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- FS-P99284
- 2025年07月09日
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低温冷藏
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详见说明书
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详见说明书
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100
- 供应商：
上海抚生
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50次
特异性强
PCR反应的特异性决定因素为：
①引物与模板DNA特异正确的结合；
②碱基配对原则；
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性；
④靶基因的特异性与保守性。
大鼠甲种胎儿球蛋白/甲胎蛋白(AFP)免疫试剂盒 GAPDH 3-磷酸甘油醛脱氢酶（兔来源免疫组化用抗体）
大鼠甲羟戊酸5-焦磷酸脱羧酶(MDD)免疫试剂盒 GAPDH(3E12)-Loading Control 3-磷酸甘油醛脱氢酶单克隆抗体(内参抗体)
大鼠极低密度脂蛋白(VLDL)免疫试剂盒 GAS2L1 生长停滞特异性蛋白2家族1抗体
大鼠激肽原(KNG)免疫试剂盒 GPR97 G蛋白偶联受体97抗体
大鼠激动异构酶/细胞分裂素MB(CKMB)免疫试剂盒 GBP7 G蛋白结合蛋白7抗体
大鼠基质细胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)免疫试剂盒 GFP 绿色荧光蛋白抗体
大鼠基质细胞衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)免疫试剂盒 GFP 绿色荧光蛋白抗体
大鼠基质金属蛋白酶抑制因子3(TIMP-3)免疫试剂盒 GPS1 G蛋白通路抑制蛋白1抗体
大鼠基质金属蛋白酶抑制因子2(TIMP-2)免疫试剂盒 GDNF Receptor alpha 2 胶质细胞系源性神经营养因子受体α2抗体
大鼠基质金属蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)免疫试剂盒 gamma Synuclein 核突触蛋白-γ抗体
大鼠基质金属蛋白酶9/明胶酶B(MMP-9/Gelatinase B) 免疫试剂盒 GM-CSF 粒细胞-巨噬细胞克隆刺激因子抗体
大鼠基质金属蛋白酶8/中性粒细胞胶原酶(MMP-8/Collagenase II)免疫试剂盒 GLUR/glutathione reductase 谷胱甘肽还原酶抗体
大鼠基质金属蛋白酶7(MMP-7)免疫试剂盒 GLP-1 胰高血糖素样肽-1抗体
大鼠基质金属蛋白酶5(MMP-5)免疫试剂盒 Granulin 颗粒蛋白前体抗体
大鼠基质金属蛋白酶4(MMP-4)免疫试剂盒 Glypican 1 磷脂酰基醇蛋白聚糖1抗体
大鼠基质金属蛋白酶3(MMP-3)免疫试剂盒 GSK3 alpha 糖原合酶激酶3α抗体
大鼠基质金属蛋白酶2/明胶酶A(MMP-2/Gelatinase A)免疫试剂盒 Gentamicin(3G7) 庆大霉素单克隆抗体
大鼠基质金属蛋白酶14(MMP-14)免疫试剂盒 GSTO1 谷胱甘肽硫转移酶ω1抗体
大鼠基质金属蛋白酶13(MMP-13)免疫试剂盒 GJB3 间隙连接蛋白31抗体
大鼠基质金属蛋白酶10(MMP-10)免疫试剂盒 GNMT 甘氨酸-N-甲基转移酶
大鼠基质金属蛋白酶1(MMP-1/Collagenase I)免疫试剂盒 GRP75 G蛋白偶联受体75抗体
大鼠肌质网膜钙ATP酶(SERCA)免疫试剂盒 GATA4 GATA结合蛋白4抗体
大鼠肌酸激酶同工酶MM(CK-MM)免疫试剂盒 GABA 兔抗γ1氨基丁酸抗体
大鼠肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)免疫试剂盒 GPR85 G蛋白偶联受体GPR85蛋白抗体
大鼠肌酸激酶同工酶BB(CK-BB)免疫试剂盒 Gentamicin 庆大霉素抗体产品特点:
灵敏度高：可检测个位拷贝数的基因
特异性高：有效避免非特异性扩增的出现
稳定性高：复孔间差异小，实验结果重复性强
扩增性能优：扩增效率高，荧光信号强
检测特异性与灵敏度:
