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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
999
- 英文名:
Buffered glycerol - Sodium Chloride Solution
- 保质期:
三年
- 供应商:
青岛海博
- 保存条件:
阴凉干燥处
- 规格:
250g
用途:用于检测产气荚膜梭菌时样品的贮存。
成分(g/L):
| 氯化钠 | 4.2 |
| 磷酸氢二钾 | 12.4 |
| 磷酸二氢钾 | 4.0 |
| pH值7.2 | 25℃ |
检验原理: 磷酸氢二钾,磷酸二氢钾为缓冲液。
用法
称取本品 20.6g,另取 100ml甘油,加热溶解于 900ml 蒸馏水中,121℃高压灭菌 15分钟,备用。
注:配制双料缓冲甘油-氯化钠溶液(20%)时,用甘油 200ml,和蒸馏水 800ml。
缓冲甘油-氯化钠溶液微生物灵敏度试验:
按标签用法制备培养基,接种以下质控菌株,放置20-25℃需氧培养24小时。


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文献和实验一、直接免疫荧光法(一)基本原理将荧光素标记在相应的抗体上,直接与相应抗原反应。其优点是方法简便、特异性高,非特异性荧光染色少。缺点是敏感性偏低;而且每检查一种抗原就需要制备一种荧光抗体。此法常用于细菌、病毒等微生物的快速检查和肾炎活检、皮肤活检的免疫病理检查。(二)试剂与仪器 磷酸盐缓冲盐水(PBS):0.01mol/L,pH7.4 荧光标记的抗体溶液:以0.01mol/L,pH7.4的PBS进行稀释 缓冲甘油:分析纯无荧光的甘油9份+ pH9.2 0.2M碳酸盐缓冲液1份
菌种活化:干粉标准菌株 标准贮备菌株 工作菌株; 1.1 金黄色葡萄球菌、大肠埃希氏菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌标准菌株: 挑取部分干粉溶解于0.9% 无菌氯化钠溶液中,划线接种于营养琼脂平板上,36℃±1℃ 培养18-24 小时。并观察菌落形态。 a. 金黄色葡萄球菌:菌落凸起,圆形,不透明; b. 大肠埃希氏菌:菌落稍凸,圆形,湿润,乳白色; c. 铜绿假单胞菌:菌落扁平,圆形,边缘不整齐,光滑湿润,可产生蓝绿或黄绿色素; d. 枯草芽孢杆菌: 表面粗糙不透明
一、直接法 1.标本经固定后,PBS洗涤3×3分钟。 2.加荧光素标记的抗体,湿盒内37℃孵育50分钟。 3.PBS洗涤3×3分钟。 4.0.1%伊文氏兰复染。 5.PBS洗3次,蒸馏水洗2次,每次3分钟,以除去NaCl结晶。 6.缓冲甘油封片,镜检。 二、间接法 1.标本固定后,PBS洗涤3×3分钟。 2.滴加一抗,37℃ 40分钟或4℃过夜。 3.PBS洗涤3×3分钟。 4.滴加荧光标记二抗37℃ 40
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