嗜人锥蝇LAMP试剂盒

嗜人锥蝇LAMP试剂盒产品规格：50T
产品运输：低温运输
产品保存：-20℃保存
产品有效期：一年
产品特点：
本产品就是根据保守区设计引物而开发的高灵敏 PCR检测试剂盒 。

phospho-CSK (Ser364)    磷酸化酪氨酸激酶C-SRC抗体
CSNK1A1L    酪蛋白激酶1/casein kinase Iα抗体
CSP    半胱氨酸延伸蛋白α抗体
CSPS    磺基转移酶CSPS抗体
CSRP2    富含半胱氨酸蛋白2抗体
CRTAC1    软骨酸性蛋白1抗体
CSRP2BP    富含半胱氨酸蛋白结合蛋白抗体
CRTC3    CREB调节转录激活因子3抗体
CRTAP    软骨相关蛋白CRTAP抗体
C1orf100    1号染色体开放阅读框100抗体
C1orf104    1号染色体开放阅读框104抗体
C1orf112    1号染色体开放阅读框112抗体
C1orf113    1号染色体开放阅读框113抗体
C1orf114     1号染色体开放阅读框114抗体
C1orf109    1号染色体开放阅读框109抗体
CD93    CD93抗体
C1orf110     1号染色体开放阅读框110抗体
C1ORF111     1号染色体开放阅读框111抗体
C1orf106    1号染色体开放阅读框106抗体
CYP11A1    细胞色素P450 11A1抗体
phospho-CXCR4 (Ser339)    磷酸化细胞表面趋化因子受体4抗体
phospho-CXCR2 (Ser347)    磷酸化细胞表面趋化因子受体2抗体
CEP104    中心体蛋白104抗体
CEPT1    胆碱/磷酸转移酶1抗体
C6orf163    6号染色体开放阅读框163抗体
C6orf165    6号染色体开放阅读框165抗体
C6orf168    6号染色体开放阅读框168抗体
C6ORF173    6号染色体开放阅读框173抗体
C6ORF182    6号染色体开放阅读框182抗体
C6orf186     6号染色体开放阅读框186抗体
C6orf191    6号染色体开放阅读框191抗体
C6orf195     6号染色体开放阅读框195抗体
C6ORF199    6号染色体开放阅读框199抗体
C7orf34    7号染色体开放阅读框34抗体
C6orf201    6号染色体开放阅读框201抗体
C6orf203     6号染色体开放阅读框203抗体
C6orf204     6号染色体开放阅读框204抗体
C6orf206    6号染色体开放阅读框206抗体
C6orf211    6号染色体开放阅读框211抗体
C6orf225    6号染色体开放阅读框225抗体
C6orf25    6号染色体开放阅读框25抗体
C6orf35    6号染色体开放阅读框35抗体
C6orf52    6号染色体开放阅读框52抗体
C6orf57    6号染色体开放阅读框57抗体
C6orf58    6号染色体开放阅读框58抗体
C6orf62    6号染色体开放阅读框62抗体
C6orf70    6号染色体开放阅读框70抗体
C6orf72    6号染色体开放阅读框72抗体
C7orf13    7号染色体开放阅读框13抗体
C7ORF29     7号染色体开放阅读框29抗体
C8orf72    8号染色体开放阅读框72抗体
C7orf30    7号染色体开放阅读框30抗体
C7orf57    7号染色体开放阅读框57抗体
C7orf36     7号染色体开放阅读框36抗体
C7orf42    7号染色体开放阅读框42抗体
C7ORF43    7号染色体开放阅读框43抗体
C7orf44    7号染色体开放阅读框44抗体
C8orf40    8号染色体开放阅读框40抗体
C8orf37    8号染色体开放阅读框37抗体
C8orf45    8号染色体开放阅读框45抗体
C8orf80    8号染色体开放阅读框80抗体
C9orf3    9号染色体开放阅读框3抗体
C8orf47    8号染色体开放阅读框47抗体
C8orf48    8号染色体开放阅读框48抗体
C8orf58    8号染色体开放阅读框58抗体
C8orf74    8号染色体开放阅读框74抗体
产品特点：
1. 使用化学修饰的热启动聚合酶，反应特异性高，*程度地避免了非特异扩增；
2. 反应缓冲液经充分优化，反应灵敏快速，40个循环只需20多分钟；
3. 抗干扰能力强，反应重复性高，适合对土壤、粪便、肿瘤和血液来源的复杂样本中的靶基因进行检测分析。 在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，zui后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。
 特异性荧光标记：
 TaqMan法
 TaqMan探针的特性：
（1）5′端标记有报告基团（Reporter, R），如FAM、VIC等
（2）3′端标记有荧光淬灭基团 （Quencher, Q）
（3）探针完整，R所发射的荧光能量被Q基团吸收 ，无荧光， R与Q分开，发荧光
（4）Taq酶有 5′→3′外切核酸酶活性，可水解探针 相对定量通过内标定量：
内标（Endogenous Control）通常是β-actin、GAPDH基因等看家基因，在细胞中的表达量或在基因组中定，受环境因素影响小，内标定量结果代表了样本中所含细胞或基因组数量。
嗜人锥蝇LAMP试剂盒检测步骤：
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表： 试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量 荧光PCR反应液 14µL N×14µL 酶混合物 1 µL N×1 µL 总量 15 µL N×15µL
（1） 计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM。淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。

实验方法步骤：
方法

1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。      10×PCR buffer 
                  5 μl     dNTP mix （2mM）   
          4 μl     引物1（10pM） 
                2 μl     引物2（10pM） 
                2 μl     Taq酶 （2U/μl）
                1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）
   1 μl      加ddH2O至 50 μl 
  视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保温7min。
3：结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl氯仿进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
PCR实验步骤
典型的PCR由（1）高温变性模板；（2）引物与模板退火；（3）引物沿模板延伸三步反应组成一个循环，通过多次循环反应，使目的DNA得以迅速扩增。其主要步骤是：
将待扩增的模板DNA置高温下（通常为93℃-94℃）使其变性解成单链；
人工合成的两个寡核苷酸引物在其合适的复性温度下分别与目的基因两侧的两条单链互补结合，两个引物在模板上结合的位置决定了扩增片段的长短；
耐热的DNA聚合酶（Taq酶）在72℃将单核苷酸从引物的3’端开始掺入，以目的基因为模板从5’→3’方向延伸，合成DNA的新互补链。