转基因构建FMV启动子-PVY基因染料法qPCR试剂盒

转基因构建FMV启动子-PVY基因染料法qPCR试剂盒产品规格：50T
产品运输：低温运输
产品保存：-20℃保存
产品有效期：一年

特点：
1. 即开即用，用户只需要提供病毒样品。
2. 根据鲍疱疹样病毒保守序列设计的专一性引物，与相关病毒无交叉反应。
3. 灵敏度可以达到几百拷贝/反应。
4. 一管式荧光定量 PCR 检测，避免后续污染。
5. 本试剂盒足够 50 次 20μL 反应体系的荧光定量 PCR。
6. 本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。
储存条件：-20℃以下，有效期12个月。
beta Catenin (Tyr86)    磷酸化β-连环蛋白/β-连环素/β链接素抗体
人中心体纺锤体极相关蛋白1(CSPP1)免疫试剂盒    beta Crystallin A3    βA3/A1-crystallin蛋白抗体
人中心体蛋白350kDa(CEP350)免疫试剂盒    Beta crystallin S    γS-crystallin蛋白抗体
人中华肝吸虫(CS)抗体(IgG)免疫试剂盒    C1orf85    1号染色体开放阅读框85抗体
人制瘤素M受体(OSMR)免疫试剂盒    C1orf87    1号染色体开放阅读框87抗体
人酯酰甘油激酶ζ(DGKZ)免疫试剂盒    C1ORF95    1号染色体开放阅读框95抗体
人脂氧素A4(LXA4)免疫试剂盒    C1s     补体C1S链多肽抗体
人脂联素受体2(ADIPOR2)免疫试剂盒    C20orf106    20号染色体开放阅读框106抗体
人脂联素受体1(ADIPOR1)免疫试剂盒    C20orf107    20号染色体开放阅读框107抗体
人脂联素(ADP)免疫试剂盒    C20orf117    20号染色体开放阅读框117抗体
人脂肪酸转运蛋白5(FATP5)免疫试剂盒    C20orf118    20号染色体开放阅读框118抗体
人脂肪酸结合蛋白4(FABP-4)免疫试剂盒    C20ORF144    20号染色体开放阅读框144抗体
人脂肪甘油三酯脂酶(ATGL)免疫试剂盒    C20orf151    20号染色体开放阅读框151抗体
人脂肪分化相关蛋白(ADRP)免疫试剂盒    c20orf78    20号染色体开放阅读框78抗体
人脂多糖结合蛋白(LBP)免疫试剂盒    C20orf187    20号染色体开放阅读框187抗体
人脂多糖/内毒素(LPS)免疫试剂盒    C21orf59    21号染色体开放阅读框59抗体
人脂蛋白磷脂酶A2(Lp-PLA2)免疫试剂盒    C20orf152     20号染色体开放阅读框152抗体
人脂阿拉伯甘露聚糖(LAM)免疫试剂盒    C20orf165    20号染色体开放阅读框165抗体
人整合素连接激酶1(ILK-1)免疫试剂盒    C20orf166    20号染色体开放阅读框166抗体
人整合素β4结合蛋白(ITGB4BP)免疫试剂盒    C20orf173    20号染色体开放阅读框173抗体
人整合素αM型(ITG αM/CD11b) 免疫试剂盒    C20orf24    20号染色体开放阅读框24抗体
人整合素αⅤβ3(ITG αⅤβ3)免疫试剂盒    C20orf30     20号染色体开放阅读框30抗体
转基因构建FMV启动子-PVY基因染料法qPCR试剂盒人整合素α4(ITGA4/CD49D)免疫试剂盒    C20orf4    20号染色体开放阅读框4抗体
人整合素α2(ITGA2)免疫试剂盒    C20orf7    20号染色体开放阅读框7抗体
人整合素A5(ITGA5)免疫试剂盒    C20orf79     20号染色体开放阅读框79抗体
人真胰岛素(TI)免疫试剂盒    C20orf94    20号染色体开放阅读框94抗体
人真核细胞延伸因子2(eEF2)免疫试剂盒    C21orf37    21号染色体开放阅读框37抗体
人真核起始因子4A - II(EIF4A2/DDX2B/EIF4F)免疫试剂盒    C22orf15     22号染色体开放阅读框15抗体
人张力蛋白4(TNS4)免疫试剂盒    C22orf13    22号染色体开放阅读框13抗体
人粘蛋白3(MUC3)免疫试剂盒    C22orf26    22号染色体开放阅读框26抗体
人粘蛋白2(MUC2)免疫试剂盒    C2b    补体C2b链多肽抗体
人增殖诱导配体(APRIL)免疫试剂盒    C2orf16    2号染色体开放阅读框16抗体
人早期生长反应因子1(EGR1)免疫试剂盒    C2orf27     2号染色体开放阅读框27抗体
人早期前列腺癌抗原2(EPCA2)免疫试剂盒    phospho-delta 1 Catenin (Ser268)    磷酸化δ连环蛋白抗体
人早期活化抗原CD69(CD69)免疫试剂盒    phospho-delta 1 Catenin (Thr310)    磷酸化δ连环蛋白抗体
人早老素2(PS-2)免疫试剂盒    phospho-delta 1 Catenin (Thr916)    磷酸化δ连环蛋白抗体
人早老素1(PS-1)免疫试剂盒    phospho-delta 1 Catenin (Tyr228)    磷酸化δ连环蛋白抗体
人再生胰岛衍生1α/胰石蛋白/胰线蛋白(REG1A)免疫试剂盒    phospho-delta 1 Catenin (Tyr291)    磷酸化δ连环蛋白抗体
    使用方法：
一、样品采集：
1、食品样品：样品的采集与预培养按照样品的采集与预培养按照菌检验要求进行。
2、血液样品：用无菌注射器抽取受检者静脉血2mL，注入无菌EDTA2Na(或柠檬酸钠)抗凝管，立即混匀。
3、粪便样品：取粪便置于灭菌的收集管中送检。
4、病灶部位样品：取发病部位新鲜渗出物、粘液脓血送检。
一、稀释 PCR 阳性对照（以 10E2-10E7 拷贝/μL 这 6 个 10 倍稀释度为例）
1. 注意：由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体样品做阳性对照，只提供可以直接使用的 DNA 片段作为阳性对照。
2. 标记 6 个离心管，分别为 7，6，5，4，3，2。
3. 用带芯枪头分别加入 45 μL 荧光 PCR 专用模板稀释液（最好用带芯枪头，下同）。
4. 在 7 号管中加入 5 μL 1×10E8 拷贝/μL 的阳性对照，充分震荡 1 分钟，得1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
5. 换枪头，在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用
6. 换枪头，在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照到 5 号管中，充分震荡 1 分钟，得 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
7. 重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的阳性对照。放冰上待用。

实验过程：
一、试剂准备
1. DNA模板
2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步骤
1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。
3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
三、注意事项
１．PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行。zui好设立一个专用的PCR实验室。
２．纯化模板所选用的方法对污染的风险有极大影响。一般而言，只要能够得到可靠的结果，纯化的方法越简单越好。
３．所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。
４．PCR试剂配制应使用zui高质量的新鲜双蒸水，采用0.22μm滤膜过滤除菌或高压灭菌。
５．试剂都应该以大体积配制，试验一下是否满意，然后分装成仅够一次使用的量储存，从而确保实验与实验之间的连续性。
６．试剂或样品准备过程中都要使用一次性灭菌的塑料瓶和管子，玻璃器皿应洗涤干净并高压灭菌。
７．PCR的样品应在冰浴上化开，并且要充分混匀。