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Affi�Gel 和Affi�Prep Protein A 介质
Affi�Gel 和Affi�Prep Protein A 层析介质,可用于:获得高纯度的免疫球蛋白(IgG),或其它免疫球蛋白分析前 选择性地去除IgG,或吸附免疫复合体以纯化抗原。其中的Protein A 可与免疫球蛋白,尤其哺乳类动物IgG 的Fc 链结合。功能优势包括:
- 高纯度的IgGS
- 与哺乳类动物IgG 高亲和性
- 使用MAPS 优化缓冲液,对小鼠IgG 、及其它亚类具有很高的载量
同时,Affi�Prep 介质还体现了高线性流速最大可达2,000 cm/hr,压力稳定最大为1000 psi ( 70 bar ) 以及可用0.1 M NaOH 清洗的高化学稳定等性能。
含有Affi�Gel、Affi�Prep Protein A 介质和MAPS II 缓冲液的凝胶,每毫升可纯化10 mg IgG1 ,比标准方法高出8� 10 倍。另外,MAPS 处理中加入Affi�Gel Protein A,与小鼠IgG1 的结合比固定G 蛋白介质要好。
| 免疫球蛋白 |
Affi�Gel Protein A 载量 (mg/ml) |
Affi�Prep Protein A 载量 (mg/ml) |
| 小鼠IgG1 | 6�10 | 7�9 |
| 小鼠IgG2a | 6�10 | 7�9 |
| 小鼠IgG2b | 6�10 | 7�9 |
| 小鼠IgG3 | 6�10 | 7�9 |
| 小鼠IgM* | 6�10 | 7�9 |
| 人IgG | 15 | 10�12 |
| 绵羊IgG | 8�10 | 7�9 |
| 牛IgG | 8�10 | 7�9 |
| 马IgG | 8�10 | 7�9 |
| 山羊IgG | 8�10 | 7�9 |
| 兔IgG | 8�10 | 7�9 |
| 狗IgG | 8�10 | 7�9 |
| 猪IgG | 8�10 | 7�9 |
Affi�Gel 蓝胶
Affi�Gel 蓝胶是一种带有共价结合Cibacron Blue F3GA 染料的交联琼脂糖 微球体。在很多应用中,Affi�Gel 蓝胶作为离子、疏水、芳香或空间活性的结合 位点,是去除白蛋白(50�100 目)及酶纯化(100�200 目)的理想选择。通过 调节洗脱液的组成,可对高特异性蛋白和多肽进行结合和释放。
更多信息,请索取资料# 1107。
DEAE Affi�Gel 蓝胶
DEAE Affi�Gel 蓝胶是一种双功能亲和凝胶。与 DEAE Bio�Gel A 相同,含有共价结合的Cibacron blue F3GA 染料,该染料可结合白蛋白、蛋白酶和其它补体蛋白。 DEAE 基团可结合其余的酸性蛋白。DEAE Affi�Gel 蓝胶特性包括:
- 一步纯化血清中IgG; IgG 洗脱液中含有少量转铁蛋白(样品大约稀释5 倍)
- IgG 洗脱液中无蛋白水解活性
- Protein A 亲和层析经济的替代品
CM Affi�Gel 蓝胶
CM Affi�Gel 蓝胶与CM Bio�Gel A 相同,含有共价结合的Cibacron 蓝F3GA 染料。这种双功能凝胶能同时 结合白蛋白和血清蛋白酶。CM Affi�Gel 蓝胶为血清蛋白纯化起始步骤提供了一条方便的途径。CM Affi�Gel 蓝胶 特性包括:
- 快速去除血清样品中90% 以上的白蛋白和所有血纤维蛋白溶酶原
- 无需预先制备样品
- 80% 以上稳定抗血清产量,无白蛋白和蛋白酶活性
Affi�Gel 肝素凝胶
Affi�Gel 肝素凝胶是一种即用型载体,用于多种蛋白如凝结因子、其它胞浆蛋白、多核苷酸聚合酶、核酸酶、脂 酶、脂蛋白和蛋白酶等的纯化。肝素通过离子作用或其它特异性酶�抑制剂(或酶�激活剂)相互作用来结合多种酶和 其它蛋白。Affi�Gel 肝素凝胶特性包括:
- 肝素含量> 0.6 mg/ml
- 人抗凝血酶III 载量> 1.2mg/ml
- 线性流速10�20 cm/hr
Affi�Prep 多粘菌素载体
Affi�Prep 多粘菌素载体是由每毫升巨孔多聚Affi�Prep 介质含2�4 mg USP 级的Affi�Prep 多粘菌素组成的。Affi� Prep 多粘菌素载体可结合来自许多革兰氏阴性菌株的内毒素,如E. coli!, Salmonella abortus, Salmonella minnesota, 和Serratia marcescens 等。Affi�Prep 多粘菌素载体特性包括:
- 在研究级和工业级应用中,去除内毒素
- 线性流速达2,000cm/hr
- 1,000 psi ( 70 bar )压力稳定
- 高化学稳定性(耐0.1 M NaOH 消毒)
Affi�Gel 硼胶
Affi�Gel 硼化聚丙烯酰胺凝胶对邻�顺式羟基(coplanar afjacent cis�hydroxyl)具有 亲和力和高载量,可高效分离核苷酸、核苷、儿茶酚胺和糖类等小分子化合物。它具 有的山梨糖醇载量为130 μmol/ml。
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文献和实验Procedure: (This protocol uses anti-XKCM1 for immunodepletion.) Put 25 ul of Bio-Rad Affi Prep bead slurry into two 0.5 ml tubes labeled IgG and XKCM1. Wash beads 3X with 0.5 ml TBST
血清Western Blot去除白蛋白(Albumin)和IgG
。 高容量的染料结合树脂(10-20 mg 蛋白/ml 树脂)可瞬间结合并去除样品中的白蛋白,样品来源包括人、猪、绵羊、狗、兔、大鼠和牛。 试剂盒也可用于其他物种,有25 或50 次样品处理两种包装。 特点: Ø 10min 之内去除样品中的白蛋白 Ø 用CibachronTM蓝色染料结合白蛋白 Ø 每柱容量> 2 mg 人白蛋白
冻存于-20°C.样品采用蛋白酶K处理可使相邻肽段剪切成羧基团的芳香族氨基酸和脂肪族氨基酸。蛋白质和DNA之间的交联通过DNA的纯化被打断。3检测DNA浓度,取5ul纯化的DNA到995ulTE中得到一个原溶液的200倍稀释测其OD260。那么DNA的浓度就为OD260x10,000.μg/ml。这样就可计算出染色质制品的DNA浓度。4 免疫共沉淀1 从2.2得来的染色质制品,推荐每个IP样品都采用25ug的DNA的量。每个样品按1:10的量加入RIPA溶液。需要一个样本作为空珠子的对照。2在除空
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