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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
低温冷藏
- 保质期:
详见说明书
- 英文名:
详见说明书
- 库存:
100
- 供应商:
上海抚生
- 规格:
50次
本试剂盒采用实时荧光PCR技术,针对鸭源性成分核酸序列设计特异性引物和荧光探针,通过实时荧光一步法RT-PCR(Taqman探针法)对鸭源性成分核酸进行定性检测。
优越的扩增性能:
高性能的UNICONTM Taq DNA聚合酶及优化的反应体系保证更高的扩增效率。以相同量的293T细胞cDNA为模板,扩增β-actin基因,与同类产品相比,UNICONTM qPCR Master Mix扩增信号更强,扩增效率更高。
样本采集、存放及运输:
1、样本采集:各类型样本按照常规方法采集;
2、存放:样本在2~8℃条件下保存应不超过72h,-70℃以下可长期保存,但应避免反复冻融(zui多冻融3次);
3、运输:采用泡沫箱加冰密封进行运输。
注意事项:
1. 建议使用新鲜采取的动物组织,若为长期冷冻组织,应尽量避免反复冻融,否则会导致模板的降解,影响PCR效率。
2. 试剂Buffer AL若低温保存,易产生沉淀。在使用前务必将其在室温中放置一段时间,也可在37℃水浴中预热10 min,以溶解沉淀,混匀后再使用。
3. 电泳检测时,切勿使用含有SDS的Loading Buffer。否则,电泳时会在泳道中出现一大团拖尾亮带,影响实验结果。
4. 建议扩增片段长度1 kb以内,以便扩增效率佳。 5. 为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
人内脂素/内脏脂肪素(visfatin)免疫试剂盒 CHRDL1 脊索生成素样蛋白1抗体
人内脏脂肪特异性丝氨酸蛋白酶抑制剂(vaspin)免疫试剂盒 CHURC1 神经诱导胚胎发育相关蛋白Churchill抗体
人内源性糖皮质激素(GC)免疫试剂盒 CRMP3 二氢嘧啶酶相关蛋白3抗体
人内源性分泌型糖基化终产物受体(esRAGE)免疫试剂盒 CRSP9 转录激活蛋白CRSP9抗体
人内皮脂肪酶(EL)免疫试剂盒 Copine-6 神经网蛋白CopineVI抗体
人内皮抑素(ES)免疫试剂盒 Cpt1c 脑型肉碱棕榈酰转移酶1C抗体
人内皮型合成酶(eNOS)免疫试剂盒 Factor B 补体因子B抗体
人内皮细胞特异分子-1(ESM-1)免疫试剂盒 CHRNA1 乙酰胆碱受体前体蛋白AChRα1抗体
人内皮素2(EDN2)免疫试剂盒 CSFV Envelope glycoprotein E2 猪瘟病毒包膜糖蛋白E2抗体
人内皮素1受体(EDNRA)免疫试剂盒 CSDC2 冷休克结构域蛋白C2抗体
人内皮素1(ET-1)免疫试剂盒 CA10 酶10抗体
人内肽2(EM-2)免疫试剂盒 CD62L L选择素抗体
转基因构建35S启动子-GUS基因LAMP试剂盒人母亲DPP同源物4(Smad 4)免疫试剂盒 C-Myc 致癌基因C-Myc抗体
人末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)免疫试剂盒 CCK8 胆囊收缩素8抗体
人末端补体复合物C5b-9(TCC C5b-9)免疫试剂盒 E cadherin 上皮钙粘附分子抗体
人膜内氨酰氨基肽酶(ANPEP)免疫试剂盒 CITED1 结合转化激活因子CITED1抗体
人膜联蛋白A2(ANXA2/ANX2/ANX2L4/CAL1H/LPC2D)抗体免疫试剂盒 Collagen II Ⅱ型胶原α1蛋白/软骨钙素抗体
人膜联蛋白Ⅶ(ANX-Ⅶ)免疫试剂盒 CSMD2 CSMD2蛋白抗体
人膜联蛋白Ⅵ(ANX-Ⅵ)免疫试剂盒 CSMD3 CSMD3蛋白抗体
人膜联蛋白Ⅴ(ANX-Ⅴ)抗体(IgM)免疫试剂盒 CSTP1 钙调神经磷酸酶CSTP1抗体
人膜联蛋白Ⅴ(ANX-Ⅴ)抗体(IgG)免疫试剂盒 CTAGE6 CTAGE6蛋白抗体
人膜联蛋白Ⅴ(ANX-Ⅴ)免疫试剂盒 CTAGE4 皮肤T细胞淋巴瘤相关抗原4抗体
人膜联蛋白Ⅳ(ANX-Ⅳ)免疫试剂盒 CLDND2 膜蛋白CLDND2抗体
人膜联蛋白Ⅲ(ANX-Ⅲ)免疫试剂盒 CHORDC1 含半胱氨酸和组氨酸丰富域蛋白1抗体
人膜联蛋白Ⅱ(ANX-Ⅱ)免疫试剂盒 capsid protein 猪圆环病毒Ⅱ型衣壳蛋白操作程序:
由您提供该实验中目的基因的相关资料(如:基因名称、序列等信息),我们共同探讨服务的可能性和技术路线;
商定服务收费、付款方式、服务期限等,并签定技术服务合同。
有您提供实验所需的足够量的实验样本(100mg组织或107个细胞),本公司不接受您提供的RNA样本 PCR所需引物/探针(如果用探针法),可以由您自己提供,也可以委托本公司设计合成(费用另计)。如果由您自己提供,必须是PAGE纯化的高质量的干粉,本公司不接受已溶解的引物/探针。
我们进行RNA抽提、RNA定量、反转录、Real-time PCR扩增、数据分析。
