家兔肌肉来源细胞

细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
 

 
订购信息：
 

产品名称	家兔肌肉来源细胞
生长特性	贴壁生长
货号	XG-X18299

细胞名称    家兔肌肉来源细胞
形态特性  成纤维细胞样
生长特性 贴壁生长
特征特性  该细胞系来源于一只出生三天的雌性家兔的骨骼肌组织。由中科院昆明细胞库于2014年建立。
培养条件  DMEM-H: Dulbecco＇s Modified Eagle＇s Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  10%FBS
传代方法  1:2传代；3-4天一次
传代情况 P3
冻存条件  基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 荧光法（-）
STR  -
同工酶     
染色体      　
使用权限     A类
细胞的种类：
产品仅用于科研第一种：
是冻存产品，由液氮直接拿出，干冰运输给客户。一般不推荐这种，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行，还是复苏没操作好；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，也不是细胞储存的zui好方式，快递时间也很难控制，多种因素影响产品的质量；干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种：
是我们复苏好细胞，QC通过后，T-25灌满培养基常温运输给客户，排除复苏造成影响，常温运输也对细胞影响也不大，只需加25元运费(顺丰)。
质量保证：我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作，不同的实验室采用的方法略有差异，但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
细胞处理：
1）复苏细胞产品名称：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM，常温条件下离心5分钟，少量保存上清液（防止细胞吸走），加入部分新鲜培养基，吹打均匀后，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO摇匀后进行冻存。冻存培养基
冻存细胞时必须使用推荐的冻存培养基。冻存培养基中应含有 DMSO 或者甘油等冷冻保护剂。还可使用专门配制的完全冻存培养基。
1）细胞冻存培养基是一种用于哺乳动物细胞的即用型完全冻存培养基，其所含胎牛血清和牛血清比例经过优化，可改善细胞活力以及解冻后的细胞复苏效果。 
2）冻存培养基是一种化学成分确定的、无蛋白、无菌冻存培养基，含10% DMSO，适用于多种干细胞和原代细胞 (黑色素细胞除外) 的冻存。
杂交瘤(B类);Z1510A2G6A2C7阿奇霉素-d3Azithromycin-d3质量规格：美国进口
TIMP1 Others Human 人 TIMP-1 / TIMP1 人细胞裂解液 (阳性对照) Δ6,7-巴卡丁 IIIΔ6,7-Baccatin III质量规格：美国进口
二氢叶酸还原酶缺陷型中国仓鼠卵巢细胞;CHO/dhFr-(R)-奥美拉唑钠盐(R)-Omeprazole  Salt质量规格：美国进口
人肝星形细胞 (HHSteC)( 5×105 )4-去甲氧基-4-氯代奥美拉唑硫化物4-Desmethoxy-4-chloro Omeprazole Sulfide质量规格：美国进口
CL-0043C127(小鼠癌细胞)5×106cells/瓶×24-去甲氧基-4-氯代奥美拉唑4-Desmethoxy-4-chloro Omeprazole质量规格：美国进口
IL17A Protein Canine 重组狗 IL17 / IL17A 蛋白奥氮平质量规格：>99%,USP,BR,可用于细胞培养Olanzapine
人神经细胞(HN) (10×106 ) 小鼠骨髓间充质干细胞(EGFP标记) MGC80-3(MGC-803)人胃癌细胞奥氮平（标准品）质量规格：HPLC>98%,标准品Olanzapine
CM-R001大鼠肺微血管内皮细胞完全培养基100mL美伐他汀,康百汀质量规格：>97%,BR,可用于细胞培养Mevastatin
SELL Others Cynomolgus 食蟹猴 CD62L / L-Selectin / SELL 人细胞裂解液 (阳性对照) 美伐他汀(标准品)质量规格：>95%,标准品，用于含量测定Mevastatin
人心脏微血管内皮细胞HCMEC6-氨基青霉烷酸质量规格：>98%,BR6-Aminopenicillanic acid
EB病毒转化的人B细胞;KMY0901 人真皮上皮细胞完全培养基 100mL富马酸氯马斯汀（标准品）质量规格：HPLC含量测定Clemastine fumarate
髓核细胞培养基NPCM富马酸氯马斯汀质量规格：>98%,BRClemastine fumarate
CST1 Others Human 人 CST1 / Cystatin-1 / Cystatin-SN 人细胞裂解液 (阳性对照) 富马酸酮替芬（标准品）质量规格：含量测定Ketotifen fumarate
GPH4 豚鼠心肌来源细胞己内酰胺（标准品）质量规格：供检查用2-Oxohexamethylenimine
CM-M014小鼠气管和支气管上皮细胞完全培养基100mL百蕊草素I；山柰酚-3-葡萄糖鼠李糖苷；阿福豆苷(标准品）质量规格：HPLC≥98%，标准品Kaempferol-3-O-glucorhamnoside
家兔肌肉来源细胞CDH18 Others Cynomolgus 食蟹猴 CDH18 / Cadherin-18 人细胞裂解液 (阳性对照) 2′5′-ADP琼脂糖凝胶4B5KU
人前脂肪细胞-内脏HPA-v四乙二醇二对磺... Tetraethylene Glycol Di-p-tosylate,97% 37860-51-8 10G 通用试剂
NCI-H1869[H1869]细胞，人肺癌细胞 人膀胱癌细胞,BIU-87细胞 人肝脏间充质干细胞HMSC-hp乳糖醇 Lcctitol 8102/4/9
水貂肺上皮细胞;Mv.1.Lu(NBL-7)AmberliteXAD4离子交换大孔吸附树脂100毫克
IgG1 Others Mouse 小鼠 IgG1-Fc 人细胞裂解液 (阳性对照) 1Cantharidin;Cantharides caMphor;Cantharidic acid anhydride;Lactone of cantharidic acid;Hexaxy7no3α,7α-dimetxyl-4,7-epoxyisobenzofuran-1,3-dione
注意事项：
1.接收到细胞，肉眼观察细胞培养基颜色
，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收到时的培养瓶拍一张照片，显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张）。
2.用75%的酒精消毒（建议配置75%的酒精的水是灭菌过的）。
3.严格无菌操作，打开细胞培养瓶。
4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管完全吸出（严禁直接倾倒），放入另一无菌容器中（建议换新的培养基培养细胞）。
5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆，轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落，加入终止液终止。
6.1000rpm，5min离心，重悬细胞。
7.换新的细胞培养瓶，37℃，5%CO2培养。