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上海抚生
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50次
转基因元件CMoVb启动子LAMP试剂盒原理是由一对引物介导,能在动植物体外对特定基因(DNA)片断进行快速酶促扩增,经过n个热循环扩增,扩增产物中所含特定基因数是原始模板数的(1+E)n(0<E<1,扩增效率=倍,使得检测扩增产物中的特定基因成为可能。
特异性强
PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
④靶基因的特异性与保守性。
犬胰岛素样生长因子1(IGF1)免疫试剂盒 phospho-EGFR (Tyr1068) 磷酸化表皮生长因子受体抗体
犬胰岛素受体β(ISR-β)免疫试剂盒 phospho-Erk1 (Thr202 + Tyr204) 磷酸化丝裂原活化蛋白激酶1抗体
犬胰岛素(INS)免疫试剂盒 phospho-ERK1 (Thr202/Tyr204) + ERK2 (Thr183/Tyr185) 磷酸化丝裂原活化蛋白激酶1/2抗体
犬胰蛋白酶原激活肽(TAP)免疫试剂盒 EPHB4 酪氨酸蛋白激酶受体B4抗体
犬胰蛋白酶原-1 免疫试剂盒 Ephrin A5 酪氨酸蛋白激酶A5受体抗体
犬胰蛋白酶(trypsin)免疫试剂盒 epithelial Sodium Channel gamma 上皮钠离子通道蛋白γ/γENaC抗体
犬(NO)免疫试剂盒 ETS2 癌基因ETS2抗体
犬叶酸(FA)免疫试剂盒 Endothelin 3 内皮素3抗体
犬血纤蛋白原降解产物(FDP)免疫试剂盒 phospho-ERK5 (Ser496) 磷酸化细胞外信号调节激酶5抗体
犬血纤蛋白原(Fbg)免疫试剂盒 phospho-ERK5 ( Ser731+Thr733) 磷酸化细胞外信号调节激酶5抗体
犬血栓素B2(TXB2)免疫试剂盒 ERK4 细胞外信号调节激酶4抗体
犬血栓前体蛋白(TpP)免疫试剂盒 E.coli O157:H7 肠出血性大肠杆菌埃希氏菌O157:H7抗体
犬血栓调节蛋白(TM)免疫试剂盒 phospho-ERK1 (Thr202+Tyr204) + ERK2 (Thr185+Tyr187) 磷酸化丝裂原活化蛋白激酶ERK抗体
犬血清淀粉样蛋白A2(SAA2)免疫试剂盒 EMR2 CD312抗体
犬血清淀粉样蛋白A(SAA)免疫试剂盒 eIF4EBP1 eIF4E结合蛋白抗体
犬血管性血友病因子/瑞斯托霉素辅因子(VWF)免疫试剂盒 Phospho-EGFR (Ser1045) 磷酸化表皮生长因子受体抗体
犬血管紧张素转化酶2(ACE2)免疫试剂盒 Phospho-EGFR (Tyr1138) 磷酸化表皮生长因子受体抗体
犬血管紧张素转化酶(ACE)免疫试剂盒 Ephrin A1 Receptor 肝配蛋白A1受体抗体
犬血管紧张素Ⅱ(ANG-Ⅱ)免疫试剂盒 eIF2C2 真核翻译起始因子2C2抗体
犬血管紧张素1-7(Ang1-7)免疫试剂盒 EYA2 眼睛发育缺失蛋白EYA2抗体
犬胸腺肽α1(Thymosin α1)免疫试剂盒 EYA4 EYA4蛋白抗体
犬胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)免疫试剂盒 ELK4 血清反应因子辅助蛋白1抗体
犬胸腺活化调节趋化因子(TARC/CCL17)免疫试剂盒 ELMO2 吞噬细胞运动蛋白2抗体
犬心型脂肪酸结合蛋白(h-FABP)免疫试剂盒 EPB41 红细胞膜条带4.1蛋白抗体
犬心肌特异性肌钙蛋白T(cTnT)免疫试剂盒 phospho-EPO Receptor (Tyr485) 磷酸化红细胞生成素受体抗体
犬心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)免疫试剂盒 E2F7 转录调节因子E2F7抗体
犬纤溶酶原激活物抑制剂1(SERPINE1)免疫试剂盒 EAAT4 胶质细胞谷氨酸运载蛋白4抗体
犬细小病毒(PV)抗体(IgG)免疫试剂盒 EBP1 erbB3结合蛋白1抗体
