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- 2025年07月06日
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- 文献和实验
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低温运输，-20℃保存
- 保质期：
1年
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大量
- 供应商：
信裕生物
- 规格：
1600 U
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文献和实验PCR(Polymerase Chain Reaction) 即聚合酶链式反应，对于常年狂奔在实验室的实验狗来说并不陌生。那么，对于 PCR 反应的核心成份，DNA 聚合酶，你选对了吗？ 常见的 DNA 聚合酶如 Taq、Phanta、Pfu、KOD、Primerstar、Klenow、Bst、Phi29 等等。根据耐热性来分可分为耐热酶和常温酶。耐热聚合酶如 Taq、Pfu、KOD、Primerstar 等，常温聚合酶包括 Klenow、Bst、Phi29 等。根据保真度来分，高保真聚合
注意的是，Illumina测序仪使用的桥式PCR与传统的桥式PCR有所不同，它会交替使用Bst 聚合酶 进行延伸反应以及使用甲酰胺（formamide）进行变性反应。这样，经过桥式PCR扩增之后，也会在固相载 体上形成一个个的模板“克隆”。一块芯片的8条独立“泳道”上每一条泳道都可以容纳数百万的模板“克 隆”，这样一次就可以同时对8个不同的文库进行测序。 经过上述PCR扩增步骤之后，所有的模板都被线性化处理（linearization）而形成单链模板，接着与测 序引物退火、杂交。随后使用修饰的DNA聚合酶和四
中的情况时，可以确定毗连序列群的顺序和方向，也可以估计插入间隙的大小。 通常要求从两个不同插入长度的文库中得到两批鸟枪法序列片段，典型的是2kb和lOkb的插入序列。这是小插入片段的随机性和克隆完整性与lOkb插入片段的过量重复和中间区域连接能力的折中办法。 在剪切之后，基因组DNA用激酶进行末端预处理，再用T4 DNA聚合酶处理，在1％低熔点琼脂糖中进行电泳，选择大小适当的片段。有一种用来改进基因组文库质量的方法，其基本方法是将BstⅪ接头连在剪切后的DNA上，接着对DNA进行凝胶
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