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- 2025年07月14日
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32
- 英文名：
ROX Reference Dye
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海西格
- 保存条件：
低温保存
- 规格：
50 μL 200 μL 500 μL 1 mL
ELISA测定错误的原因分析：ELISA测定出现假阳性和假阴性的结果，主要有标本因素、试剂因素和操作因素，其中标本因素主要由干扰性物质所致，分内源性和外源性两种。仅供科研使用
产品名称: ROX参比染料
英文名称 ROX Reference Dye
规格: 50 μL 200 μL 500 μL 1 mL
分类 PCR荧光核酸试剂
选择方法：
1. 明确检测何种蛋白；
2. 明确编码该蛋白的基因与其它哪些物种同源性zui好；
3. 寻找检测这些物种蛋白的试剂盒；
4. 咨询我公司使用的抗体类型；
5. 做出自己的判断该买哪个试剂盒。
动物组织匀浆的制备：
1、取组织块（0.1g～0.2g）zui少可到2～5mg在冰冷的盐水中漂洗，除去血液，滤纸拭干，准确称重，放入5ml的匀浆管中。
2、按重量(g):体积(ml)=1:9的比例加入9倍体积的匀浆介质（pH7.4， 0.01mol/L Tris-HCl，1mmol/L EDTA-2Na ,0.01mol/L蔗糖,0.8%的溶液）或者0.86%的盐水于匀浆管中，冰水浴条件下,用眼科小剪尽快剪碎组织块。
3、匀浆的方式有多种：手工匀浆，机器匀浆，超声粉碎。
① 手工匀浆：左手持匀浆管将下端插入盛有冰水混合物的器皿中，右手将捣杆垂直插入套管中，上下转动研磨数十次（6～8分钟），充分研碎，制成10%的匀浆液。
② 机器匀浆：用组织捣碎机10000～15000 转/分 上下研磨制成10%组织匀浆，也可用内切式组织匀浆机制备（匀浆时间10秒/次，间隙30秒，连续3～5次，在冰水中进行），皮肤、肌肉组织等可延长匀浆时间。
③ 超声粉碎：用超声粉碎机进行粉碎，可用Soniprep150型超声波发生器以振幅14微米超声处理30秒使细胞破碎，也可用国产超声波发生仪，用400安培，5秒/次，间隙10秒反复3～5次。
4、将制备好的10%匀浆液用普通离心机或低温低速离心机2500转/分左右,离心10～15分钟，取上清液进行测定。
对于测定结果的判定主要分定性和定量两种：
①定性测定：定性测定的结果判断一般分为"阳性"和"阴性"两种。"阳性"表示该标本在该测定系统中有反应，"阴性"则为无反应。用定性判断法也可得到半定量结果，即用滴度来表示反应的强度，其实质仍是一个定性试验。在间接法和夹心法ELISA中，阳性孔呈色深于阴性孔。在竞争法ELISA中则相反，阴性孔呈色深于阳性孔。
②定量测定：在定量测定中，每批测试均须用一系列不同浓度的参考标准品在相同的条件下制作标准曲线。
A.测定大分子量物质的夹心法ELISA，标准曲线的范围一般较宽，曲线点的吸光度可接近2.0，绘制时常用半对数值，以检测物的浓度为横坐标，以吸光度为纵坐标，将各浓度的值逐点连接，所得曲线一般呈S形，其头、尾部曲线趋于平坦，中央较呈直线的部分是最理想的检测区域。
B.测定小分子量物质常用竞争法，其标准曲线中吸光度与受检物质的浓度呈负相关。标准曲线的形状因试剂盒所用模式的差别而略有不同。ELISA测定的标准曲线注意图中横坐标为对数关系，这更有利于测定系统的表达。
ELISA的操作要点:
1）标本的采取和保存：可用作ELISA测定的标本十分广泛，体液（如血清）、分泌物（唾液）和排泄物（如尿液、粪便）等均可作标本以测定其中某种抗体或抗原成份。有些标本可直接进行测定（如血清、尿液），有些则需经预处理（如粪便和某些分泌物）。大部分ELISA检测均以血清为标本；
2）试剂的准备：所需试剂、蒸馏水、去离子水、自配的缓冲液；
3）加样：一般有3次加样步聚，即加标本，加酶结合物，加底物。
4）保温：ELISA中一般有两次抗原抗体反应，即加标本和加酶结合物后。抗原抗体反应的完成需要有一定的温度和时间，这一保温过程称为温育。
5）洗涤：洗涤的方式除某些ELISA仪器配有特殊的自动洗涤仪外，手工操作有浸泡式和流水冲洗式两种。
6）显色和比色：显色是ELISA中的最后一步温育反应，此时酶催化无色的底物生成有色的产物。比色前应先用洁净的吸水纸拭干板底附着的液体，然后将板正确放入酶标比色仪的比色架中。仪器准备为酶标仪。
7）结果判断：分定性判定和定量判定。
ROX参比染料要点：
