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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
低温冷藏
- 保质期:
详见说明书
- 英文名:
Lamp kit for infectious pustular dermatitis virus
- 库存:
100
- 供应商:
上海莼试
- 规格:
50T
需要自备的器材:
1.仪器:分析天平、离心机、荧光 PCR 扩增仪、组织研磨器、-20 ℃冰箱、可调移液器(2 µL、20 µL、200 µL、1000 µL)。
2.耗材:荧光 PCR 专用反应管、眼科剪、眼科镊、生理盐水、1.5 mL 经焦碳酸二乙酯(DEPC)水 处理的灭菌离心管、吸头(10 µL、200 µL、1000 µL)、灭菌双蒸水。
特点:
1.即开即用,用户只需要提供样品 DNA 模板,操作简单,定量准确快速。
2. 引物经过优化,特异性强。预期的 PCR 产物长度为 560 bp。
3. PCR mix 中含上样染料,PCR 后可以直接上样电泳。
4. 提供阳性对照,便于分析试验结果。
储存条件:
14℃或-20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
CCR9 细胞表面趋化因子受体9抗体
CXCR5 细胞表面趋化因子受体5抗体
Cystatin C 胱抑素C/半胱氨酸蛋白酶抑制剂C抗体
c-phycocyanin C-藻蓝素/藻蓝蛋白/藻青蛋白抗体
CYP1A1/AHRR 细胞色素P450 1A1抗体
CK II alpha 丝/苏氨酸蛋白质激酶II α抗体
C2orf66 2号染色体开放阅读框66抗体
Cullin CULLIN抗体
calf thymus DNA 小牛胸腺DNA抗体
C1orf226 1号染色体开放阅读框226抗体
传染性脓疱皮炎病毒LAMP试剂盒Cathepsin L 组织蛋白酶L抗体
CK II beta 丝/苏氨酸蛋白激酶II β抗体(casein kinase IIβ)
CK18 细胞角蛋白18抗体
CD109 转化生长因子β1结合蛋白抗体
C22orf45 22号染色体开放阅读框45抗体
C22orf32 22号染色体开放阅读框32抗体
CD5L CD5L抗体
CD6 CD6抗体
CD9 CD9蛋白抗体
CD23 CD23/FcεRII抗体
CD27 CD27抗体
CD30 CD30抗体
CD43 CD43抗体
CD48 CD48抗体
CD44 CD44抗体
CD11c 整合素αX抗体
CCR5/CD195 细胞表面趋化因子受体5抗体
CD2 CD2抗体
C Peptide C-肽抗体
Calretinin 钙结合蛋白抗体
CRP C-反应蛋白抗体
CRP(C11F2) C-反应蛋白单克隆抗体
CREB-1 环腺苷酸应答元件结合蛋白抗体
CRF 促肾上腺皮质激素释放因子抗体
CRF 促肾上腺皮质激素释放因子抗体
C5orf54 5号染色体开放阅读框54抗体
CD93 CD93抗体
CCL6 嗜酸粒细胞趋化蛋白CCL6抗体
C6orf81 6号染色体开放阅读框81抗体
CCL4 巨噬细胞炎性蛋白1β抗体
CD158 NK细胞抑制性受体2DL4抗体
CD158i NK细胞抑制性受体2DS4抗体
CD158e NK细胞抑制性受体3DL1抗体
C7orf46 7号染色体开放阅读框46抗体
CIP2A 蛋白磷酸酶PP2A癌抑制蛋白抗体
Mannose Receptor 巨噬细胞甘露糖受体CD206抗体
C-REL 淋巴细胞衍生C-型凝集素抗体
C5orf60 5号染色体开放阅读框60抗体
CD44v5 CD44V5抗体
C22orf23 22号染色体开放阅读框23抗体
Cytokeratin 19 细胞角蛋白19抗体
C1orf147 1号染色体开放阅读框147抗体
CYP21 胆固醇21-羟化酶抗体
CRIPTO 畸胎瘤衍化生长因子抗体(C端)
C1QL3 补体C1qL3链多肽抗体
CT27 肿瘤/睾丸抗原27抗体(高迁移率族蛋白)
C1orf228 1号染色体开放阅读框228抗体
Carbonic anhydrase 3 酶3抗体
CYPA 亲环蛋白(亲环素)PPIA抗体
Calreticulin 钙网蛋白抗体
Cancer testis antigen 65 肿瘤/睾丸抗原65
检测步骤:
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振荡混匀后,10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
(1) 计算好各试剂的使用量,加入一适当体积洁净离心管中,充分混匀,10000rpm离心10s,向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液,向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团:设置为FAM。淬灭基团:NONE,请勿选择ROX参比荧光。
注意事项:
①加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照鸡血红蛋白(HB)ELISA检测试剂盒说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
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组织WHO、各国学者和相关政府部门的关注,短短几年,该技术已成功地应用于SARS、禽流感、HIV等疾病的检测中,在这次甲型H1N1流感事件中,日本荣研化学公司接受WHO的邀请进行H1N1 LAMP试剂盒的研制。通过荣研公司近十年的推广,LAMP技术已广泛应用于日本国内各种病毒、细菌、寄生虫等引起的疾病检测、食品化妆品安全检查及进出口快速诊断中,并得到了欧美国家的认同。LAMP方法的优势除了高特异性、高灵敏度外,操作十分简单,对仪器设备要求低,一台水浴锅或恒温箱就能实现反应,结果的检测也很简单,不需要像PCR
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