提供实验报告,包括实验过程、所用仪器试剂、扩增曲线、标准曲线和相关分析数据等。
PCR检测方法包括以下步骤:
(1)将参照基因与待测目的基因片段等比例连接,克隆到同一个质粒载体上,构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品,并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线;
(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后,目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数,计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值,即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。
其中步骤(1)为:将参照基因与待测目的基因片段等比例连接,克隆到同一个质粒载体上,构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品,并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。
其中所述参照基因为本领域常规参照基因,较佳地管家基因,优选地为RPPH1的扩增区域,其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体,较佳地为PCR克隆载体,优选地为TA cloning载体,所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1:1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1,解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题,提高HER2基因扩增检测的可靠性。 步骤(2)为:待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后,目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数,计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值,即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。
其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因,较佳地为肿瘤或者疾病的特异性基因,更佳地为HER2基因的扩增区域,所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法,所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增,更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。
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文献和实验xfnidage 我要做拟南芥的转基因,构建了一个双35S启动子的T质粒用来转化,就是两个35S启动子串联。不知道这样做会不会产生负面影响,望各位指教! freecell 什么叫“负面影响”? Fasta921 xfnidage wrote: 我要做拟南芥的转基因,构建了一个双35S启动子的T质粒用来转化,就是两个35S启动子串联。不知道这样做会不会产生
源序列,这些序列通常不存在于野生型植物中。其中,这两个外源的DNA序列与花椰菜花叶病毒的35S启动子和根癌农杆菌的NOS终止子整合在一起。假如这两个序列的任一个被扩增出来,则表明外源基因已经转化入植物基因组中。原则上所有已批准的转基因农作物都是用含有这两个元件或其中任一个的构建载体转化的。对于一些在转基因构建载体中新使用的启动子和终止子序列的检测,逐渐成为科学家们关注的焦点。目前,已经设计了一些针对不同大小产物的引物对。表1为合成的引物序列,选择退火位点生成单一DNA片段,以便于结果的分析。PCR反应
和 Rubi3 [ 67, 68 ],以及从甘蔗中分离出的 ubi4 和 ubi9 [ 69 ] 启动子,所有这些启动子的表达活性与玉米 Ubil 或 CaMV35S 相当甚至更高。玉米 Ubil 驱动 GtAS 基因在转基因拟南芥、番茄、烟草和松树的根中也获得了很好的表达[70]。 Actin 基因的启动子是可以替代泛素的另一个理想启动子。水稻 Actin 启动子 ( Actl- D) 由 Act1 基因翻译起始密码子上游 2.1 kb 的一段序列组成。该序列包含了 GUS 高水平表达
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