☆标本的采取和保存：可用作ELISA测定的标本十分广泛，体液（如血清）、分泌物（唾液）和排泄物（如尿液、粪便）等均可作标本以测定其中某种抗体或抗原成份。有些标本可直接进行测定（如血清、尿液），有些则需经预处理（如粪便和某些分泌物）。大部分ELISA检测均以血清为标本；
试剂的准备：所需试剂、蒸馏水、去离子水、自配的缓冲液；
加样：一般有3次加样步聚，即加标本，加酶结合物，加底物。
保温：ELISA中一般有两次抗原抗体反应，即加标本和加酶结合物后。抗原抗体反应的完成需要有一定的温度和时间，这一保温过程称为温育。
洗涤：洗涤的方式除某些ELISA仪器配有特殊的自动洗涤仪外，手工操作有浸泡式和流水冲洗式两种。
显色和比色：显色是ELISA中的最后一步温育反应，此时酶催化无色的底物生成有色的产物。比色前应先用洁净的吸水纸拭干板底附着的液体，然后将板正确放入酶标比色仪的比色架中。仪器准备为酶标仪。
结果判断：分定性判定和定量判定。
Tolvaptan 中文名：托伐普坦 分子式：C26H25ClN2O3 匀浆制作或抽提 Homogenate production or exaction
Toltrazuril 中文名：托曲珠利 分子式：C18H14F3N3O4S （皮肤骨骼肌肠肌肉等难匀特殊样品） (the skin and skeletal muscle and other hard uniform special sample)
Tolazoline 中文名：盐酸妥拉唑林 分子式：C10H13ClN2 超氧化物歧化酶（SOD）检测 Superoxide dismase (SOD) detection
Tokinolide B 中文名： 分子式：C24H28O4 二（MDA）检测 Malondialdehyde (MDA) detection
Tofacitinib 中文名：枸橼酸托法替尼 分子式：C22H28N6O8 载脂蛋白B（ApoB）测定试剂盒（比浊法）
小鼠神经丝蛋白elisa试剂盒 小鼠神经丝蛋白试剂盒 规格型号：96T/48T 小鼠神经丝蛋白试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠神经丝蛋白试剂盒、小鼠神经丝蛋白elisa试剂盒 保存条件：2-8℃ 保质期：6个月。 Iloperidone 中文名：伊潘立酮 分子式：C24H27FN2O4 度：98.0%
小鼠神经丝蛋白(NF)ELISAKit ELISA. 96T/48T Bis(phenylacetyl) disulfide 中文名：双(苯乙酰)二硫化物 分子式：C16H14O2S2 度：98.0%
小鼠神经生长因子elisa试剂盒 小鼠神经生长因子试剂盒 规格型号：96T/48T 小鼠神经生长因子试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠神经生长因子试剂盒、小鼠神经生长因子elisa试剂盒 保存条件：2-8℃ 保质期：6个月。 Iloperidone 中文名：伊潘立酮 分子式：C24H27FN2O4
小鼠神经生长因子(NGF)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装 Imatinib 152459-95-5 中文名：伊马替尼 分子式：C29H31N7O 度：98.0% 关键词：
小鼠神经生长因子(mouse NGF) 作用： ELISA 规格： 48T/96T 进口分装 Diclazuril 101831-37-2 中文名：地克珠利 分子式：C17H9Cl3N4O2
豚鼠γ干扰素elisa试剂盒 豚鼠γ干扰素试剂盒 规格型号：96T/48T 豚鼠γ干扰素试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：豚鼠γ干扰素试剂盒、豚鼠γ干扰素eisa试剂盒 保存条件：2-8℃ 保质期：6个月。 Allitol 中文名：蒜糖醇 分子式：C6H14O6 度：%
豚鼠γ干扰素(IFN-γ)ELISA试剂盒 ，英文名： IFN-γ ELISA Kit 22-Dehydroclerosteryl acetate 28594-00-5 中文名： 分子式：C31H48O2 度：93.0% 关键词： 大叶桂樱; 豆甾烷; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库
豚鼠γ干扰素(IFN-γ)ELISAKit ELISA. 96T/48T Aminophenazone 58-15-1 中文名： 分子式：C13H17N3O
