清;
good◆gg3. 加入90 μL 洗脱缓冲液 ,同时加入蛋白酶抑制剂(货号:GRF101),充分混匀重悬细胞;
good◆ 磁珠预处理
good◆gg4. 用移液器轻柔吹打 伴刀豆球蛋白A磁珠 ,使其充分混悬,取10 µL磁珠悬液置于新的1.5 mL 离心管中,接着在磁力架上静置1 min,待磁珠吸附到离心管侧壁上后,吸弃上清;
good◆gg5. 加入200 μL 结合缓冲液 ,用移液器轻柔吹打重悬磁珠,接着在磁力架上静置1 min,待磁珠吸附到离心管侧壁上后,吸弃上清;
good◆gg6. 重复步骤5一次;
good◆gg6. 注意:面对多个样品时,可先将总共所需的磁珠预处理后再分装到各个反应管中。
good◆ 样品的结合
good◆gg7. 在预处理后的磁珠中加入步骤3处理后的细胞样本,置于翻转混合仪上孵育(常温30 min),接着在磁力架上静置1 min,待磁珠吸附到离心管侧壁上后,小心吸弃上清,离心管中剩余的即为 蛋白-磁珠复合物 ;
good◆ 洗涤
good◆gg8. 在步骤7得到的 蛋白-磁珠复合物 中加入 500 μL 漂洗缓冲液 ,用移液器轻柔吹打磁珠,使其充分混悬,接着在磁力架上静置1 min,待磁珠吸附到离心管侧壁上后,吸弃上清。再重复此步骤两次;
good◆ 蛋白洗脱
good◆gg9. 在步骤8得到的 蛋白-磁珠复合物 中加入50~250 μL 洗脱缓冲液 ,置于翻转混合仪上孵育(常温10~30 min),接着在磁力架上静置1 min,待磁珠吸附到离心管侧壁上后,收集上清,即为目的蛋白。
注意事项
good1. 避免使用含有EDTA或其它金属螯合剂的试剂,否则会降低磁珠与蛋白的结合效率;
good2. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作;
good3. 本产品仅限科研使用。
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