万千商家帮你免费找货
0 人在求购买到急需产品
- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
低温冷藏
- 保质期:
详见说明书
- 库存:
100
- 供应商:
上海莼试
- 规格:
50T
典型的PCR由
(1)高温变性模板;
(2)引物与模板退火;
(3)引物沿模板延伸三步反应组成一个循环,通过多次循环反应,使目的DNA得以迅速扩增。
其主要步骤是:
将待扩增的模板DNA置高温下(通常为93℃-94℃)使其变性解成单链;
人工合成的两个寡核苷酸引物在其合适的复性温度下分别与目的基因两侧的两条单链互补结合,两个引物在模板上结合的位置决定了扩增片段的长短;
耐热的DNA聚合酶(Taq酶)在72℃将单核苷酸从引物的3’端开始掺入,以目的基因为模板从5’→3’方向延伸,合成DNA的新互补链。
BMPR- II ELISA Kit 大鼠骨成型蛋白受体Ⅱ 96T
GR- Beta(Human glucocorticoid receptor- Beta) ELISA Kit 人糖皮质激素受体β 96T
BMPR-1A ELISA Kit 大鼠骨成型蛋白受体1A 96T
GR- Alpha(Human glucocorticoid receptor- Alpha) ELISA Kit 人糖皮质激素受体α 96T
BMP-4 ELISA Kit 大鼠骨成型蛋白4 96T
BMP-2 ELISA Kit 大鼠骨成型蛋白2 96T
u-T3(Human Ultrasensitivity Tri-iodothyronine) ELISA Kit 人高敏三碘甲状腺原氨酸 96T
HFABP ELISA Kit rat (Heartfattyacid -bindingprotein) 大鼠心脏脂肪酸结合蛋白 96T
CCK-8(Rat cholecystokinin octapeptide) ELISA Kit 大鼠胆囊收缩素/缩胆囊素八肽 96T
COX-2(rat cyclooxygenase-2) ELISA KIT 大鼠环加氧酶2 96T
BDNF ELISA Kit 大鼠脑源性神经营养因子 96T
LHRH(Human Luteinizing Hormone-Releasing Hormone) ELISA Kit 人黄体生成素释放激素 96T
ACV-A ELISA Kit 大鼠活化素A 96T
8-iso-PG(Human 8-iso prostaglandin) ELISA Kit 人8异前列腺素 96T
ANG- II ELISA Kit 大鼠血管紧张素Ⅱ 96T
Human Renin ELISA Kit 人肾素 96T
ACE ELISA Kit 大鼠血管紧张素转化酶 96T
EPI(Human Epinephrine/Adrenaline) ELISA Kit 人 96T
ER(Human Estradiol receptor) ELISA Kit 人雌二醇受体 96T
PF/PFP(Rat Perforin/Pore-forming protein) ELISA Kit 大鼠穿孔素 96T
NKA ELISA Kit(Ret) 大鼠神经肽A 96T
Rat Slit2 ELISA Kit 大鼠Slit2 96T操作步骤 :
1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,zui后在72℃ 保温7min。
3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
转基因元件NOS启动子LAMP试剂盒实验过程:
一、试剂准备
1. DNA模板
2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5.Taq酶
二、操作步骤
1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,zui后在72℃ 保温7min。 3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
风险提示:丁香通仅作为第三方平台,为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全,合理判断,谨慎选购商品,商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品,请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
文献和实验源序列,这些序列通常不存在于野生型植物中。其中,这两个外源的DNA序列与花椰菜花叶病毒的35S启动子和根癌农杆菌的NOS终止子整合在一起。假如这两个序列的任一个被扩增出来,则表明外源基因已经转化入植物基因组中。原则上所有已批准的转基因农作物都是用含有这两个元件或其中任一个的构建载体转化的。对于一些在转基因构建载体中新使用的启动子和终止子序列的检测,逐渐成为科学家们关注的焦点。目前,已经设计了一些针对不同大小产物的引物对。表1为合成的引物序列,选择退火位点生成单一DNA片段,以便于结果的分析。PCR反应
很耗时间; 2) 区域或者组织特异性不高:因为转基因小鼠依赖的基因敲除的特异性只能依赖于启动子的调控,而有些启动子并不能完全符合科研工作者对于区域或者组织特异性的要求,这样就会使实验结果不精确。 1.病毒依赖的基因重组 由于转基因动物依赖的基因重组存在以上不足,现在越来越多的科研工作者开始采用比较灵活的方式使用Cre-loxP系统。通过病毒引入Cre或loxP元件,结合一种转基因小鼠是比较常用的方式(图3)。相比于转基因动物依赖的基因重组,病毒依赖的基因重组有以下优点: 1) 更强
或S1作图精确定位TSS 引物延伸及s1核酸酶 保护 2)启动子区域(顺式作用元件)的确定 a)生物信息 学预测启动子区域 b)克隆5’-flanking sequence,并连接到报告基因 载体中 c)缺失、突变 d)荧光素酶活性分析 e)确定转录调控区域(启动子区域) 3)转录因子(反式作用元件)结合位点的确定 a)生物信息学预测转录因子结合位点 b)实验证实转录
技术资料暂无技术资料 索取技术资料




