- ￥1280 - 4480
- 炎熙生物
- 上海
- Mqt-tur-20
- 2026年11月01日
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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
负20度
- 保质期：
一年
- 英文名：
Probe-quantitative Real-time PCR Kit for Candidatus Mycoplasma turicensis
- 库存：
10000
- 供应商：
上海炎熙生物科技有限公司
- 规格：
20个反应/50个反应/100个反应
| 规格： | 20个反应 | 产品价格： | ￥1280.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 50个反应 | 产品价格： | ￥2480.0 |
| 规格： | 100个反应 | 产品价格： | ￥4480.0 |
Probe-quantitative Real-time PCR Kit for Candidatus Mycoplasma turicensis
货号：Mqt-tur-20 规格：20个反应
货号：Mqt-tur-50 规格：50个反应
货号：Mqt-tur-100 规格：100个反应
储存：-20度，避光保存，有效期一年。避免反复冻融。
试剂盒特点：
- 特异性检测Candidatus Mycoplasma turicensis，与其他生物基因组没有交叉反应。
- 使用的DNA聚合酶具有抗抑制能力强和热稳定性好的特点；采用热启动方式，可抑制非特异性扩增，降低背景荧光。
- 带有阳性对照样品（组分C），可用于检验试剂盒有效性。
- 带有dUTP和UDG酶，可降低残留DNA的污染。
嗜血支原体可以感染很多哺乳动物，包括猫、犬、猪、牛、羊等，也包括人类。目前已知寄生于猫血中的支原体有三种：猫血支原体（Mycoplasma haemofelis），Candidatus Mycoplasma haemominutum和Candidatus Mycoplasma turicensis。这些细菌粘附在红细胞表面生长，也会给宿主造成一些疾病，尤其是在猫免疫力下降的时候。有报道约14%的贫血猫呈血液支原体阳性。Candidatus Mycoplasma turicensis寄生于猫红细胞表面，在上述三种支原体中致病能力中等，且常与另两种支原体合并感染，可引起温和到急性的溶血性贫血，与猫免疫缺陷病毒合并感染时，或者可的松类药物处理后，临床症状加重。
嗜血支原体无法在体外培养，因此难以开发蛋白类检测方法。常用的检测方法包括显微镜镜检法和PCR法。镜检法灵敏度低，实验误差大，无法区分支原体种类，易受血液中其他物质以及人工涂片方法的干扰，且支原体易从红细胞表面脱落，造成漏检。而PCR法在灵敏度上则有明显的优势，且可以区分支原体种类。定量PCR法与普通PCR法相比，不仅可以精确定量，而且操作更为方便，更少受环境污染的影响。
本试剂盒基于16S rRNA基因的保守区域，设计特异性引物和探针，可以准确识别Candidatus Mycoplasma turicensis，与其他生物基因组没有交叉反应。在236份猫血样品中，检测获得14个阳性，其中2个为Candidatus Mycoplasma turicensis单独感染，2个为与猫血支原体共感染，3个为与Candidatus Mycoplasma haemominutum共感染，以及7个三种嗜血支原体共感染。
本试剂盒包含热启动DNA聚合酶、dNTP（以dUTP代替dTTP）、引物、探针、阳性对照品、ROX染料，和用以防止残余DNA污染的UDG（Uracil- DNA Glycosylase，尿嘧啶-DNA-糖基酶），用户只需准备好DNA样品即可使用。
本试剂盒采用的DNA聚合酶源自极端嗜热菌（Thermus thermophilus），经改造后较普通的Taq酶具有更强的抗抑制能力和热稳定性。通过结合特异性单克隆抗体，在室温下DNA聚合酶活性被抑制。在PCR循环的热变性阶段，抗体受热被去除，此时DNA聚合酶活性恢复，因此获得“热启动”功能。热启动可减少残余DNA的污染，提高PCR扩增效率、灵敏度和目的片段产量。
UDG和dUTP用于消除PCR扩增中的残余污染。dUTP可以确保扩增后的DNA中均含有尿嘧啶。UDG可从单链或双链DNA上去除尿嘧啶残基，从而阻止含有尿嘧啶的DNA作为模板继续扩增。UDG在正常的PCR循环过程中被高温灭活，对PCR反应没有影响。
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文献和实验-time PCR方法克服了由于miRNA分子太短（~22 nt）带来的定量最大难题而引入靶向特异性的反转录引物，该RT引物可以与成熟miRNA结合，形成反转录引物/成熟miRNA复合物，并在miRNA的5’末端延伸。这样就得到一个较长的反转录扩增因子，为进一步做实时定量PCR提供了符合要求的摸板。 RT引物有两种类型： 1. Oligod（T）特异的RT引物（QIAGEN产品为主） 由特异序列+（T）20左右+兼并碱基V或VN组成。（所有miRNA可以公用一个Oligod（T）的RT引物，但是RNA
。3.1 Taqman@探针法Taqman@探针是最早用于定量的方法。就在PCR扩增时加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针，该探针为一寡核苷酸：5’端标记一个报告荧光基团，3’端标记一个淬灭荧光基团。探针完整时，报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收，也就是FRET反应；PCR扩增时，Taq酶的5'-3'外切酶活性将探针酶切降解，使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离，从而荧光监测系统可接收到荧光信号，即每扩增一条DNA链，就有一个荧光分子形成，实现了荧光信号的累积与PCR产物形成完全同步。而新型TaqMan-MGB
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方法有： 1..荧光探针法：进行荧光PCR检测时，要求荧光探针必须完全与靶基因互补，长度以20-30个碱基为宜，必要时3′端磷酸化封闭，以防在扩增时作为引物延伸。该方法利用Taq酶的3′→5′聚合酶活性及5′→3′外切酶活性，可以在链延伸过程中实现链替换，并将被替换的探针切断，故可进行定性与定量检测。 荧光探针5′端标记的TAMRA，在480nm激发下产生530nm的红色荧光；3′端标记的FAM，激发后产生绿色荧光。PE公司推出的TaqMan系统，即采用双荧光探针，如配合使用PCR扩增与荧
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