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百泰派克
- 服务名称:
蛋白质水解服务
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自然界中发现的蛋白质大小从5 kDa到400 kDa不等。蛋白质水解过程将蛋白质切成较短片段,即肽肽段,蛋白质水解是肽质谱鉴定分析之前至关重要的一步,是蛋白质鉴定和表征、生物标记物的发现成功进行的基础。尽管质谱可以研究完整的蛋白质,但是较小的肽更容易进行蛋白质鉴定。且可提高蛋白质的覆盖率,因为蛋白质覆盖率由于溶解性和异质性可能会降低。因此,最常见的蛋白质组学方法往往会利用位点特异性酶切位点来产生较小的多肽片段。质量较小的肽段更容易通过高效液相色谱(HPLC)和HLPC偶联质谱进行分离和表征。

BTP-蛋白质水解服务
百泰派克生物科技提供两种水解蛋白质的方法:(1)凝胶内水解(PAGE基质中的蛋白质水解);(2)溶液内水解(蛋白质在氯仿/甲醇中沉淀,然后在尿素中再溶解后进行)。通过一维或二维凝胶电泳分离的蛋白质,可直接在凝胶内进行水解,凝胶内水解,有效且可重现好,但比较费力费时。相较于凝胶内水解,溶液内水解方法更省力,所需的时间较少,但溶液内水解的蛋白,蛋白的再溶解度低,可能会导致一定的样品损失。
蛋白质水解的流程
百泰派克生物科技可同时提供凝胶内水解和溶液内水解两种蛋白质水解相关服务。蛋白质水解的工作流程包括:
1. 制备裂解液;
2. 溶液内或凝胶内进行酶切;
3. 使用离液剂(如尿素和胍)使蛋白质变性;
4. 使用DTT还原二硫键;
5. 使用iodoacetic acid或iodoacetamide将半胱氨酸烷基化;
6. 去除试剂和交换缓冲液;
7. 在适当的pH和温度下,用胰蛋白酶或其他蛋白酶在碳酸氢铵缓冲液中过夜变性约18小时;
8. 加入酸类物质终止酶切。
9. 蛋白质富集/清洗。