豚鼠γ干扰素(IFN-γ)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装 22-Dehydroclerosterol 中文名：22-去氢赤桐甾醇 分子式：C29H46O 度：94.0%
豚鼠α干扰素(IFN-α)ELISA试剂盒 ，英文名： IFN-α ELISA Kit 21-Deoxyneridienone B 924910-83-8 中文名： 分子式：C21H28O3 度：% 关键词： 孕甾烷; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库
ROX参比染料β-Sitosterol 83-46-5 中文名：β-谷甾醇 分子式：C29H50O Humanepidermalbasememembranezone,EBMZELISAKit 人抗表皮细胞基底膜抗体(EBMZ)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
Thevetin B 27127-79-3 中文名： 分子式：C42H66O18 HumanEamoebahistolyticaAigenELISA试剂盒人痢疾内阿米巴抗原ELISA试剂盒规格：96T/48T
6,7-Dihydroneridienone A 72959-46-7 中文名： 分子式：C21H28O3 组织PKCη激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)20次
Dregeoside A11 8
9020-11-1
中文名： 分子式：C55H88O22 HumanParathyroidHormoneRelatedProtein,PTHrPELISAKit人甲状旁腺激素相关蛋白(PTHrP)ELISA试剂盒规格：96T/48T
Stigmasta-4,22-diene-3β,6β-diol 167958-89-6 中文名： 分子式：C29H48O2 兔子基质金属蛋白酶5(MMP-5)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
产品名称: ROX参比染料
英文名称 ROX Reference Dye
规格: 50 μL 200 μL 500 μL 1 mL
分类 PCR荧光核酸试剂
选择方法：
1. 明确检测何种蛋白；
2. 明确编码该蛋白的基因与其它哪些物种同源性zui好；
3. 寻找检测这些物种蛋白的试剂盒；
4. 咨询我公司使用的抗体类型；
5. 做出自己的判断该买哪个试剂盒。
动物组织匀浆的制备：
1、取组织块（0.1g～0.2g）zui少可到2～5mg在冰冷的盐水中漂洗，除去血液，滤纸拭干，准确称重，放入5ml的匀浆管中。
2、按重量(g):体积(ml)=1:9的比例加入9倍体积的匀浆介质（pH7.4， 0.01mol/L Tris-HCl，1mmol/L EDTA-2Na ,0.01mol/L蔗糖,0.8%的溶液）或者0.86%的盐水于匀浆管中，冰水浴条件下,用眼科小剪尽快剪碎组织块。
3、匀浆的方式有多种：手工匀浆，机器匀浆，超声粉碎。
① 手工匀浆：左手持匀浆管将下端插入盛有冰水混合物的器皿中，右手将捣杆垂直插入套管中，上下转动研磨数十次（6～8分钟），充分研碎，制成10%的匀浆液。
② 机器匀浆：用组织捣碎机10000～15000 转/分 上下研磨制成10%组织匀浆，也可用内切式组织匀浆机制备（匀浆时间10秒/次，间隙30秒，连续3～5次，在冰水中进行），皮肤、肌肉组织等可延长匀浆时间。
③ 超声粉碎：用超声粉碎机进行粉碎，可用Soniprep150型超声波发生器以振幅14微米超声处理30秒使细胞破碎，也可用国产超声波发生仪，用400安培，5秒/次，间隙10秒反复3～5次。
4、将制备好的10%匀浆液用普通离心机或低温低速离心机2500转/分左右,离心10～15分钟，取上清液进行测定。
对于测定结果的判定主要分定性和定量两种：
①定性测定：定性测定的结果判断一般分为"阳性"和"阴性"两种。"阳性"表示该标本在该测定系统中有反应，"阴性"则为无反应。用定性判断法也可得到半定量结果，即用滴度来表示反应的强度，其实质仍是一个定性试验。在间接法和夹心法ELISA中，阳性孔呈色深于阴性孔。在竞争法ELISA中则相反，阴性孔呈色深于阳性孔。
②定量测定：在定量测定中，每批测试均须用一系列不同浓度的参考标准品在相同的条件下制作标准曲线。
A.测定大分子量物质的夹心法ELISA，标准曲线的范围一般较宽，曲线点的吸光度可接近2.0，绘制时常用半对数值，以检测物的浓度为横坐标，以吸光度为纵坐标，将各浓度的值逐点连接，所得曲线一般呈S形，其头、尾部曲线趋于平坦，中央较呈直线的部分是最理想的检测区域。
