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- 2025年12月27日
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上海达为科生物科技有限公司
- 服务名称：
定量蛋白组学
| 品牌 | 其他品牌 | 产地类别 | 国产 |
|---|---|---|---|
| 应用领域 | 医疗卫生,生物产业,综合 |
定量蛋白组学：技术是依据细胞生长对必需氨基酸的依赖原理，利用稳定同位素标记（ 13C，15N，2H）的必需氨基酸对细胞蛋白质组进行代谢标记的方法；13C,15N,2H是稳定同位素，没有放射性，因此可以在常规条件下进行试验。
Arg(R)、Lys(K)、Leu(L)是SILAC常用的氨基酸。将(13C，15N，2H)等稳定同位素标记的R、K、L加入细胞培养基中，在细胞进行蛋白质合成时，这些稳定同位素标记的氨基酸自然被“掺入”到蛋白质中。通过>6代的细胞增殖，整个细胞的蛋白质组会被稳定同位素氨基酸”标记”；
SILAC“标记”了蛋白质与“未标记”的蛋白质（普通培养基培养）存在数目的质量差异，该质量差异在后续LC-MS的质谱( MSl)中呈现一对同位素质谱峰，通过质谱峰的信号强度能实现对2组样品中每一个蛋白质表达水平的定量，终能确定蛋白质表达水平差异（差异蛋白质组学分析）和区分特异性和非特异性相互作用（蛋白质相互作用分析）；同时通过质谱( MS/MS，MS2)实现对样品中蛋白质的鉴定。
SILAC技术结合LC-MS能同时实现对2组样品中蛋白质的定性和定量分析。通过定墨信息能直接反映出样品之间的蛋白质表达水平差异，便于快速找到感兴趣的目标分子。同时，利用SILAC技术，能明显提高文章的档次。
SILAC氨基酸对照表：
SILAC实验设计：
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文献和实验全文下载： http://www.ebioe.com/down/html/down_276.htm Paul R. Graves 1 and Timothy A. J. Haystead 1 ,2 * Department of Pharmacology
本节课程介绍了label-free定量蛋白质组学技术的原理及应用。主要包括：（1）以MS数据为例，系统介绍label-free技术进行蛋白质定量的技术流程和原理。（2）介绍免费的label-free分析套件—Maxquant和Perseus。（3）以免疫沉淀（IP）数据为例，展示label-free进行蛋白质互作定量的应用。（4）以数据为例，展示label-free在外泌体蛋白定量分析中的应用。
定量蛋白质组学分析 定量蛋白质组学分析（Quantitative Proteomics）是对一个基因组表达的全部蛋白质或一个复杂混合体系内所有蛋白质进行精确鉴定和定量。可用于筛选和寻找任何因素引起的样本之间的差异表达蛋白，结合生物信息学揭示细胞生理病理等功能，同时也可对某些关键蛋白进行定性和定量分析。目前定量蛋白质组学技术常见标记（Label）和非标记的（Label Free）定量策略。 定量蛋白质组学技术常见的几类主要包括：Label Free定量蛋白组分析、SILAC与免疫
