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- 详细信息
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- 库存:
10000
- 英文名:
Dye-quantitative Real-time PCR Kit for Mycoplasma haemofelis
- 保质期:
一年
- 供应商:
上海炎熙生物科技有限公司
- 保存条件:
-20度
- 规格:
20个反应/50个反应/100个反应
| 规格: | 20个反应 | 产品价格: | ¥660.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 50个反应 | 产品价格: | ¥1250.0 |
| 规格: | 100个反应 | 产品价格: | ¥2200.0 |
染料法猫血支原体实时定量PCR试剂盒
Dye-quantitative Real-time PCR Kit for Mycoplasma haemofelis
货号:Mqs-hfe-20 20个反应
货号:Mqs-hfe-50 50个反应
货号:Mqs-hfe-100 100个反应
储存:-20度,避光保存,保质期一年。避免反复冻融。
试剂盒特点:
1, 特异性识别猫血支原体和犬血支原体,不受猫和犬的其他寄生微生物的干扰。
2, 使用热启动的Taq酶,可抑制非特异性扩增,降低背景荧光。
3, 带有阳性对照样品,可用于检验试剂盒有效性,以及验证待测样品中是否含有PCR抑制剂。
4, 带有ROX参比染料,帮助校正加样误差和管间差异。
5, 带有UDG酶和dUTP,可降低残留DNA的污染。
猫血支原体(Mycoplasma haemofelis),或称为猫嗜血支原体、猫附红细胞体,寄生于猫红细胞表面,独特的代谢特征展现出对脊椎动物红细胞表面生态位的极端适应。其基因组高度精简,大小通常在1.0-1.5 Mb之间,远小于大多数自由生活的细菌。这种基因组的极度缩减是长期适应寄生生活的结果,它丢失了许多与独立代谢相关的基因,仅保留最基础的DNA复制、转录、翻译及能量代谢相关基因。例如,它缺乏完整的糖酵解和三羧酸循环途径,无法自主合成多种氨基酸、核苷酸和脂类,必须依赖宿主红细胞内的营养物质生存。基因组的精简还导致其抗原变异性较低,但由于缺乏细胞壁,其膜蛋白仍可能发生一定程度的变异,帮助其部分逃避免疫系统的识别。在宿主体内,它通过膜转运蛋白摄取宿主红细胞内的ATP、胆固醇和其他必需分子,维持自身增殖。这种代谢上的“寄生剥削”策略使其能在宿主体内长期存活,但也限制了它的传播方式——通常需要直接接触(如血液交换)或媒介生物(如跳蚤)进行传播。
犬血支原体(Mycoplasma haemocanis)是一种专性寄生于犬科动物红细胞的微小病原体,属于柔膜体纲(Mollicutes),与猫血支原体亲缘关系非常近,基因组序列几乎100%相同,形态也类似。其基因组同样高度精简,大小通常在1.0至1.5 Mb之间,远小于大多数自由生活的细菌。这种基因组的极度缩减是长期适应寄生生活的结果,它丢失了许多与独立代谢相关的基因,仅保留最基础的DNA复制、转录、翻译及能量代谢相关基因。例如,它缺乏完整的糖酵解和三羧酸循环途径,无法自主合成多种氨基酸、核苷酸和脂类,必须依赖宿主红细胞内的营养物质生存。
由于代谢能力的缺陷,猫血支原体和犬血支原体在体外培养极为困难,目前尚无标准化的培养基能支持其长期生长,二者的检测方法主要包括显微镜检查、分子生物学技术和血清学检测。传统的显微镜检查可通过姬姆萨染色或瑞氏染色的血涂片观察红细胞表面的病原体,该方法简便快速,但灵敏度较低,尤其在低水平感染时易漏检。分子生物学方法如聚合酶链反应(PCR)是目前主流的检测手段,针对16S rRNA或特定基因片段进行扩增,具有高灵敏度和特异性,能够区分不同血支原体种类,甚至可定量检测病原体载量。血清学检测通过ELISA或间接免疫荧光试验(IFA)检测抗体,适用于流行病学调查,但无法区分现症感染与既往感染。
染料法猫血支原体实时定量PCR试剂盒针对猫血支原体的16S rRNA基因设计特异性引物,可准确识别猫血支原体和犬血支原体,仅与Mycoplasma haemobos有交叉反应。Mycoplasma haemobos寄生于牛血中,不会对本试剂盒的检测产生影响。本试剂盒适用于猫血支原体和犬血支原体的检测。
本试剂盒包含热启动Taq酶、dNTP(以UTP代替了TTP)、引物、阳性对照品、SYBR Green I染料、ROX染料,和用以防止残余DNA污染的UDG(尿嘧啶-N-糖苷酶),用户只需准备好DNA样品即可使用。
本产品仅供研究使用。不可用于临床诊断。
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文献和实验PCR产物的荧光值就可以。参比染料的作用是标准化荧光定量反应中的非PCR震荡,校正加样误差或者是孔与孔之间的误差,提供一个稳定的基线。现在很多公司已经把ROXTM配制在MasterMix或者Premixture里。如果反应曲线良好或已经优化好反应体系,也可以不加ROXTM染料校正。通常来讲,real-time qPCR的反应程序不需要像常规的PCR那样,要变性、退火、延伸3步。由于其产物长度在80-150bp 之间,所以只需要变性和退火就可以了。SYBR@Green等染料法,最好在PCR扩增程序结束
-time PCR方法克服了由于miRNA分子太短(~22 nt)带来的定量最大难题而引入靶向特异性的反转录引物,该RT引物可以与成熟miRNA结合,形成反转录引物/成熟miRNA复合物,并在miRNA的5’末端延伸。这样就得到一个较长的反转录扩增因子,为进一步做实时定量PCR提供了符合要求的摸板。 RT引物有两种类型: 1. Oligod(T)特异的RT引物(QIAGEN产品为主) 由特异序列+(T)20左右+兼并碱基V或VN组成。(所有miRNA可以公用一个Oligod(T)的RT引物,但是RNA
Green染料法的qPCR检测系统,可用于从一个合成反应的cDNA中检测多种miRNAs,不仅减少了误差、节约了样品,同时还实现了检测的高通2. 检测的特异性:独特的miRNA引物设计技术及其优化的反应体系避免了非特异性扩增、特别是Pre-miRNA的污染3.检测分辨率高:该系统能分辨单碱基差异的miRNA4.一站式解决方案:公司不仅提供检测的试剂盒,还提供经验证的人源、小鼠源、大鼠源的特异性miRNA 检测引物。5.检测灵敏度高:可在低至pg级的总RNA中检测到特异表达的miRNA参考文献:[1]
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