高性能的UNICONTM Taq热启动酶及组分优化的反应体系保证高度的特异性扩增，提升了扩增效率，使得UNICONTM qPCR Master Mix具有极高的检测灵敏度。以人293T细胞cDNA为模板，在相同条件下扩增低拷贝hbcl6基因，与同类产品相比，UNICONTM qPCR Master Mix具有更好的扩增特异性、更高的扩增效率及更好的复孔重复性，检测灵敏度更高。
转基因元件SSU启动子探针法qPCR试剂盒检测步骤：
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
（1） 计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM。淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。
PCR实验步骤：
①取冻存已裂解的细胞，室温放置5分钟使其完全溶解。
②两相分离 每1ml的TRIZOL试剂裂解的样品中加入0.2ml的lvfang，盖紧管盖。手动剧烈振荡管体15秒后，15到30℃孵育2到3分钟。4℃下12000rpm离心15分钟。离心后混合液体将分为下层的红色酚lvfang相，中间层以及无色水相上层。RNA全部被分配于水相中。水相上层的体积大约是匀浆时加入的TRIZOL试剂的60%。
③RNA沉淀 将水相上层转移到一干净无RNA酶的离心管中。加等体积异丙醇混合以沉淀其中的RNA，混匀后15到30℃孵育10分钟后，于4℃下12000rpm 离心10分钟。
此时离心前不可见的RNA沉淀将在管底部和侧壁上形成胶状沉淀块。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL试剂裂解的样品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀。混匀后，4℃下7000rpm离心5分钟。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室温空气中干燥5-10分钟。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA时，先加入无RNA酶的水40μl用枪反复吹打几次，使其完全溶解，
获得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法测定 先用稀释用的TE溶液将分光光度计调零。然后取少量RNA溶液用TE稀释(1:100)后，读取其在分光光度计260nm和280nm处的吸收值，测定RNA溶液 浓度和纯度。
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文献和实验Real-time qPCR 手册——手把手教你从菜鸟到高手
。现在已经涉及到生命科学研究的各个领域，比如基因的差异表达分析，SNP 检测，等位基因的检测，药物开发，临床诊断，转基因研究等。 在 Real-time qPCR 技术的发展过程中，定量 PCR 仪的发展起了至关重要的作用。1995 年，美国 PE 公司（已经并入 Invitrogen 公司）成功研制了 Taqman 技术，1996 年推出了首台荧光定量 PCR 检测系统，通过检测每个循环的荧光强度，通过 Ct 值进行数据分析。从而荧光定量 PCR 获得广泛应用。现在的定量 PCR 仪有 ABI
源序列，这些序列通常不存在于野生型植物中。其中，这两个外源的DNA序列与花椰菜花叶病毒的35S启动子和根癌农杆菌的NOS终止子整合在一起。假如这两个序列的任一个被扩增出来，则表明外源基因已经转化入植物基因组中。原则上所有已批准的转基因农作物都是用含有这两个元件或其中任一个的构建载体转化的。对于一些在转基因构建载体中新使用的启动子和终止子序列的检测，逐渐成为科学家们关注的焦点。目前，已经设计了一些针对不同大小产物的引物对。表1为合成的引物序列，选择退火位点生成单一DNA片段，以便于结果的分析。PCR反应
表达载体的构建方法及步骤 一、载体的选择及如何阅读质粒图谱 目前，载体主要有病毒和非病毒两大类,其中质粒 DNA 是一种新的非病毒转基因载体。 一个合格质粒的组成要素： （1）复制起始位点 Ori 即控制复制起始的位点。原核生物 DNA 分子中只有一个复制起始点。而 真核生物 DNA 分子有多个复制起始位点。 （2）抗生素抗性基因可以便于加以检测，如 Amp+ ,Kan+ （3）多克隆位点 MCS 克隆携带外源基因片段 （4） P/E 启动子/增强
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