B.测定小分子量物质常用竞争法，其标准曲线中吸光度与受检物质的浓度呈负相关。标准曲线的形状因试剂盒所用模式的差别而略有不同。ELISA测定的标准曲线注意图中横坐标为对数关系，这更有利于测定系统的表达。
ELISA的操作要点:
1）标本的采取和保存：可用作ELISA测定的标本十分广泛，体液（如血清）、分泌物（唾液）和排泄物（如尿液、粪便）等均可作标本以测定其中某种抗体或抗原成份。有些标本可直接进行测定（如血清、尿液），有些则需经预处理（如粪便和某些分泌物）。大部分ELISA检测均以血清为标本；
2）试剂的准备：所需试剂、蒸馏水、去离子水、自配的缓冲液；
3）加样：一般有3次加样步聚，即加标本，加酶结合物，加底物。
4）保温：ELISA中一般有两次抗原抗体反应，即加标本和加酶结合物后。抗原抗体反应的完成需要有一定的温度和时间，这一保温过程称为温育。
5）洗涤：洗涤的方式除某些ELISA仪器配有特殊的自动洗涤仪外，手工操作有浸泡式和流水冲洗式两种。
6）显色和比色：显色是ELISA中的最后一步温育反应，此时酶催化无色的底物生成有色的产物。比色前应先用洁净的吸水纸拭干板底附着的液体，然后将板正确放入酶标比色仪的比色架中。仪器准备为酶标仪。
7）结果判断：分定性判定和定量判定。
ROX参比染料要点：
☆标本的采取和保存：可用作ELISA测定的标本十分广泛，体液（如血清）、分泌物（唾液）和排泄物（如尿液、粪便）等均可作标本以测定其中某种抗体或抗原成份。有些标本可直接进行测定（如血清、尿液），有些则需经预处理（如粪便和某些分泌物）。大部分ELISA检测均以血清为标本；
试剂的准备：所需试剂、蒸馏水、去离子水、自配的缓冲液；
加样：一般有3次加样步聚，即加标本，加酶结合物，加底物。
保温：ELISA中一般有两次抗原抗体反应，即加标本和加酶结合物后。抗原抗体反应的完成需要有一定的温度和时间，这一保温过程称为温育。
洗涤：洗涤的方式除某些ELISA仪器配有特殊的自动洗涤仪外，手工操作有浸泡式和流水冲洗式两种。
显色和比色：显色是ELISA中的最后一步温育反应，此时酶催化无色的底物生成有色的产物。比色前应先用洁净的吸水纸拭干板底附着的液体，然后将板正确放入酶标比色仪的比色架中。仪器准备为酶标仪。
结果判断：分定性判定和定量判定。
Tolvaptan 中文名：托伐普坦 分子式：C26H25ClN2O3 匀浆制作或抽提 Homogenate production or exaction
Toltrazuril 中文名：托曲珠利 分子式：C18H14F3N3O4S （皮肤骨骼肌肠肌肉等难匀特殊样品） (the skin and skeletal muscle and other hard uniform special sample)
Tolazoline 中文名：盐酸妥拉唑林 分子式：C10H13ClN2 超氧化物歧化酶（SOD）检测 Superoxide dismase (SOD) detection
Tokinolide B 中文名： 分子式：C24H28O4 二（MDA）检测 Malondialdehyde (MDA) detection
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小鼠神经丝蛋白elisa试剂盒 小鼠神经丝蛋白试剂盒 规格型号：96T/48T 小鼠神经丝蛋白试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠神经丝蛋白试剂盒、小鼠神经丝蛋白elisa试剂盒 保存条件：2-8℃ 保质期：6个月。 Iloperidone 中文名：伊潘立酮 分子式：C24H27FN2O4 度：98.0%
小鼠神经丝蛋白(NF)ELISAKit ELISA. 96T/48T Bis(phenylacetyl) disulfide 中文名：双(苯乙酰)二硫化物 分子式：C16H14O2S2 度：98.0%
小鼠神经生长因子elisa试剂盒 小鼠神经生长因子试剂盒 规格型号：96T/48T 小鼠神经生长因子试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠神经生长因子试剂盒、小鼠神经生长因子elisa试剂盒 保存条件：2-8℃ 保质期：6个月。 Iloperidone 中文名：伊潘立酮 分子式：C24H27FN2O4
小鼠神经生长因子(NGF)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装 Imatinib 152459-95-5 中文名：伊马替尼 分子式：C29H31N7O 度：98.0% 关键词：
