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- 2025年07月14日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名：
HLE-B3
- 库存：
80
- 供应商：
深圳子科生物科技有限公司
- 肿瘤类型：
详见说明书
- 细胞类型：
科研实验细胞
- 品系：
详见说明书
- 组织来源：
详见说明书
- 相关疾病：
详见说明书
- 物种来源：
人
- 免疫类型：
详见说明书
- 细胞形态：
详见说明书
- 是否是肿瘤细胞：
详见说明书
- 器官来源：
人
- 运输方式：
干冰或者冰袋发货
- 年限：
3年内
- 生长状态：
详见说明书
- 规格：
冻存管；T25培养瓶
复苏步骤：
①冻存管从液氮或-80℃冰箱中取出放入PE手套中，迅速没入37℃水浴锅，摇晃冻存管加速溶解，以1min内全部溶解为宜；
②在超净台中将溶解好的细胞液加入到装有9mL完全培养基的离心管内，1000-1200rpm离心5min，弃去上清液，用1-2mL完全培养基重悬细胞。
③将细胞悬液加入到含有5-6mL完全培养基的T25瓶中，放入培养箱培养。
细胞传代：
①将旧培养液吸除，PBS清洗两遍后，加入1-2mL胰酶（0.25%Trypsin+0.02%EDTA）；
②镜下观察消化情况，在细胞边缘缩小，贴壁松动时（可用吸管吸起些许胰酶轻轻吹打细胞层某处，肉眼可见细胞层脱落，即消化完成，否则继续消化），直接吸掉胰酶，加入5-6mL完全培养基，轻轻吹打细胞层，把细胞层吹落，吹散。
③将细胞悬液按1:2比例分到新的T25瓶中，添加适当的完全培养基，把细胞悬液打匀，于培养箱中培养。；
④注意培养基pH值变化和细胞密度，定期换液（每周2-3次），待细胞密度达到80%-90%时，重复传代操作或者冻存。
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文献和实验培养： 在培养细胞基本融合形成单层时即需传代。否则细胞会因生存空间不足或由于细胞密度过大而致营养不足。按常规方法进行传代培养；
显著下降,转变成成纤维细胞形、三角形和长形。3、个人体会：晶状体上皮细胞位于晶状体前囊膜及赤道部囊膜下，单层排列，没有其他细胞成分，是绝对的单一细胞培养。但细胞数量少较难贴壁。所以采用先置于培养瓶待其贴壁后翻转浸入培养液。另外要注意将囊膜剪小，上皮面向下，操作时有点难度的。培养基没什么特别的，用小牛血清也可以，但生长较慢。一般把多个囊膜置于同一培养瓶加大组织密度，效果较好。个人认为最好不用酶消化法，因为本来细胞就很少了。
培养；48h后换液，更换2-3ml即可 ； 6. 贴块贴壁培养4-7d后，在镜下观察可见大量细胞爬出，用吸管将组织块吹下、去除，继续放置于37℃，5% CO2 培养箱中 ； 注意事项 ： 1. 材料预处理时要注意小心，不要破坏晶状体结构，要注意晶状体前后，确保撕取的是前囊膜。 2. 将组织块贴于培养瓶中后，对于培养瓶的移动，翻转，加液等动作一定要轻柔，以免使组织块浮起。 3. 去除组织块的时机要选择好，去除过早，细胞数量太少，会使细胞生长速度变慢，去除时间太晚，会使部分
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