犬细胞间粘附分子1(ICAM-1/CD54)免疫试剂盒 ECH1 烯酰辅酶A水合酶1抗体
犬维生素K1(VK1)免疫试剂盒 ECHDC2 烯酰辅酶A水合酶含结构域蛋白2抗体
转基因元件CMoVb启动子LAMP试剂盒犬维生素E(VE)免疫试剂盒 EDAR 坏死因子受体超家族成员EDAR抗体
犬维生素A(VA)免疫试剂盒 EDC4 自身抗原EDC4抗体
犬透明质酸酶4(HAase 4)免疫试剂盒 UBR5 E3泛素蛋白连接酶EDD抗体
犬透明质酸酶3(HAase 3)免疫试剂盒 EED 胚胎外胚层发育蛋白EED抗体
犬透明质酸酶2(HAase 2)免疫试剂盒 KAT3B/Ep300 转录接头蛋白EP300抗体
犬透明质酸酶1(HAase 1)免疫试剂盒 Endothelial lipase 内皮脂肪酶抗体
犬透明质酸(HA)免疫试剂盒 ENO1 MYC启动子结合蛋白1抗体
犬特殊基团成分(维生素D结合蛋白)(GC)免疫试剂盒 ERp29 内质网蛋白29抗体
犬髓过氧化物酶(MPO)免疫试剂盒 ECHS1 烯脂酰辅酶A水解酶抗体
犬松弛肽/松弛素(RLN)免疫试剂盒 phospho-eIF4EBP1 (Ser64) 磷酸化4E结合蛋白1抗体
犬水通道蛋白5(AQP5)免疫试剂盒 EHHADH 三羟酰辅产品特点:
灵敏度高:可检测个位拷贝数的基因
特异性高:有效避免非特异性扩增的出现
稳定性高:复孔间差异小,实验结果重复性强
扩增性能优:扩增效率高,荧光信号强
检测特异性与灵敏度:
高性能的UNICONTM Taq热启动酶及组分优化的反应体系保证高度的特异性扩增,提升了扩增效率,使得UNICONTM qPCR Master Mix具有极高的检测灵敏度。以人293T细胞cDNA为模板,在相同条件下扩增低拷贝hbcl6基因,与同类产品相比,UNICONTM qPCR Master Mix具有更好的扩增特异性、更高的扩增效率及更好的复孔重复性,检测灵敏度更高。
检测步骤:
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振荡混匀后,10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
(1) 计算好各试剂的使用量,加入一适当体积洁净离心管中,充分混匀,10000rpm离心10s,向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液,向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团:设置为FAM。淬灭基团:NONE,请勿选择ROX参比荧光。
PCR实验步骤:
①取冻存已裂解的细胞,室温放置5分钟使其完全溶解。
②两相分离 每1ml的TRIZOL试剂裂解的样品中加入0.2ml的lvfang,盖紧管盖。手动剧烈振荡管体15秒后,15到30℃孵育2到3分钟。4℃下12000rpm离心15分钟。离心后混合液体将分为下层的红色酚lvfang相,中间层以及无色水相上层。RNA全部被分配于水相中。水相上层的体积大约是匀浆时加入的TRIZOL试剂的60%。
③RNA沉淀 将水相上层转移到一干净无RNA酶的离心管中。加等体积异丙醇混合以沉淀其中的RNA,混匀后15到30℃孵育10分钟后,于4℃下12000rpm 离心10分钟。
此时离心前不可见的RNA沉淀将在管底部和侧壁上形成胶状沉淀块。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL试剂裂解的样品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混匀后,4℃下7000rpm离心5分钟。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室温空气中干燥5-10分钟。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA时,先加入无RNA酶的水40μl用枪反复吹打几次,使其完全溶解,
