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转基因元件NOS启动子LAMP试剂盒

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  • 上海莼试
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  • CSP10346
  • 2025年07月16日
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      100

    • 供应商

      上海莼试

    • 规格

      50T

    转基因元件NOS启动子LAMP试剂盒实验步骤
    典型的PCR由
    (1)高温变性模板;
    (2)引物与模板退火;
    (3)引物沿模板延伸三步反应组成一个循环,通过多次循环反应,使目的DNA得以迅速扩增。
    其主要步骤是:
    将待扩增的模板DNA置高温下(通常为93℃-94℃)使其变性解成单链;
    人工合成的两个寡核苷酸引物在其合适的复性温度下分别与目的基因两侧的两条单链互补结合,两个引物在模板上结合的位置决定了扩增片段的长短;
    耐热的DNA聚合酶(Taq酶)在72℃将单核苷酸从引物的3’端开始掺入,以目的基因为模板从5’→3’方向延伸,合成DNA的新互补链。
    产品细节图片1
    BMPR- II ELISA Kit  大鼠骨成型蛋白受体Ⅱ     96T
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    BMPR-1A ELISA Kit  大鼠骨成型蛋白受体1A     96T
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    BMP-4 ELISA Kit  大鼠骨成型蛋白4     96T
    BMP-2 ELISA Kit  大鼠骨成型蛋白2     96T
    u-T3(Human Ultrasensitivity Tri-iodothyronine) ELISA Kit  人高敏三碘甲状腺原氨酸     96T
    HFABP ELISA Kit rat (Heartfattyacid -bindingprotein)  大鼠心脏脂肪酸结合蛋白     96T
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    Human Renin ELISA Kit  人肾素     96T
    ACE ELISA Kit  大鼠血管紧张素转化酶     96T
    EPI(Human Epinephrine/Adrenaline) ELISA Kit  人     96T
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    NKA ELISA Kit(Ret)  大鼠神经肽A     96T
    Rat Slit2 ELISA Kit  大鼠Slit2     96T操作步骤 :
    1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
          10×PCR buffer             5μl
          dNTP mixl                 4μl
           引物1(10pM)               2μl
           引物2(10PM)              2μl
           Taq酶(2U/μl)            1μl
          DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
          加ddH2O至               50 μl
        视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
    2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,zui后在72℃ 保温7min。
    3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
    4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
    产品细节图片2
    转基因元件NOS启动子LAMP试剂盒实验过程:
    一、试剂准备
    1. DNA模板
    2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物)
    3.10×PCR Buffer
    4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5.Taq酶
    二、操作步骤
    1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
    10×PCR buffer             5μl
    dNTP mixl                 4μl
    引物1(10pM)               2μl
    引物2(10PM)              2μl
    Taq酶(2U/μl)            1μl
    DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
    加ddH2O至               50 μl
    视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
    2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,zui后在72℃ 保温7min。 3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
    4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。

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