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- 详细信息
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- 技术资料
- 库存:
大量
- 英文名:
Buffered glycerol - Sodium Chloride Solution
- 保质期:
3年
- 供应商:
上海联迈生物工程有限公司
- 保存条件:
常温、避光、防潮保存
- 规格:
250g
| 名称 | 英文名称 | 编号 | 规格 | 价格 |
| 缓冲甘油-氯化钠溶液 | Buffered glycerol - Sodium Chloride Solution | LM8503 | 250g | 95元 |
| 产品说明及用途:.用于检测产气荚膜梭菌时样品的贮存 | ||||
用途:用于检测产气荚膜梭菌时样品的贮存。
成分(g/L)
氯化钠 4.2
磷酸氢二钾 12.4
磷酸二氢钾 4.0
pH值7.2 25℃
用法
称取本品 20.6g,另取 100ml甘油,加热溶解于 900ml 蒸馏水中,121℃高压灭菌 15分钟,备用。
注:配制双料缓冲甘油-氯化钠溶液(20%)时,用甘油 200ml,和蒸馏水 800ml。
简述培养基制备的要求使用脱水培养基和其他含有有害物质(胆盐或其它选择剂)的成分时,应遵守良好实验室规范和生产厂商提供的使用说明配制。如质量/体积、pH、制备条件、灭菌条件和操作步骤等,并做好记录。
水
配制培养基使用蒸馏水或相同质量的水,以排除测试条件下抑制或影响微生物生长的物制。如果蒸馏水的用氯消毒的水制备的,在蒸馏前应先对氯进行中和(见GB/T6682)。盛放蒸馏水的容器最好是由中性材料制成的(如中性玻璃、聚乙烯等)。在初次使用前要确认容器中不含任何抑制因子。
缓冲甘油-氯化钠溶液为保证蒸馏水的质量,电阻率应至少达到300000Ωcm。
警告:采用离子交换器(去离子)生产的去离子水,微生物含量较高,这种水在过滤灭菌后仍可能带有细菌生长的抑制因子。所以配置培养基时最好不要使用这种方法生产的去离子水而应使用蒸馏水。
称量和复水
称量所需的脱水培养基(注意缓慢操作,必要时佩带口罩或在通风柜中操作,以防吸入含有毒物质的培养基粉末),缓冲甘油-氯化钠溶液先加入少量的水,充分混合(注意避免培养基结块),然后再加入至所需的量。
溶解
脱水培养基加水后适当加热,并不停搅拌使其快速溶解,必要时,重新溶解。含琼脂的培养基在加热前应先浸泡几分钟。用各别成分制备的培养基应将不同成分分别加入适量的水中,并充分溶解,然后再加入到所需的量。
pH值的测定和调整
用pH计测pH,必要时进行调整。在实验室用各别成分制备培养基,除特殊说明外,培养基灭菌后冷却到25℃时,pH的变化不应超过0.2个单位。一般使用浓度约为40g/L(约1mol/L)的氢氧化钠溶液或浓度为36.5g/L(约1mol/L)的盐酸溶液调整培养基的pH。
缓冲甘油-氯化钠溶液注:商品化的培养基高压灭菌后pH值可能变化很大,但采用优质蒸馏水或去离子水配配制时,灭菌前无需调节pH值。
分装
将制配制好的培养基分装到适当的容器中,根据不同用途,容器的体积可为培养基的1倍、2倍或3倍。
灭菌
培养基和试剂应采用湿热灭菌或过滤灭菌。亮绿培养基等特定的培养基中含有对光和热敏感的物质,只能煮沸灭菌。煮沸后应迅速冷却,避光保存(参见相关标准或供应商使用说明)。
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文献和实验一、直接免疫荧光法(一)基本原理将荧光素标记在相应的抗体上,直接与相应抗原反应。其优点是方法简便、特异性高,非特异性荧光染色少。缺点是敏感性偏低;而且每检查一种抗原就需要制备一种荧光抗体。此法常用于细菌、病毒等微生物的快速检查和肾炎活检、皮肤活检的免疫病理检查。(二)试剂与仪器 磷酸盐缓冲盐水(PBS):0.01mol/L,pH7.4 荧光标记的抗体溶液:以0.01mol/L,pH7.4的PBS进行稀释 缓冲甘油:分析纯无荧光的甘油9份+ pH9.2 0.2M碳酸盐缓冲液1份
菌种活化:干粉标准菌株 标准贮备菌株 工作菌株; 1.1 金黄色葡萄球菌、大肠埃希氏菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌标准菌株: 挑取部分干粉溶解于0.9% 无菌氯化钠溶液中,划线接种于营养琼脂平板上,36℃±1℃ 培养18-24 小时。并观察菌落形态。 a. 金黄色葡萄球菌:菌落凸起,圆形,不透明; b. 大肠埃希氏菌:菌落稍凸,圆形,湿润,乳白色; c. 铜绿假单胞菌:菌落扁平,圆形,边缘不整齐,光滑湿润,可产生蓝绿或黄绿色素; d. 枯草芽孢杆菌: 表面粗糙不透明
一、直接法 1.标本经固定后,PBS洗涤3×3分钟。 2.加荧光素标记的抗体,湿盒内37℃孵育50分钟。 3.PBS洗涤3×3分钟。 4.0.1%伊文氏兰复染。 5.PBS洗3次,蒸馏水洗2次,每次3分钟,以除去NaCl结晶。 6.缓冲甘油封片,镜检。 二、间接法 1.标本固定后,PBS洗涤3×3分钟。 2.滴加一抗,37℃ 40分钟或4℃过夜。 3.PBS洗涤3×3分钟。 4.滴加荧光标记二抗37℃ 40
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