CP4-EPSPS转基因元件探针法荧光定量PCR试剂盒说明书

CP4-EPSPS转基因元件探针法荧光定量PCR试剂盒说明书注意事项：1．基础程序；2．扩增温度和延伸温度；3．反应时间；4．循环次数；5．PCR 反应液的配制；6．PCR技术的基本原理；7．PCR的反应动力学；8．PCR扩增产物；9．PCR反应体系与反应条件。

特点：
1. 一管式操作，用户只需要提供样品即可。
2. 根据大豆热休克蛋白基因保守区域设计引物，能专一性检测出样品中的大豆成分，但不能检测其他非大豆成分。
3. 快速，整个检测过程（按一个样品计）所需时间仅为 2.0 小时。
4. 只需要普通 PCR 仪和凝胶电泳仪，无需配置贵重仪器设备。
5. 对混合样品中大豆成分的检测下限为 0.1%，对样品中大豆成分的核酸检测下限为 1.0ng/μL。
6. 本只能用于科研，足够 50 次 40uL 体系的常规 PCR。
PCR反应的特异性决定因素为：
①引物与模板DNA特异正确的结合；
②碱基配对原则；
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性；
④靶基因的特异性与保守性。
鱼11-酮类固醇免疫试剂盒    INPPL1    肌醇聚磷酸盐磷酸酶样蛋白1抗体
鱼11-酮睾酮(KT)免疫试剂盒    Insig2    胰岛素诱导基因2抗体
鱼(鲑鱼)瘦素(LEP)免疫试剂盒    IHH    HHG2抗体
羊ELISA试剂盒    Interferon alpha 17    干扰素α17抗体
羊胰岛素样生长因子II(IGF2)免疫试剂盒    IL1RAPL2    白介素1受体9抗体
羊水通道蛋白5(AQP5)免疫试剂盒    IQGAP3    RasGTP酶激活蛋白IQGAP3抗体
羊生长分化因子9(GDF9)免疫试剂盒    IRX1    Iroquois同源蛋白1抗体
羊溶菌酶(LZM)免疫试剂盒    ITM2B    跨膜蛋白BRI抗体
羊抗单链DNA抗体/变性DNA(ssDNA)抗体免疫试剂盒    ITM2C    跨膜蛋白ITM2C抗体
羊环磷酸腺苷(cAMP)免疫试剂盒    IL-31    白细胞介素31抗体
羊环磷酸鸟苷(cGMP)免疫试剂盒    human Serum IgA    人血清型免疫球蛋白A抗体
羊促肾上皮质激素释放激素(CRH)免疫试剂盒    Iroquois homeobox protein 3    Irx3蛋白抗体
羊白介素7(IL7)免疫试剂盒    Intra Acrosomal Protein    精子顶端体蛋白10抗体
羊α晶体B链(CRYAB)免疫试剂盒    human secretory IgA    人分泌型免疫球蛋白A
鸭ELISA试剂盒    ICA1    胰岛细胞自身抗原1抗体
鸭子神经肽Y(NP-Y)免疫试剂盒    Islet 2    胰岛素基因增强结合蛋白2抗体
鸭子磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(pAMPK)免疫试剂盒    IL-16    白介素-16抗体
鸭子催乳素(PRL/LTH)免疫试剂盒    AIF1    离子钙接头蛋白抗体
鸭子刺鼠相关蛋白(AGRP)免疫试剂盒    IRX4    Iroquois同源蛋白4抗体
鸭生长激素1(GH1)免疫试剂盒    IFRD1    干扰素相关发育调节蛋白1抗体（神经生长因子诱导蛋白PC4）
鸭免疫球蛋白E(IgE)免疫试剂盒    ILP2    抑制细胞凋亡样蛋白2抗体
鸭抗凝血素抗体(aPT1/aPT2)免疫试剂盒    IFITM1    干扰素诱导跨膜蛋白1抗体
鸭极低密度脂蛋白(VLDL)免疫试剂盒    IFI44    干扰素诱导蛋白44抗体
鸭环磷酸腺苷(cAMP)免疫试剂盒    ITPR3    5-三磷酸肌醇受体3抗体
CP4-EPSPS转基因元件探针法荧光定量PCR试剂盒说明书鸭环磷酸鸟苷(cGMP)免疫试剂盒    IFNW1    干扰素omega 1蛋白抗体
鸭白介素8(IL-8/CXCL8)免疫试剂盒    IFNA7    干扰素alpha 7蛋白抗体
鸭白介素6(IL-6)免疫试剂盒    IFN-Beta    干扰素β抗体
鸭白介素4(IL-4)免疫试剂盒    ID1    DNA结合抑制因子1抗体
鸭白介素2(IL-2)免疫试剂盒    IFI-202    γ干扰素诱导蛋白202抗体
鸭白介素1(IL-1)免疫试剂盒    intestinal FABP/IFABP/FABP2    肠型脂肪酸结合蛋白抗体
鸭γ干扰素(IFN-γ)免疫试剂盒    ING1    生长抑制因子基因1抗体
鸭β干扰素(IFN-β/IFNB)免疫试剂盒    IL-8/CXCL8    白介素8抗体其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性，使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行，结合的特异性大大增加，被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区，其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的，能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞；在病毒的检测中，PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位)；在细菌学中zui小检出率为3个细菌。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶，一次性地将反应液加好后，即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应，一般在2～4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析，不一定要用同位素，无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或细菌及培养细胞，DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。

使用方法: 一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意：DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA，后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 Cps 标准曲线（以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体病毒做阳性对照，只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管，分别为 6，5，4，3，2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水（最好用带芯枪头，下同）。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL（注：请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL，建议每次稀释 10 倍，梯度稀释至 10E7 拷贝/μL）。 4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头，从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中，充分震荡 1 分钟，得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头，从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中，重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。 7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR（见下步），每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值，并以之为纵轴，以浓度的对数值为横轴，绘制标准曲线。