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- 详细信息
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- 英文名:
详见说明书
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55
- 细胞类型:
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- 物种来源:
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- 免疫类型:
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- 细胞形态:
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- 器官来源:
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- 运输方式:
常温/干冰运输
- 年限:
详见说明书
- 生长状态:
贴壁&悬浮
- 规格:
5×10^5
产品规格:5×10^5Cells/T25培养瓶
用途:用于科研实验。
产品资料:(点击获取)
公司经营的ELISA检测试剂盒种类齐全,可以检测:人、大鼠、小鼠、豚鼠、仓鼠、裸鼠、马铃薯、鹿、羊、鸡、鸭、鱼、兔子、猪、犬、猴、马、牛等动植物。
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人晶状体上皮细胞
注意事项:
1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现象发生请及时和我们联系。
2. 产品仅供科研先不开瓶盖,瓶身擦拭酒精后放在培养箱静置数小时(4h左右),稳定细胞状态,切忌在温箱内静置过夜。
3. 静置后镜检,拍照,记录细胞状态。建议传代后也拍照记录细胞生长情况。
4. 贴壁细胞:若细胞密度超过80%,可正常传代;若未超过80%,收集细胞瓶内的培养基,留8ml继续培养至80%左右再传代,瓶盖可稍微拧松。
5. 细胞瓶内的培养基含血清和双抗,可收集后4℃保存备用,可补加2%血清。刚开始传代时建议一半用细胞瓶内的培养基,一半用客户自备的培养基,使细胞逐渐适应培养条件,以免因不适应而造成生长状态不佳。
人晶状体上皮细胞
细胞的冻存方法:
1.细胞:选对数生长期细胞,收集细胞24小时前换液一次。
2.计数:按常规方法把细胞制成细胞悬液,计数,令细胞密度达5×106/ml,离心去上清,吸入离心管中。
3.冻存液:先用培养液9分+DMSO 1分(或甘油)配成10%的DMSO冻存液,按上法一滴滴加入离心管中,然后用吸管轻轻吹打令细胞重悬。
4.分装:分装入无菌安剖中,每安剖加1.5毫升细胞悬液。
5.封口:用塑料安剖时拧紧瓶口即可;如用火焰封闭安剖口后,仔细检查,定要封严,必要时可浸入蓝色液中观察,为安全起见,把安剖缝入纱布小袋中,以防液氮浸入后,融解时因受热发生爆炸伤人;纱袋一端系以线绳,末端扎有小牌,注明:细胞名称,冻存日期,以便日后查找。

一、细胞复苏的方法:
1.从液氮罐中取出安剖;有时因安剖未封严,浸入了液氮,取出后因安剖内液氮迅速气化而发生爆炸,因此应带有防护眼睛和手套。
2.迅速放入盛有36℃~37℃水的搪瓷罐中,扣上盖并不时摇动,尽快解冻。
3.剪开纱布口袋,取出安剖,用70%酒精擦拭消毒后,净化台上打开盖,用吸管吸出细胞悬液,装入离心管中,再补加10ml培养液,吹打使细胞悬浮。
4.低速离心(500~1000转/分)5分钟,取上清后再重复用培养液漂洗、离心。
5.加入培养液适当稀释后,再移装入培养瓶中,置温箱培养,次日更换一次培养液后再继续培养。
二、细胞处理:
1、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
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文献和实验培养: 在培养细胞基本融合形成单层时即需传代。否则细胞会因生存空间不足或由于细胞密度过大而致营养不足。按常规方法进行传代培养;
显著下降,转变成成纤维细胞形、三角形和长形。3、个人体会:晶状体上皮细胞位于晶状体前囊膜及赤道部囊膜下,单层排列,没有其他细胞成分,是绝对的单一细胞培养。但细胞数量少较难贴壁。所以采用先置于培养瓶待其贴壁后翻转浸入培养液。另外要注意将囊膜剪小,上皮面向下,操作时有点难度的。培养基没什么特别的,用小牛血清也可以,但生长较慢。一般把多个囊膜置于同一培养瓶加大组织密度,效果较好。个人认为最好不用酶消化法,因为本来细胞就很少了。
培养;48h后换液,更换2-3ml即可 ; 6. 贴块贴壁培养4-7d后,在镜下观察可见大量细胞爬出,用吸管将组织块吹下、去除,继续放置于37℃,5% CO2 培养箱中 ; 注意事项 : 1. 材料预处理时要注意小心,不要破坏晶状体结构,要注意晶状体前后,确保撕取的是前囊膜。 2. 将组织块贴于培养瓶中后,对于培养瓶的移动,翻转,加液等动作一定要轻柔,以免使组织块浮起。 3. 去除组织块的时机要选择好,去除过早,细胞数量太少,会使细胞生长速度变慢,去除时间太晚,会使部分
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