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转基因元件E9’终止子探针法qPCR试剂盒

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  • FS-P99236
  • 2025年07月16日
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    • 供应商

      上海抚生

    • 规格

      50次

    转基因元件E9’终止子探针法qPCR试剂盒原理是由一对引物介导,能在动植物体外对特定基因(DNA)片断进行快速酶促扩增,经过n个热循环扩增,扩增产物中所含特定基因数是原始模板数的(1+E)n(0<E<1,扩增效率=倍,使得检测扩增产物中的特定基因成为可能。
    特异性强
      PCR反应的特异性决定因素为:
      ①引物与模板DNA特异正确的结合;
      ②碱基配对原则;
      ③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
      ④靶基因的特异性与保守性。
    产品细节图片1
    产品特点:
    灵敏度高:可检测个位拷贝数的基因
    特异性高:有效避免非特异性扩增的出现
    稳定性高:复孔间差异小,实验结果重复性强
    扩增性能优:扩增效率高,荧光信号强
    检测特异性与灵敏度:
    高性能的UNICONTM Taq热启动酶及组分优化的反应体系保证高度的特异性扩增,提升了扩增效率,使得UNICONTM qPCR Master Mix具有极高的检测灵敏度。以人293T细胞cDNA为模板,在相同条件下扩增低拷贝hbcl6基因,与同类产品相比,UNICONTM qPCR Master Mix具有更好的扩增特异性、更高的扩增效率及更好的复孔重复性,检测灵敏度更高。
    蛋白激酶1抗体
    人C型凝集素结构域家族4成员E(CLEC4E)免疫试剂盒    Exportin 1    染色体区域稳定蛋白/核输出蛋白1/染色体区域稳定必需蛋白抗体
    人C肽(C-Peptide)免疫试剂盒    Ensconsin    上皮细胞微管相关蛋白7抗体
    人C多肽(CP)免疫试剂盒    ENPP7    碱性鞘磷脂酶7抗体
    人CXC趋化因子受体7(CXCR7)免疫试剂盒    EDIL3    表皮生长因子样重复折叠1结构域蛋白3抗体
    人CXC趋化因子受体4(CXCR4)免疫试剂盒    ELOVL6    长链脂肪酸延长酶长ELOVL6抗体
    人CXC趋化因子受体3(CXCR3)免疫试剂盒    EphA6    酪氨酸蛋白激酶受体A6抗体
    人CXC趋化因子配体16(CXCL16)免疫试剂盒    EphA3    酪氨酸蛋白激酶受体A3抗体
    转基因元件E9’终止子探针法qPCR试剂盒人c-sis 免疫试剂盒    EphA7    酪氨酸蛋白激酶受体A7抗体
    人Corin 免疫试剂盒    EphB1    酪氨酸蛋白激酶受体B1抗体
    人COP9 结构光形态发生同源物亚基2(拟南芥)(COPS2)免疫试剂盒    phospho-Eph receptor B1 (Tyr928)    磷酸化酪氨酸蛋白激酶受体B1抗体
    人COLL2-1NO2 免疫试剂盒    phospho-EphB1/Eph receptor B1(Tyr968)    磷酸化酪氨酸蛋白激酶受体B1抗体
    人Coll2-1 免疫试剂盒    EFS    对接蛋白EFS抗体
    人c-jun 免疫试剂盒    Eph receptor A5    酪氨酸蛋白激酶A5受体抗体
    人chemerin 免疫试剂盒    EDG8    内皮细胞分化G蛋白偶联受体8抗体
    人c-fos 免疫试剂盒    Ephexin-1    神经细胞鸟苷酸置换因子NGEF抗体
    人CDCP1(CDCP1)免疫试剂盒    Phospho-eIF2 alpha(Ser51)    磷酸化真核启动因子2α抗体
    人CD8分子(CD8)免疫试剂盒    ELOVL2    长链脂肪酸延长酶ELOVL2抗体
    人CD82分子(CD82)免疫试剂盒    ELOVL5    长链脂肪酸延长酶长ELOVL5抗体
    人CD73分子(CD73)免疫试剂盒    Emx1    有脊椎动物脑发育相关蛋白Emx1抗体
    人CD6分子(CD6)免疫试剂盒    ENC1    外胚层神经皮层蛋白1抗体
    人CD68分子(CD68)免疫试剂盒    ENOSF1    烯醇化酶超家族成员1抗体
    人CD63分子(CD63)免疫试剂盒    ENPP1    核苷酸内焦磷酸酶/磷酸二酯酶1抗体
    人CD5分子样蛋白(CD5L)免疫试剂盒    EPCR    内皮细胞活化蛋白受体抗体
    人CD5分子(CD5)免疫试剂盒    EPR1    效应细胞蛋白酶受体1抗体
    人CD4分子(CD4)免疫试剂盒    EEA1    早期内吞体相关蛋白1抗体
    人CD45分子(CD45)免疫试剂盒    EPS15    胞吞调控蛋白Eps15抗体
