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- CSP10679
- 2025年07月16日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
低温冷藏
- 保质期：
详见说明书
- 英文名：
Lamp kit for Brucella vole
- 库存：
100
- 供应商：
上海莼试
- 规格：
50T
需要自备的器材：
1．仪器：分析天平、离心机、荧光 PCR 扩增仪、组织研磨器、-20 ℃冰箱、可调移液器（2 µL、20 µL、200 µL、1000 µL）。
2．耗材：荧光 PCR 专用反应管、眼科剪、眼科镊、生理盐水、1.5 mL 经焦碳酸二乙酯（DEPC）水 处理的灭菌离心管、吸头（10 µL、200 µL、1000 µL）、灭菌双蒸水。
Phospho-ELk1(Ser383) 磷酸化细胞转录因子ELK1抗体
ETV2 ETS相关蛋白71抗体
EDA 外胚层发育不良蛋白1抗体
ETV3L ETV3L蛋白抗体
EphB6 酪氨酸蛋白激酶受体B6抗体
LPA1 溶血磷脂酸受体蛋白1抗体
LPA2 溶血磷脂酸受体蛋白2抗体
LPA3 溶血磷脂酸受体蛋白3抗体
EDG6 内皮细胞的分化蛋白6抗体
EXTL2 外生性骨疣样蛋白2抗体
phospho-EIF4EBP1 (Ser100) 磷酸化eIF4E结合蛋白抗体
phospho-EIF4EBP1(Ser111) 磷酸化eIF4E结合蛋白抗体
ESM1 内皮细胞特异性分子1抗体
eIF3F 真核翻译起始因子3F抗体
eIF3H 真核翻译起始因子3H抗体
eIF4G 真核翻译起始因子4G抗体
eIF6 β4整合素结合蛋白抗体
ECRG4 食道癌相关基因4蛋白抗体
EPO 红细胞生成素抗体
EPHX2 胞浆环氧化物水解酶抗体
Estrogen Related Receptor gamma 雌激素受体相关蛋白3抗体
Estrogen Related Receptor beta 雌激素相关受体β抗体
EMP2 上皮细胞膜蛋白2抗体
ERG25 甲基固醇羟化酶单加氧酶1抗体
EST1A 端粒酶结合蛋白EST1A抗体
EZH1 组蛋白赖氨酸N-甲基EZH1抗体
Epithelial Stromal Interaction 1 上皮间质相互作用蛋白1抗体
EIG121 雌激素诱导基因121蛋白抗体
Endomucin 内皮粘蛋白EMCN抗体
EBP50 细胞骨架连接质膜蛋白抗体
ELMO1 吞噬细胞运动蛋白1抗体
EPHA10 酪氨酸蛋白激酶受体A10抗体
EV71 polyprotein 3D 肠道病毒71型/手足口病病毒抗体
ELF1 转录因子ELF1抗体
Ephrin B3 酪氨酸蛋白激酶B3抗体
phospho-EphB1+EphB2 (Tyr594) 磷酸化酪氨酸蛋白激酶受体B1+B2抗体
EphB1+EphB2+EphB3+EphB4 酪氨酸蛋白激酶受体B1+B2+B3+B4抗体
EMX2 空通气孔样蛋白2抗体
EN2 同源盒蛋白转录因子EN2抗体
phospho-ERK5 (Thr218 + Tyr220) 磷酸化细胞外信号调节激酶5抗体
ENTPD2 CD39样蛋白1抗体
EIF5 真核翻译起始因子5抗体
EBF2 早期B淋巴细胞因子2抗体
ELAVL2 ELAVL2蛋白抗体
ELAVL2 + ELAVL4 ELAVL2+ELAVL4蛋白抗体
Engrailed 1 同源盒蛋白转录因子EN1抗体
ER81 转录因子ER81蛋白抗体
EAA1 谷氨酸受体KA1抗体
eIF3K 真核翻译起始因子3K抗体
EGR3 早期生长反应蛋白3抗体
EMSY EMSY蛋白抗体
FBXO36 FBXO36 F-box蛋白相关蛋白36抗体
ERC2 CAST1蛋白抗体
ERC1 RAB6蛋白抗体
田鼠布鲁氏菌LAMP试剂盒EGFLAM 皮卡丘素抗体
ELAVL4 ELAVL4蛋白抗体
EMR1 表皮生长因子样激素受体1
phospho-ERK1 (Thr197 +Thr202) 磷酸化丝裂原活化蛋白激酶1/2抗体
ETFA 电子转移黄素蛋白α抗体
特点：
1.即开即用，用户只需要提供样品 DNA 模板，操作简单，定量准确快速。
2. 引物经过优化，特异性强。预期的 PCR 产物长度为 560 bp。
3. PCR mix 中含上样染料，PCR 后可以直接上样电泳。
4. 提供阳性对照，便于分析试验结果。
储存条件：
14℃或－20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液：3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
检测步骤：
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
（1） 计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM。淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。
注意事项：
①加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照鸡血红蛋白(HB)ELISA检测试剂盒说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
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文献和实验释放酶活；一类是抗体法修饰的热启动酶，如 Champagne Taq ，预变性 95℃30s 即可释放酶活。使用时注意预变性时间，方能获得满意的扩增效果。 2. 选择 Lamp 扩增长片段 大于 5Kb 的长片段又该如何扩增呢？如果实验对保真度的需求不高，那么就可以使用 LAmp DNA 聚合酶。其保真度是 Taq 酶的 6 倍，可扩增超过 20Kb 的基因组、cDNA 片段，对于低拷贝、低纯度、以及不同 GC 含量的模板都具有很高的成功率。 3. 选择高保真酶快速高效扩增 如果实
组织WHO、各国学者和相关政府部门的关注，短短几年，该技术已成功地应用于SARS、禽流感、HIV等疾病的检测中，在这次甲型H1N1流感事件中，日本荣研化学公司接受WHO的邀请进行H1N1 LAMP试剂盒的研制。通过荣研公司近十年的推广，LAMP技术已广泛应用于日本国内各种病毒、细菌、寄生虫等引起的疾病检测、食品化妆品安全检查及进出口快速诊断中，并得到了欧美国家的认同。LAMP方法的优势除了高特异性、高灵敏度外，操作十分简单，对仪器设备要求低，一台水浴锅或恒温箱就能实现反应，结果的检测也很简单，不需要像PCR
做LAMP实验有一年多的时间了，其间共做了3个关于LAMP的课题，目前为止基本没有污染~尤其是自己的毕业论文，用完了500uL的 FIP，全部开盖跑电涌，没有一次污染。今天为止做完了所有毕业实验，坐下来总结一下自己的心得~~我只是个小硕士生~~所以都是在浅显的方面叙述，希望大家不要鄙视~~首先感谢一下LAMP交流群，没有这么多老师和同伴在，我不可能顺利毕业。比较可惜的是群里现在人满了。下面开始正文~~1. 引物我一共用过8组引物，所有课题加起来。primerexplorer的引物有效性最高
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