转基因构建35S启动子-GUS基因PCR试剂盒

转基因构建35S启动子-GUS基因PCR试剂盒原理是由一对引物介导，能在动植物体外对特定基因(DNA)片断进行快速酶促扩增，经过n个热循环扩增，扩增产物中所含特定基因数是原始模板数的(1+E)n(0＜E＜1,扩增效率＝倍，使得检测扩增产物中的特定基因成为可能。
特异性强
　　PCR反应的特异性决定因素为：
　　①引物与模板DNA特异正确的结合；
　　②碱基配对原则；
　　③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性；
  ④靶基因的特异性与保守性。

IgY    兔抗鸡IgY抗体
人尿皮素免疫试剂盒    C20orf128    20号染色体开放阅读框128抗体
人尿嘧啶核苷磷酸化酶1(UPP1)免疫试剂盒    CYP2E1    细胞色素P450ⅡE1抗体
人尿激酶型纤溶酶原激活物受体(PLAUR/uPAR)免疫试剂盒    CXCL13/BCA1    B-淋巴细胞趋化因子抗体
人尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)免疫试剂盒    Cdc23    细胞分裂周期蛋白23抗体
人尿激酶(UK)免疫试剂盒    CKAP5    结肠和肝高表达蛋白抗体
人尿苷二磷酸葡萄糖神经酰胺葡萄糖基转移酶(UGCG)免疫试剂盒    CKS1    细胞周期蛋白依赖性激酶调节亚基1抗体
人尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶2(UGT2)免疫试剂盒    ICAM1    细胞间粘附分子-1抗体
人尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶1(UGT1)免疫试剂盒    ICAM1    细胞间粘附分子1抗体
人鸟苷酸结合蛋白4(Gbp4)免疫试剂盒    ICAM1    细胞间粘附分子-1抗体
人鸟苷酸交换因子(GEF)免疫试剂盒    ICAM1    细胞间粘附分子-1抗体
人鸟氨酸脱羧酶(ODC)免疫试剂盒    ICAM1    细胞间粘附分子-1抗体
人黏着斑激酶(FAK)免疫试剂盒    Cyclophilin F    亲环蛋白（亲环素）PPIF抗体
人黏膜地址素细胞黏附分子(MAdCAM-1)免疫试剂盒    Catalase    过氧化氢酶抗体
人黏多糖/糖胺聚糖免疫试剂盒    CLIC4    细胞内氯离子通道蛋白4抗体
人脑钠素/脑钠尿肽(BNP)免疫试剂盒    CGR19    细胞生长调控蛋白19/环指蛋白197抗体
人脑啡肽(ENK)免疫试剂盒    CCDC139    卷曲螺旋结构域蛋白139抗体
人脑肠肽(BGP/Gehrelin)免疫试剂盒    CHMP1A    染色体修饰蛋白1抗体（金属蛋白酶1）
人囊虫病抗体(CYT Ab)免疫试剂盒    CAPS1    钙依赖分泌激活蛋白1抗体
人难辨梭状芽孢杆菌毒素B(TOXB)免疫试剂盒    CBLN1    小脑肽1抗体
人难辨梭状芽孢杆菌毒素A(TOXA)免疫试剂盒    CBLN2    小脑肽2抗体
转基因构建35S启动子-GUS基因PCR试剂盒人钠-氯化物依赖性牛磺酸转运体(SLC6A6/TAUT)免疫试剂盒    CBLN4    小脑肽4抗体
人钠离子通道蛋白抗体免疫试剂盒    CCM2    脑海绵状血管畸形蛋白2抗体
人内质网蛋白29(ERP29/C12orf8/ERP28)免疫试剂盒    CELSR2    表皮生长因子样蛋白2抗体
产品特点:
灵敏度高：可检测个位拷贝数的基因
特异性高：有效避免非特异性扩增的出现
稳定性高：复孔间差异小，实验结果重复性强
扩增性能优：扩增效率高，荧光信号强
检测特异性与灵敏度:
高性能的UNICONTM Taq热启动酶及组分优化的反应体系保证高度的特异性扩增，提升了扩增效率，使得UNICONTM qPCR Master Mix具有极高的检测灵敏度。以人293T细胞cDNA为模板，在相同条件下扩增低拷贝hbcl6基因，与同类产品相比，UNICONTM qPCR Master Mix具有更好的扩增特异性、更高的扩增效率及更好的复孔重复性，检测灵敏度更高。
检测步骤：
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
（1） 计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM。淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。

PCR实验步骤：
　　①取冻存已裂解的细胞，室温放置5分钟使其完全溶解。
　　②两相分离 每1ml的TRIZOL试剂裂解的样品中加入0.2ml的lvfang，盖紧管盖。手动剧烈振荡管体15秒后，15到30℃孵育2到3分钟。4℃下12000rpm离心15分钟。离心后混合液体将分为下层的红色酚lvfang相，中间层以及无色水相上层。RNA全部被分配于水相中。水相上层的体积大约是匀浆时加入的TRIZOL试剂的60%。
　　③RNA沉淀 将水相上层转移到一干净无RNA酶的离心管中。加等体积异丙醇混合以沉淀其中的RNA，混匀后15到30℃孵育10分钟后，于4℃下12000rpm 离心10分钟。
此时离心前不可见的RNA沉淀将在管底部和侧壁上形成胶状沉淀块。
　　④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL试剂裂解的样品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀。混匀后，4℃下7000rpm离心5分钟。
　　⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室温空气中干燥5-10分钟。
　　⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA时，先加入无RNA酶的水40μl用枪反复吹打几次，使其完全溶解，
获得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法测定 　　先用稀释用的TE溶液将分光光度计调零。然后取少量RNA溶液用TE稀释(1:100)后，读取其在分光光度计260nm和280nm处的吸收值，测定RNA溶液 浓度和纯度。