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- 2025年07月14日
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文献和实验使用 Platinum® Taq DNA 聚合酶 (Platinum® Taq DNA Polymerase)，对靶序列进行定性验证
each) 1 µl Template DNA ≥ 1 µl (as required) Platinum® Taq DNA Polymerase 0.2 µl Autoclaved, distilled water to 50 µl 2. Mix contents of the tubes and overlay with 50 µl of mineral or silicone
的DNA，70°C温育5分钟，冰上冷却后，再加入20个单位的T4多聚核苷酸激酶，37°C温育30分钟。 怎样才能提高PCR产物平滑末端的连接效率? 载体应该去磷酸化以降低自身环化，插入片段的5"末端应具有磷酸基。其它提高连接效率的方法还有：降低ATP在连接反应缓冲液中的浓度，增加插入片段与载体的比例或使用快速连接试剂盒(NEB #M2200)。另外，可使用平端克隆试剂盒(NEB #E0103)。 VentR或Deep VentR DNA聚合酶产生平滑末端，可是我要
耐热DNA聚合酶常见问题(Thermpholic Polymerases FAQ)
4多聚核苷酸激酶，37°C温育30分钟。 怎样才能提高PCR产物平滑末端的连接效率? 载体应该去磷酸化以降低自身环化，插入片段的5'末端应具有磷酸基。其它提高连接效率的方法还有：降低ATP在连接反应缓冲液中的浓度，增加插入片段与载体的比例或使用快速连接试剂盒(NEB #M2200)。另外，可使用平端克隆试剂盒(NEB #E0103)。 VentR或Deep VentR DNA聚合酶产生平滑末端，可是我要用的克隆试剂盒是针对3'末端单个腺嘌呤碱基突出
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