    人CD44分子(CD44)免疫试剂盒    eIF4E    真核翻译起始因子4E抗体
    人CD44变体6(CD44-v6)免疫试剂盒    Exportin 5    核输出蛋白5抗体
    人CD3分子(CD3)免疫试剂盒    E.coli    肠致病性大肠杆菌抗体
    人CD34分子(CD34)免疫试剂盒    E4F1    E4F转录因子1抗体
    人CD30分子(CD30)免疫试剂盒    EAF2    睾酮调节细胞凋亡诱导和抑制基因抗体
    人CD22分子(CD22)免疫试剂盒    ELL2    聚合酶延伸因子2抗体
    人CD209分子(CD209)免疫试剂盒    ELL    聚合酶延伸因子抗体
    人CD19分子(CD19)免疫试剂盒    ELL3    神经生长因子调控抑制蛋白抗体
    人CD15分子(CD15)免疫试剂盒    EDG1    内皮细胞分化鞘脂G蛋白偶联受体1抗体
    人CD147分子(CD147)免疫试剂盒    EDRF1    红细胞分化相关因子1抗体
    人CD146分子(CD146)免疫试剂盒    EML3    微管相关蛋白样蛋白3抗体
    人CD134分子(CD134)免疫试剂盒    Endostatin    内皮抑素/内皮他丁抗体
    人CD117分子(CD117)免疫试剂盒    Estrogen receptor beta    雌激素受体β抗体
    人CD10分子(CD10)免疫试剂盒    Estrogen Recep检测步骤:
    一、 试剂的准备
    从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振荡混匀后,10000rpm离心10s。
    设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
    试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
    荧光PCR反应液 14µL N×14µL
    酶混合物 1 µL N×1 µL
    总量 15 µL N×15µL
    (1) 计算好各试剂的使用量,加入一适当体积洁净离心管中,充分混匀,10000rpm离心10s,向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液,向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬时离心10秒。
    7.2 qPCR反应条件
    将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
    推荐循环条件:
    1循环 50℃ for 2 min
    预变性 1循环 95℃ for 10 min
    PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
    60℃ for 60 sec
    在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团:设置为FAM。淬灭基团:NONE,请勿选择ROX参比荧光。
    产品细节图片2
    PCR实验步骤:
      ①取冻存已裂解的细胞,室温放置5分钟使其完全溶解。
      ②两相分离 每1ml的TRIZOL试剂裂解的样品中加入0.2ml的lvfang,盖紧管盖。手动剧烈振荡管体15秒后,15到30℃孵育2到3分钟。4℃下12000rpm离心15分钟。离心后混合液体将分为下层的红色酚lvfang相,中间层以及无色水相上层。RNA全部被分配于水相中。水相上层的体积大约是匀浆时加入的TRIZOL试剂的60%。
      ③RNA沉淀 将水相上层转移到一干净无RNA酶的离心管中。加等体积异丙醇混合以沉淀其中的RNA,混匀后15到30℃孵育10分钟后,于4℃下12000rpm 离心10分钟。
    此时离心前不可见的RNA沉淀将在管底部和侧壁上形成胶状沉淀块。
      ④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL试剂裂解的样品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混匀后,4℃下7000rpm离心5分钟。
      ⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室温空气中干燥5-10分钟。
      ⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA时,先加入无RNA酶的水40μl用枪反复吹打几次,使其完全溶解,
    获得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法测定   先用稀释用的TE溶液将分光光度计调零。然后取少量RNA溶液用TE稀释(1:100)后,读取其在分光光度计260nm和280nm处的吸收值,测定RNA溶液 浓度和纯度。

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