小鼠神经生长因子(mouse NGF) 作用： ELISA 规格： 48T/96T 进口分装 Diclazuril 101831-37-2 中文名：地克珠利 分子式：C17H9Cl3N4O2
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豚鼠γ干扰素(IFN-γ)ELISA试剂盒 ，英文名： IFN-γ ELISA Kit 22-Dehydroclerosteryl acetate 28594-00-5 中文名： 分子式：C31H48O2 度：93.0% 关键词： 大叶桂樱; 豆甾烷; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库
豚鼠γ干扰素(IFN-γ)ELISAKit ELISA. 96T/48T Aminophenazone 58-15-1 中文名： 分子式：C13H17N3O
豚鼠γ干扰素(IFN-γ)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装 22-Dehydroclerosterol 中文名：22-去氢赤桐甾醇 分子式：C29H46O 度：94.0%
豚鼠α干扰素(IFN-α)ELISA试剂盒 ，英文名： IFN-α ELISA Kit 21-Deoxyneridienone B 924910-83-8 中文名： 分子式：C21H28O3 度：% 关键词： 孕甾烷; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库
ROX参比染料β-Sitosterol 83-46-5 中文名：β-谷甾醇 分子式：C29H50O Humanepidermalbasememembranezone,EBMZELISAKit 人抗表皮细胞基底膜抗体(EBMZ)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
Thevetin B 27127-79-3 中文名： 分子式：C42H66O18 HumanEamoebahistolyticaAigenELISA试剂盒人痢疾内阿米巴抗原ELISA试剂盒规格：96T/48T
6,7-Dihydroneridienone A 72959-46-7 中文名： 分子式：C21H28O3 组织PKCη激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)20次
Dregeoside A11 8
Stigmasta-4,22-diene-3β,6β-diol 167958-89-6 中文名： 分子式：C29H48O2 兔子基质金属蛋白酶5(MMP-5)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
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文献和实验相关实验
扩增曲线的分析攻略。 1、确认软件设置是否正确 对照试剂盒说明书，检查时间、温度、循环数、荧光采集等是否设置正确。有一个比较容易忽略的设置问题是，需要看下所选用的试剂中是否含有 ROX 来作为参比荧光染料。Applied Biosystems™ 系列荧光定量 PCR 仪器可以用 ROX 来作为参比荧光染料，用以校正仪器系统以外的物理误差，比如均一化校正由于移液误差或者蒸发导致的批内体积误差等。目前市面上有的的荧光定量 PCR 预混液是不含有 ROX 的，当用此类试剂的时候，应该将 ROX 参比
。G. 反应体系的设置：A-G这五个步骤简单设置好，可以保存，修改反应程序或者立刻进行反应。需要注意一点ABI仪器需要加ROX参比染料，默认的是ROX。有些公司是把ROX或者其他染料配制在MasteMix里面；也有的是单独分开。要根据不同公司的MasterMix进行这一个步骤的选择。BioTeke的MasterMix里没有参比染料，所以选择“none”。设置好之后，就可以把配置好的PCR管放进仪器，点击RUN！Real-time qPCR数据分析1. Real-time qPCR常见参数基线
修饰的 Taq DNA Polymerase，在温度低于 80 ℃ 时活性被完全封闭，只有 95 ℃ 加热至少 5 min 酶的活性才被释放。有效防止了在样品准备及反应升温阶段产生非特异扩增和引物二聚体。 ROX 的选取 ROX：一种不受 PCR 反应影响的参比染料，可校正单次反应运行中的信号误差、移液误差或蒸发所导致的体积差异，提供更连续一致的重复 Ct 值。 不同仪器 ROX 的选取参照卡，拿去～
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