样品要求
百泰派克生物科技可处理各种类型的样本,包括但不限于:
天然来源的蛋白质;
重组来源的融合蛋白和标记蛋白;
不同亚型的抗体;
膜蛋白及其他。
蛋白质酶切的优点
• 灵活性:我们提供凝胶内和溶液内水解两种蛋白质水解策略;
• 高准确性和覆盖范围:我们的水解服务可以大大提高质谱分析的准确性和覆盖范围。
• 应用广泛:可促进蛋白质的鉴定和表征,发现疾病的生物标志物,并有助于理解生物学过程。
• 完整的蛋白质组学服务:我们提供完整的蛋白质组学服务,涵盖蛋白质组学分析的整个过程,可对水解后的样品进行分析测定,一站式为您解决组学问题。
百泰派克生物科技还提供高通量自动化蛋白质水解服务,欢迎咨询。
北京百泰派克生物科技有限公司(Beijing Biotech Pack Scientific Co., Ltd. 简称BTP)从事蛋白质和小分子代谢物的理化性质分析及结构解析等相关分析服务,业务范围主要围绕蛋白和小分子代谢物检测两大板块,为客户提供优质的蛋白组学,多肽组学,代谢组学,多组学及生物制药分析服务。提供包括蛋白鉴定、定量蛋白组(iTRAQ/TMT、label free、DIA/SWATCH)、PRM靶蛋白定量、蛋白和抗体测序、蛋白修饰(二硫键、糖基化、磷酸化、乙酰化、泛素化等)、多肽组学、整合组学,靶向和非靶向代谢物检测。
| 蛋白分析 | 蛋白质组学 | 代谢组学 | 多组学整合分析 | 生物制药分析 |
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蛋白鉴定
分子量测定
肽质量指纹图谱分析
膜蛋白鉴定服务
蛋白质质谱鉴定
Pull-down靶蛋白质谱鉴定
Shotgun鸟枪法蛋白质鉴定
序列分析
蛋白测序
蛋白质N/C端测序
蛋白全序列测定
多肽测序
抗体测序
单克隆抗体从头测序
蛋白从头测序和突变分析
多肽从头测序
基于埃德曼降解的蛋白质N端测序
蛋白质相互作用分析
蛋白质相互作用质谱分析
CO-IP免疫共沉淀法
GST pull-down
SILAC与免疫共沉淀质谱联用
交联法蛋白相互作用分析
Far-Western Blot分析
标记转移法蛋白相互作用分析
蛋白质结构鉴定
蛋白质圆二色谱分析
蛋白质一级结构的测定
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定量蛋白质组学
Label Free
iTRAQ, TMT, SILAC
DIA定量蛋白质组学
半定量蛋白质组学
2D-DIGE定量蛋白质组学
SWATH定量蛋白组学
靶向蛋白质组学
MRM/PRM定量蛋白组学
绝对定量分析(AQUA)
多肽组学
肽纯度分析
多肽质谱鉴定
多肽生物标志物鉴定
翻译后修饰蛋白组学
磷酸化定量蛋白组学研究
糖基化定量蛋白组学研究
乙酰化定量蛋白组研究
泛素化定量蛋白组学研究
蛋白二硫键鉴定和定量分析
组蛋白翻译后修饰分析
S-亚硝基化分析
甲基化定量蛋白组学研究
酰化定量蛋白质组研究
蛋白质SUMO化鉴定
基于Top down自上而下法的PTMs表征
4D蛋白质组学
糖蛋白组学
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非靶向代谢组学
靶向代谢组学
氨基酸及其衍生物
糖类及糖代谢
肉碱和酰基肉碱类
植物激素
胆汁酸
维生素与辅酶
动物激素
脂肪酸及脂肪酸代谢
ATP代谢相关物质分析
NAD代谢相关物质分析
白藜芦醇
木酚素
多酚
黄酮
生物胺
有机酸
类胡萝卜素
氧化型胆固醇
核苷酸及相关物质分析
短链脂肪酸
脂质代谢组学
脂质组学MALDI成像服务
离子组学
未知代谢物鉴定
外源性代谢物分析
代谢通量分析
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脂质组学+蛋白质组学
转录组学+代谢组学
转录组学+蛋白质组学
转录组学+脂质组学
蛋白质组学+代谢组学
翻译后修饰蛋白质组+代谢组
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非变性质谱分析(Native MS)
SDS-PAGE蛋白质纯度分析
蛋白质纯度分析(分子筛/反相色谱)
宿主蛋白残留(HCP)分析
抗体偶联药物(ADCs)分析
生物药糖谱检测
生物药糖基化位点检测
生物药二硫键/游离半胱氨酸检测
抗体C端K缺失比例分析
高分辨质谱分子量鉴定
MALDI TOF分子量分析
生物制药N端测序
生物制药N/C端测序
肽段覆盖率/肽谱图分析
蛋白质肽谱图测定
生物药氨基酸组成分析
氢氘交换质谱HDX MS
蛋白质等电点测定
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检测分析平台:高分辨率质谱仪、高效液相色谱、气相色谱、NMR;
蛋白质组分析平台:Label-free、iTRAQ/TMT、SILAC、SWATH、MRM;蛋白质定性定量鉴定、蛋白质差异分析等;
代谢组分析平台:靶向代谢组学、非靶向代谢组学、脂质组学分析;通量达1000种代谢分子、代谢通路分析、代谢靶标鉴定。
蛋白质从头测序平台:Obitrap Fusion Lumos质谱仪、PEAKS软件分析;100%序列测定,精准蛋白、多肽、抗体从头序列分析。
生物制药分析平台:生物药物鉴定、变异性分析、纯度分析。
生物信息学分析:蛋白质组学生物信息学分析、代谢组学生物信息学分析。

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文献和实验实验四十 大分子物质的水解试验 一、目的要求 证明不同的微生物对复杂有机大分子的水解能力不同,从而说明不同的微生物有不同的酶系统。 二、基本原理 细菌对大分子的淀粉、蛋白质和脂肪不能直接利用,必须靠产生的胞外酶,如淀粉酶、蛋白酶和脂肪酶将大分子物质分解。胞外酶能分泌扩散到细胞外,将物质分解成小单位如糖、氨基酸、甘油与脂肪酸。这些小单位的物质能被细菌吸收和利用。水解过程可通过底物的变化
在水溶液中,有些盐类的离子跟水电离出来的H 或OH - 结合,生成弱电解质,使溶液呈现碱性或酸性,这种现象叫做盐的水解。盐类水解的原因是盐的组成中含有弱酸的酸根离子或弱碱的金属离子。当这些离子遇到水里的H 或OH - 结合生成弱酸或弱碱时,会破坏水的电离平衡,使溶液呈现碱性或酸性。强酸强碱盐不发生水解。盐类水解的程度主要取决于盐类本身的性质,它的弱酸或弱碱性越弱,盐类水解程度越大。水解平衡跟电离平衡相似,也随温度和浓度的变化而移动。水解反应是中和反应的逆反
催化水解反应的酶之总称。是酶分类中的一大类。反应式以 A-B H2 O—→ AOH BH表示。根据被分解的键或化合物的种类进行分类。 1.酯键:酯酶: 2.糖苷化合物:糖苷酶,如淀粉酶、核苷酶; 3.醚键:硫醚键与醚键; 4.肽键:包括肽酶、蛋白酶; 5.肽键以外的 C- N键:如酰胺酶; 6.酸酐:如 ATP酶、焦磷酸酶; 7. C- C键; 8.卤化物; 9. P- N键; 10. N- S键; 11. C- P键。(数字为酶编号的第 2位数字)。水解酶一般不含辅酶。反应