获得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法测定 先用稀释用的TE溶液将分光光度计调零。然后取少量RNA溶液用TE稀释(1:100)后,读取其在分光光度计260nm和280nm处的吸收值,测定RNA溶液 浓度和纯度。
特异性强
PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
④靶基因的特异性与保守性。
犬胰岛素样生长因子1(IGF1)免疫试剂盒 phospho-EGFR (Tyr1068) 磷酸化表皮生长因子受体抗体
犬胰岛素受体β(ISR-β)免疫试剂盒 phospho-Erk1 (Thr202 + Tyr204) 磷酸化丝裂原活化蛋白激酶1抗体
犬胰岛素(INS)免疫试剂盒 phospho-ERK1 (Thr202/Tyr204) + ERK2 (Thr183/Tyr185) 磷酸化丝裂原活化蛋白激酶1/2抗体
犬胰蛋白酶原激活肽(TAP)免疫试剂盒 EPHB4 酪氨酸蛋白激酶受体B4抗体
犬胰蛋白酶原-1 免疫试剂盒 Ephrin A5 酪氨酸蛋白激酶A5受体抗体
犬胰蛋白酶(trypsin)免疫试剂盒 epithelial Sodium Channel gamma 上皮钠离子通道蛋白γ/γENaC抗体
犬(NO)免疫试剂盒 ETS2 癌基因ETS2抗体
犬叶酸(FA)免疫试剂盒 Endothelin 3 内皮素3抗体
犬血纤蛋白原降解产物(FDP)免疫试剂盒 phospho-ERK5 (Ser496) 磷酸化细胞外信号调节激酶5抗体
犬血纤蛋白原(Fbg)免疫试剂盒 phospho-ERK5 ( Ser731+Thr733) 磷酸化细胞外信号调节激酶5抗体
犬血栓素B2(TXB2)免疫试剂盒 ERK4 细胞外信号调节激酶4抗体
犬血栓前体蛋白(TpP)免疫试剂盒 E.coli O157:H7 肠出血性大肠杆菌埃希氏菌O157:H7抗体
犬血栓调节蛋白(TM)免疫试剂盒 phospho-ERK1 (Thr202+Tyr204) + ERK2 (Thr185+Tyr187) 磷酸化丝裂原活化蛋白激酶ERK抗体
犬血清淀粉样蛋白A2(SAA2)免疫试剂盒 EMR2 CD312抗体
犬血清淀粉样蛋白A(SAA)免疫试剂盒 eIF4EBP1 eIF4E结合蛋白抗体
犬血管性血友病因子/瑞斯托霉素辅因子(VWF)免疫试剂盒 Phospho-EGFR (Ser1045) 磷酸化表皮生长因子受体抗体
犬血管紧张素转化酶2(ACE2)免疫试剂盒 Phospho-EGFR (Tyr1138) 磷酸化表皮生长因子受体抗体
犬血管紧张素转化酶(ACE)免疫试剂盒 Ephrin A1 Receptor 肝配蛋白A1受体抗体
犬血管紧张素Ⅱ(ANG-Ⅱ)免疫试剂盒 eIF2C2 真核翻译起始因子2C2抗体
犬血管紧张素1-7(Ang1-7)免疫试剂盒 EYA2 眼睛发育缺失蛋白EYA2抗体
犬胸腺肽α1(Thymosin α1)免疫试剂盒 EYA4 EYA4蛋白抗体
犬胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)免疫试剂盒 ELK4 血清反应因子辅助蛋白1抗体
犬胸腺活化调节趋化因子(TARC/CCL17)免疫试剂盒 ELMO2 吞噬细胞运动蛋白2抗体
犬心型脂肪酸结合蛋白(h-FABP)免疫试剂盒 EPB41 红细胞膜条带4.1蛋白抗体
犬心肌特异性肌钙蛋白T(cTnT)免疫试剂盒 phospho-EPO Receptor (Tyr485) 磷酸化红细胞生成素受体抗体
犬心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)免疫试剂盒 E2F7 转录调节因子E2F7抗体
犬纤溶酶原激活物抑制剂1(SERPINE1)免疫试剂盒 EAAT4 胶质细胞谷氨酸运载蛋白4抗体
犬细小病毒(PV)抗体(IgG)免疫试剂盒 EBP1 erbB3结合蛋白1抗体
犬细胞间粘附分子1(ICAM-1/CD54)免疫试剂盒 ECH1 烯酰辅酶A水合酶1抗体
犬维生素K1(VK1)免疫试剂盒 ECHDC2 烯酰辅酶A水合酶含结构域蛋白2抗体
转基因元件CMoVb启动子LAMP试剂盒犬维生素E(VE)免疫试剂盒 EDAR 坏死因子受体超家族成员EDAR抗体
