CTP2-CP4-EPSPS转基因构建探针法荧光定量PCR试

CTP2-CP4-EPSPS转基因构建探针法荧光定量PCR试剂盒规格实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳，以软件分析电泳条带的灰度值（IOD值），通过与内参基因的灰度值比较，判断目的mRNA的相对表达量。
【储存条件及有效期】:
-20℃避光保存，避免反复冻融，有效期6个月。
【样本采集、存放及运输】
u 样本采集：各类型样本按照常规方法采集；
u 存放：样本在2~8℃条件下保存应不超过72h，-70℃以下可长期保存，但应避免反复冻融（最多冻融3次）；
u 运输：采用冰壶或泡沫箱加冰密封进行运输。

    OSTM1    骨硬化病相关跨膜蛋白1抗体
    Orosomucoid 2    类粘蛋白2抗体
    4-Oct    胚胎干细胞关键蛋白抗体
    OPG    骨保护蛋白/护骨素抗体
    2-Oct    阳离子转运蛋白2抗体
    osteopontin    骨桥蛋白/分泌型磷蛋白1抗体
    osteopontin    骨桥蛋白抗体(分泌型磷蛋白1)
    Orexin-A    增食欲素A/欲激素A
    Osterix    成骨相关转录因子抗体
    Ovalbumin    鸡卵白蛋白/卵清蛋白抗体
    Orexin receptor 1+2    丘脑分泌素受体1+2/食欲素受体1+2抗体
    1-Oct    阳离子转运器1抗体
    ox-LDL    氧化低密度脂蛋白抗体
    Osteocalcin    骨钙蛋白/骨钙素抗体
    Optineurin    视神经病变诱导蛋白抗体
 CTP2-CP4-EPSPS转基因构建探针法荧光定量PCR试剂盒规格   2-Oct    胚胎干细胞关键蛋白2抗体
    1-Oct    胚胎干细胞关键蛋白1抗体
    OPRS1    衰老相关Sigma受体蛋白抗体
    OST-beta    有机溶质转运蛋白OSTβ抗体
    Noelin    嗅球蛋白1抗体
    OA1    眼部白化病相关蛋白OA1/蛋白偶联受体143抗体
    Oncostatin M    癌基因蛋白抑瘤素M抗体
    OVCA2    卵巢癌相关基因2蛋白抗体
    Orai2    跨膜蛋白Orai2抗体
    OTOA    耳聋、常染色体隐性遗传22抗体
    C1orf80    1号染色体开放阅读框80抗体
    OAS1    寡腺苷酸合成酶-1
    KLHDC9    KLHDC9蛋白抗体
    OLIG3    少突胶质细胞转录因子3抗体
    OTP    螺旋转录因子OTP抗体
    ompF    小肠结肠炎耶尔森氏菌膜通道蛋白抗体
    OCEL1    紧密连接蛋白/小分子胶原蛋白OCEL1抗体
    SHANK3    富含脯氨酸突触相关蛋白SHANK3抗体
    Oncomodulin    癌调蛋白/癌钙蛋白抗体
    Omgp    少突细胞髓磷脂糖蛋白抗体
    OPCML   样物质结合蛋白/细胞粘附分子样蛋白抗体
    ODF4    外致密纤维精子尾部蛋白4抗体
    OAS2    2'-5'-寡腺苷酸合成酶2抗体
    mu Opioid receptor    μ-型受体抗体
    Phospho-delta Opioid Receptor (Ser363)    磷酸化D型受体抗体
    OXCT1    含氧酸辅酶A转移酶1抗体
    Oncostatin M    抑瘤素M抗体
    OSMR    抑瘤素M受体抗体
    OVOL2    锌指蛋白339抗体
    ORP150    氧气调节蛋白150抗体
    OXSR1    氧化应激反应蛋白1抗体
    ODZ1    固生蛋白M抗体
    OGFOD1    末端多聚腺苷酸1蛋白抗体
    Optimedin    嗅球蛋白3抗体
    OTX1    转录因子OTX1抗体
    OTX2    转录因子OTX2抗体
    OTX1 + OTX2    转录因子OTX1+OTX2抗体
    Orexin B    增食欲素B/欲激素B
    ODC    鸟氨酸脱羧酶抗体
    O-GlcNAc transferase    O位N-乙酰葡萄糖胺OGT抗体
    OLIG1    少突胶质细胞转录因子1
    SLC22A6    阴离子转运蛋白-1抗体
    OAT-3    阴离子转运蛋白-3抗体
    Oxytocin R    催产素受体(缩宫素受体)抗体
    OCLN    紧密连接蛋白抗体
    OCIAD1    卵巢癌免疫反应抗原抗体
    OMPC    大肠杆菌外膜孔道蛋白C抗体
    Plexin B1    神经丛蛋白B1抗体
    phospho-PRKCZ(Thr410)    磷酸化蛋白激酶C



储存条件：
14℃或－20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液：3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
组成及试剂配制:
1、酶标板：一块（96孔）
2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液：1×20ml。
4、 检测稀释液A：1×10ml。
5、 检测稀释液B：1×10ml。

反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：
①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。
②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基，特别是最末及倒数第二个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以最低引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。