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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
负20度
- 保质期:
一年
- 英文名:
Probe-quantitative Real-time PCR Kit for Mycoplasma Agalactiae
- 库存:
10000
- 供应商:
上海炎熙生物科技有限公司
- 规格:
20个反应/50个反应/100个反应
| 规格: | 20个反应 | 产品价格: | ¥680.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 50个反应 | 产品价格: | ¥1300.0 |
| 规格: | 100个反应 | 产品价格: | ¥2300.0 |
探针法无乳支原体实时定量PCR试剂盒
Probe-quantitative Real-time PCR Kit for Mycoplasma Agalactiae
储存:-20度,避光保存,保质期一年。避免反复冻融。
货号:Mqt-aga-20 包装:20个反应
货号:Mqt-aga-50 包装:50个反应
货号:Mqt-aga-100 包装:100个反应
试剂盒特点:
1, 特异性检测无乳支原体,与其他生物的基因组不产生特异性信号。
2, 灵敏度高,最低检测极限为反应液中6个基因组。
3, 使用的DNA聚合酶具有抗抑制能力强和热稳定性好的特点;采用热启动方式,可抑制非特异性扩增,降低背景荧光。
4, 带有阳性对照样品,可用于检验试剂盒有效性。
5, 带有UDG酶和dUTP,可降低残留DNA的污染。
无乳支原体(Mycoplasma agalactiae)是一种革兰氏阴性菌,属于柔膜菌纲(Mollicutes),细胞形态呈多形性,通常为球形(直径约0.3-0.8 μm)或丝状,无细胞壁,仅由三层细胞膜包裹,基因组较小,约0.8-1.0 Mbp,G+C含量低(约32-34%),依赖宿主提供营养,缺乏鞭毛、荚膜等结构,但细胞膜表面含黏附素(如脂蛋白),帮助定植宿主。无乳支原体主要感染绵羊和山羊的乳腺、关节和眼部组织,通过直接接触或飞沫传播,哺乳期母羊最易感,引发传染性无乳症(Contagious Agalactia),并通过乳汁排菌造成垂直传播,而关节炎和角膜炎常见于羔羊。
无乳支原体表现出典型的“代谢寄生”特性,依赖宿主提供胆固醇、脂肪酸、核酸前体等必需营养物质。其能量代谢主要依赖糖酵解途径,缺乏完整的三羧酸循环和细胞色素系统,ATP生成效率较低。实验室培养需使用复杂培养基(如改良的SP-4培养基),并添加血清、酵母提取物和葡萄糖以支持生长。由于代谢能力有限,其在体外环境中的存活时间较短,但对宿主体内微环境(如乳腺、关节滑液)的适应性极强。
探针法无乳支原体实时定量PCR试剂盒特异性靶向无乳支原体,引物经BLAST验证,与其他生物的基因组不产生特异性信号。对多种支原体,包括易出现交叉反应的牛支原体(Mycoplasma Bovis),以及反刍动物常见的细菌和病毒,进行检测,证实本试剂盒对无乳支原体具有特异性,适用于无乳支原体的检测和鉴定。
本产品仅供研究使用。
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文献和实验-time PCR方法克服了由于miRNA分子太短(~22 nt)带来的定量最大难题而引入靶向特异性的反转录引物,该RT引物可以与成熟miRNA结合,形成反转录引物/成熟miRNA复合物,并在miRNA的5’末端延伸。这样就得到一个较长的反转录扩增因子,为进一步做实时定量PCR提供了符合要求的摸板。 RT引物有两种类型: 1. Oligod(T)特异的RT引物(QIAGEN产品为主) 由特异序列+(T)20左右+兼并碱基V或VN组成。(所有miRNA可以公用一个Oligod(T)的RT引物,但是RNA
。3.1 Taqman@探针法Taqman@探针是最早用于定量的方法。就在PCR扩增时加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针,该探针为一寡核苷酸:5’端标记一个报告荧光基团,3’端标记一个淬灭荧光基团。探针完整时,报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收,也就是FRET反应;PCR扩增时,Taq酶的5'-3'外切酶活性将探针酶切降解,使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离,从而荧光监测系统可接收到荧光信号,即每扩增一条DNA链,就有一个荧光分子形成,实现了荧光信号的累积与PCR产物形成完全同步。而新型TaqMan-MGB
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