犬维生素A(VA)免疫试剂盒 EDC4 自身抗原EDC4抗体
犬透明质酸酶4(HAase 4)免疫试剂盒 UBR5 E3泛素蛋白连接酶EDD抗体
犬透明质酸酶3(HAase 3)免疫试剂盒 EED 胚胎外胚层发育蛋白EED抗体
犬透明质酸酶2(HAase 2)免疫试剂盒 KAT3B/Ep300 转录接头蛋白EP300抗体
犬透明质酸酶1(HAase 1)免疫试剂盒 Endothelial lipase 内皮脂肪酶抗体
犬透明质酸(HA)免疫试剂盒 ENO1 MYC启动子结合蛋白1抗体
犬特殊基团成分(维生素D结合蛋白)(GC)免疫试剂盒 ERp29 内质网蛋白29抗体
犬髓过氧化物酶(MPO)免疫试剂盒 ECHS1 烯脂酰辅酶A水解酶抗体
犬松弛肽/松弛素(RLN)免疫试剂盒 phospho-eIF4EBP1 (Ser64) 磷酸化4E结合蛋白1抗体
犬水通道蛋白5(AQP5)免疫试剂盒 EHHADH 三羟酰辅产品特点:
灵敏度高:可检测个位拷贝数的基因
特异性高:有效避免非特异性扩增的出现
稳定性高:复孔间差异小,实验结果重复性强
扩增性能优:扩增效率高,荧光信号强
检测特异性与灵敏度:
高性能的UNICONTM Taq热启动酶及组分优化的反应体系保证高度的特异性扩增,提升了扩增效率,使得UNICONTM qPCR Master Mix具有极高的检测灵敏度。以人293T细胞cDNA为模板,在相同条件下扩增低拷贝hbcl6基因,与同类产品相比,UNICONTM qPCR Master Mix具有更好的扩增特异性、更高的扩增效率及更好的复孔重复性,检测灵敏度更高。
检测步骤:
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振荡混匀后,10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
(1) 计算好各试剂的使用量,加入一适当体积洁净离心管中,充分混匀,10000rpm离心10s,向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液,向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团:设置为FAM。淬灭基团:NONE,请勿选择ROX参比荧光。
PCR实验步骤:
①取冻存已裂解的细胞,室温放置5分钟使其完全溶解。
②两相分离 每1ml的TRIZOL试剂裂解的样品中加入0.2ml的lvfang,盖紧管盖。手动剧烈振荡管体15秒后,15到30℃孵育2到3分钟。4℃下12000rpm离心15分钟。离心后混合液体将分为下层的红色酚lvfang相,中间层以及无色水相上层。RNA全部被分配于水相中。水相上层的体积大约是匀浆时加入的TRIZOL试剂的60%。
③RNA沉淀 将水相上层转移到一干净无RNA酶的离心管中。加等体积异丙醇混合以沉淀其中的RNA,混匀后15到30℃孵育10分钟后,于4℃下12000rpm 离心10分钟。
此时离心前不可见的RNA沉淀将在管底部和侧壁上形成胶状沉淀块。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL试剂裂解的样品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混匀后,4℃下7000rpm离心5分钟。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室温空气中干燥5-10分钟。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA时,先加入无RNA酶的水40μl用枪反复吹打几次,使其完全溶解,
获得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法测定 先用稀释用的TE溶液将分光光度计调零。然后取少量RNA溶液用TE稀释(1:100)后,读取其在分光光度计260nm和280nm处的吸收值,测定RNA溶液 浓度和纯度。
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