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HotStart Bst 4.
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37
24 个月
上海西格
-20℃
100Tx25μl
描述:该制品为全体系冻干微球制品,包含了 HotStartBst4.2 DNA/RNA 聚合酶、Helicaser、dNTP、Mg2+、反应缓冲盐、红黄指示剂,单球扩增体系为 25ul。
Bst4.2 具有以下性能:
(1)Bst 4.2 全系包含热启动Aptamer,该配体确保酶在<30℃时,酶活封闭效率>95%,在>60℃时 1min 内完全释放酶活。该特性利于室温建立反应体系,并大幅降低了低温条件下的非特异扩增;
(2)反应温度提升到 70℃,大幅降低引物 Dimer 的形成,提高扩增特异性,并使得粗样品核酸释放更加充分;
(3)全系包含 Helicaser,因此,允许在不使用 F3/B3 引物的情况下进行 LAMP 扩增(easy LAMP),并允许 FIP/BIP 的引物用量降低一倍。这将进一步降低非特异扩增,并使得扩增均一性大幅提升。LAMP 在反应时,会大量的消耗 dNTP,其副产物会导致指示染料由红色变为黄色,通过肉眼即可判读结果。储存:-20℃干燥密封保存 24 个月;室温(25℃)密封保存 12 个月。避免受潮。特殊说明:(1) Bst4.2 DNA/RNA Polymerase 在用于 LAMP 扩增时的推荐反应温度为 65-70℃,最佳反应温度为 70℃。因此其可完全替代 的Bst4.0 系列,用于标准 LAMP的扩增。(2) 由于 Helicaser 的反应温度为 70℃,因此在进行eLAMP 扩增时,反应温度为 70℃。(3)制品中包含高浓度的盐组分,使用时做好个人防护,防止制品与皮肤、眼、鼻、呼吸道等接触和吸入,一旦接触或吸入,请用大量的清水冲洗。(4)防止气溶胶污染,尽可能进行分区操作。1. 标准 LAMP 和 eLAMP 扩增的区别本试剂既可以用于标准 LAMP 扩增,也可以用于 eLAMP扩增。1.1 10x 标准 LAMP Primer MixFIP/BIP=16 μM each; LF/LB=4 μM each; F3/B3=2 μM each1.2 10xeLAMP Primer MixFIP/BIP=8uM each; LF/LB=4 uM each注意:eLAMP(easy LAMP)为去除 F3/B3 引物的方法,为 Bst4.2 系列专用的使用策略,对于大多数引物组,在Helicaser 的加持下,扩增速度几乎不受影响。如引物扩效率低,可提高 FIP/BIP 浓度到 12~16 μM。1.3 扩增温度不同标准 LAMP 扩增 eLAMP 扩增65-70°C 均可 70°C 反应2. 配制 LAMP 反应体系HotStart Bst 4.2 Red Bead 1 个10x Primer Mix 2.5 μl模板 DNA/RNA X μlddH2O 到总体积 25 μl反应体系配好后,置于 65-70°C 反应 20~30min,反应完毕后观察颜色,红色为阴性,黄色为阳性扩增。
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