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文献和实验Phosphoamino acid analysis:Mark Kamps's method
or enough to submerge your piece of membrane. 3.Incubate in 110℃ oven for 60 min. 4.Microfuge sample full speed for at least 1 min. 5.Transfer supernatant to new tube and lyophilize on Speedivac.(It takes about 3 hr.) 6.Resuspend in H2O,and microfuge 5 min.Spotting
Collector,Pharmacia) (4)层析记录仪(Chart Recorder, Pharmacia) (5)层析柱(Hiprep 26/60 Sephacryl S-400 Size exclusion column, Pharmacia) 2、 试剂 层析缓冲液:20mM Tris(PH8.0);150mM NaCl (4 o C预冷) 【操作步骤】 (1)准备好足够量的层析缓冲液,按照操作程序接好层析装置,将进样口与出样
Kamps's Western Blotting Protocol
antibodies,we use 2 micrograms/ml.The origninal lab protocol called for a 2 hr incubation,but that seems unnecessary. 7)Wash the filter 2 x 5 min with rinsing buffer 1 x 5 min with NP40 buffer then 2 x 5 min with rinsing buffer. With anti-phosphotyrosine
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